規(guī)模牛場(chǎng)傳染性牛鼻氣管炎流行病學(xué)調(diào)查研究

吳慶，史文軍，林為民*，石國旺，黃新

1.新疆兵團(tuán)第八師134團(tuán)農(nóng)業(yè)發(fā)展服務(wù)中心，新疆石河子 832000；2.新疆兵團(tuán)第八師畜牧獸醫(yī)工作站，新疆石河子 832000；3.石河子大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，新疆石河子 832000；4.新疆農(nóng)墾科學(xué)院，新疆石河子 832000

新疆師市養(yǎng)殖奶牛的歷史可追溯至20 世紀(jì)60年代，為師市奶牛養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展做出了重大貢獻(xiàn)。2002 年，師市為快速做大做強(qiáng)畜牧業(yè)，分6 個(gè)批次從澳大利亞進(jìn)口16 673 頭荷斯坦黑白花奶牛，均由北京市進(jìn)出口檢疫檢驗(yàn)局檢疫合格（IBRV 等7種病毒檢測(cè)均為陰性），指定隔離場(chǎng)隔離45 d 后運(yùn)回。截至目前，師市已發(fā)展到1 700 頭以上的奶牛場(chǎng)19個(gè)。2016 年之后，有1 個(gè)牛場(chǎng)使用挪威紅牛凍精×荷斯坦奶牛，培育出挪荷F1、F2 牛1 273 頭；有2 個(gè)牛場(chǎng)使用弗萊維赫乳肉兼用牛凍精×荷斯坦奶牛，培育出弗荷F1、F2牛1 452頭；分別與本場(chǎng)荷斯坦奶牛分群飼養(yǎng)。2005 年，羅瓊等[1]從進(jìn)口種用奶牛中分離出傳染性牛鼻氣管炎病毒后，又有學(xué)者[2-5]先后在新疆各地分離到牛傳染性鼻氣管炎病毒（IBRV），證實(shí)了IBRV 的存在。2022 年3 月，針對(duì)冬春季節(jié)出現(xiàn)犢牛眼角、鼻腔分泌大量膿性分泌物、呼吸極度困難等臨床癥狀，呈急性發(fā)病經(jīng)過，常因窒息而死等IBR 感染現(xiàn)狀，筆者所在課題組開展了IBRV的血清學(xué)流行病學(xué)調(diào)查，進(jìn)一步摸清IBRV 的感染情況，為制定IBR 綜合防控措施和推動(dòng)牛場(chǎng)IBRV凈化工作提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 樣品來源

以預(yù)期流行率抽樣原則，3 個(gè)品系的犢牛、青年牛、后備牛和成母牛分別采用分階段抽樣原則。第1 階段采取普查的方法，19 個(gè)規(guī)模牛場(chǎng)全部作為抽樣單元；第2階段抽樣場(chǎng)內(nèi)按照95%置信水平（CI）、10%可接受誤差、50%預(yù)期流行率進(jìn)行抽樣。共采集健康牛血清樣品2 923份，鼻拭子1 127份，－20 ℃保存?zhèn)溆?，詳見?。每個(gè)品系牛群均按照犢牛（0～2 月齡）、青年牛（3～17 月齡）、后備牛（18 月齡～產(chǎn)犢）、成母牛分為4組。

表1 3個(gè)品系牛血清、鼻拭子樣品采集情況 份

1.2 檢測(cè)試劑

牛皰疹病毒I 型（BHV-1）實(shí)時(shí)熒光PCR 檢測(cè)試劑盒（批號(hào)：BHVI20230131P），購于哈爾濱元亨生物藥業(yè)有限公司；牛傳染性鼻氣管炎ELISA 檢測(cè)試劑盒（批號(hào)：210232A）；購于青島瑞爾生物技術(shù)有限公司。

1.3 檢測(cè)方法

血清和鼻拭子樣品送新疆農(nóng)墾科學(xué)院獸醫(yī)研究所進(jìn)行IBRV 抗原、抗體的檢測(cè)。IBRV 抗原、抗體檢測(cè)均按照檢測(cè)試劑盒說明書的操作方法和判斷標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。

1.4 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 軟件整理和制圖，并將其按照不同年齡段、不同品系進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，利用χ2檢驗(yàn)法進(jìn)行數(shù)據(jù)間的差異性比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 3個(gè)品系牛鼻拭子樣品IBRV抗原檢測(cè)情況

由表2 可知：共檢測(cè)鼻拭子樣品1 127 頭份，陽性樣品檢出19 頭份，IBRV 總陽性率為1.69%。其中，荷后備牛抗原陽性率最高，為2.78%，弗荷青年?？乖栃月首畹?，為1.01%；3 個(gè)品系間抗原陽性率差異不顯著，說明IBRV 陽性率與品系無顯著相關(guān)，不同品系牛之間不影響IBRV 的流行。3個(gè)品系后備牛和成母牛IBRV 陽性率顯著高于犢牛和青年牛，這可能是由于犢牛單獨(dú)飼喂，青年?；顒?dòng)范圍小，與其他牛只接觸機(jī)會(huì)少和生長時(shí)間短。

表2 3個(gè)品系牛血清樣品IBRV抗原檢測(cè)結(jié)果

2.2 3個(gè)品系牛血清樣品IBRV抗體檢測(cè)情況

由表3 可知：共檢測(cè)血清樣品2 923 頭份，陽性樣品檢出1 570 頭份，抗體總陽性率為53.71%。其中：荷成母?？贵w陽性率最高，為64.59%，荷犢?？贵w陽性率最低，為35.94%；3個(gè)品系間抗體陽性檢出率差異不顯著，說明不同品系牛之間不影響IBRV的流行。3個(gè)品系青年牛、后備牛和成母牛IBRV 抗體陽性率顯著高于犢牛，這可能是由于犢牛單獨(dú)飼喂、青年牛活動(dòng)范圍小，與其他牛只接觸機(jī)會(huì)少和生長時(shí)間短。

表3 3個(gè)品系牛血清樣品IBRV抗體檢測(cè)結(jié)果

2.3 場(chǎng)群血清樣品IBRV抗原、抗體檢測(cè)情況

場(chǎng)群抗原陽性率為78.95%，IBRV 抗原陽性最高的牛場(chǎng)檢出率為4.27%，IBRV 抗原陽性最低的牛場(chǎng)檢出率為1.02%。場(chǎng)群抗體陽性率為100%，IBRV 抗體陽性最高的牛場(chǎng)檢出率為79.13%，IBRV抗體陽性最低的牛場(chǎng)檢出率為25.62%。提示師市牛場(chǎng)IBRV 感染范圍大、危害嚴(yán)重，應(yīng)引起相關(guān)部門高度重視。

3 討論

楊蘭蘭等[6]研究結(jié)果表明，寧夏地區(qū)牛傳染性鼻氣管炎病毒核酸個(gè)體陽性率為3.23%；李穎等[7]研究結(jié)果表明，山西省部分牛病毒性腹瀉和牛傳染性鼻氣管炎抗體陽性率40.3%，群體陽性率71.21%：張迎春等[8]在新疆南疆部分規(guī)模牛場(chǎng)牛傳染性鼻氣管炎血清流行病學(xué)調(diào)查中發(fā)現(xiàn)，群間IBRV 抗體陽性率為100%；肖望成等[9]研究發(fā)現(xiàn)，IBRV 抗體陽性率為74%以上；白明山[10]在山東省牛傳染性鼻氣管炎流行病學(xué)調(diào)查中發(fā)現(xiàn)，IBRV 抗體陽性率為58%。在本試驗(yàn)中，新疆師市IBRV 的血清抗原陽性率為1.69%，抗體陽性總檢出率為53.71%，相較于新疆南疆、寧夏、山西和山東部分地區(qū)，師市IBRV 的抗原陽性率較低，但遠(yuǎn)高于IBR 的凈化標(biāo)準(zhǔn)。因此，從IBRV 抗原、抗體流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果來看，師市規(guī)模牛場(chǎng)已普遍存在IBRV 感染，不同規(guī)模牛場(chǎng)的IBRV陽性率高低不一。對(duì)于IBRV 抗原、抗體陽性率高的牛場(chǎng)應(yīng)該加強(qiáng)檢疫，降低飼養(yǎng)密度，隔離淘汰陽性病畜，并加強(qiáng)生物安全措施，進(jìn)一步落實(shí)BVD“檢疫-清除-檢疫-清除”等凈化措施的落實(shí)。