基于圖網(wǎng)絡(luò)和網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)探討名老中醫(yī)治療腰椎間盤突出癥用藥規(guī)律及作用機(jī)制

席崇程 ，孫資金 ，佟常青 ，張杰 ，余陽 ，翟雙慶

1.成都中醫(yī)藥大學(xué)，四川 成都 611137；2.北京中醫(yī)藥大學(xué)，北京 100029

腰椎間盤突出癥（lumbar disc herniation，LDH）是指腰椎間盤發(fā)生退行性病變后，纖維環(huán)部分或全部破裂，髓核單獨或連同纖維環(huán)、軟骨終板向外突出，刺激或壓迫竇椎神經(jīng)和神經(jīng)根，引起的以腰腿痛為主要癥狀的一種綜合征[1]。LDH病情易反復(fù)發(fā)作，遷延難愈[2]，發(fā)病率為2%～3%[3]。我國LDH的發(fā)病人群以青壯年居多[4]，且男性發(fā)病率高于女性[5]。

關(guān)于LDH的相關(guān)論述，最早在《黃帝內(nèi)經(jīng)》便有記載。《靈樞·經(jīng)脈》載“脊痛，腰似折，髀不可以曲，腘如結(jié)”，《素問·刺腰痛篇》曰：“足太陽脈，令人腰痛，引項脊尻背如重狀。”詳細(xì)論述了LDH的癥狀。LDH屬于中醫(yī)學(xué)“腰痛”“痹證”范疇[6]，因此許多醫(yī)家將其與腰痛合而論述，闡其病因病機(jī)、治法處方等內(nèi)容。關(guān)于LDH的病機(jī)，古今醫(yī)家皆著眼于“本虛標(biāo)實”[7]，將補(bǔ)肝益腎、強(qiáng)筋壯骨、益氣溫陽等扶正之法與散寒除濕、活血化瘀等祛邪手段相結(jié)合，攻補(bǔ)兼施，從而調(diào)整全身氣血陰陽狀態(tài)，緩解腰腿部疼痛和麻木。關(guān)于LDH的治療，中醫(yī)有針灸、按摩、針刀和內(nèi)服中藥等多種治法，并總結(jié)出一系列有效驗方，如獨活寄生湯、身痛逐瘀湯、四妙散。現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，內(nèi)服中藥治療LDH，可明顯縮短炎癥反應(yīng)時間和反應(yīng)程度，有效減輕疼痛程度[8]。

內(nèi)服中藥治療LDH具有顯著優(yōu)勢，因此基于名老中醫(yī)臨證經(jīng)驗，挖掘治療LDH的有效藥物，對現(xiàn)代中醫(yī)臨床治療LDH具有一定的指導(dǎo)作用。隨著現(xiàn)代人工智能技術(shù)的發(fā)展，機(jī)器學(xué)習(xí)開始應(yīng)用于中醫(yī)藥領(lǐng)域，用于挖掘臨床數(shù)據(jù)中的隱性知識，其中應(yīng)用較多的為以關(guān)聯(lián)規(guī)則、聚類分析為首的無監(jiān)督學(xué)習(xí)算法[9]。在計算機(jī)領(lǐng)域，圖指代一種廣義的抽象結(jié)構(gòu)，用來表示一對實體及其之間的關(guān)系[10]。圖數(shù)據(jù)模型及圖數(shù)據(jù)庫能高效處理復(fù)雜數(shù)據(jù)聯(lián)系和表達(dá)非結(jié)構(gòu)化數(shù)據(jù)[11]，以之對中醫(yī)藥數(shù)據(jù)表述可以提升中醫(yī)藥知識表達(dá)的充分性和準(zhǔn)確性[12]，將其與機(jī)器學(xué)習(xí)相結(jié)合研究醫(yī)學(xué)領(lǐng)域相關(guān)問題具有一定優(yōu)勢，因此有中醫(yī)藥領(lǐng)域相關(guān)學(xué)者以圖數(shù)據(jù)模型研究中醫(yī)相關(guān)理論[13-14]。本研究將機(jī)器學(xué)習(xí)算法模型與圖算法模型相結(jié)合，以名老中醫(yī)臨床處方數(shù)據(jù)作為研究對象進(jìn)行用藥規(guī)律分析。再以網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法預(yù)測名老中醫(yī)治療LDH常用藥物的作用機(jī)制，為后期實驗提供基礎(chǔ)，指導(dǎo)現(xiàn)代中醫(yī)臨床對LDH的認(rèn)識和治療。

1 資料與方法

1.1 數(shù)據(jù)來源

依托國家重點研發(fā)計劃課題-東北部地區(qū)名老中醫(yī)學(xué)術(shù)觀點、特色診療方法和重大疾病防治研究經(jīng)驗，從課題組收集的37位東北部地區(qū)名老中醫(yī)（包括國醫(yī)大師、全國名中醫(yī)、第一至五屆名老中醫(yī)傳承人）診治病例數(shù)據(jù)中，選取內(nèi)服中藥治療LDH、符合納入排除標(biāo)準(zhǔn)的有效臨床病例。

1.2 篩選標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：①根據(jù)LDH 的中西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)，可明確診斷為“腰椎間盤突出癥”。②就診次數(shù)不低于3診次。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①不符合以上納入標(biāo)準(zhǔn)者。②患者處方信息記錄不全者。③病例數(shù)據(jù)涉及精神類、傳染性疾病患者。④病例數(shù)據(jù)涉及妊娠、哺乳期婦女。

1.3 數(shù)據(jù)規(guī)范

參考《中華人民共和國藥典》[15]和《中藥學(xué)》[16]，對納入病例的處方數(shù)據(jù)進(jìn)行規(guī)范化處理，將中藥別稱、簡稱等進(jìn)行統(tǒng)一，如將“蒼白術(shù)”拆分為“蒼術(shù)”和“白術(shù)”，“懷牛膝、懷夕和山莧菜”統(tǒng)一為“牛膝”。所有數(shù)據(jù)規(guī)范工作由2人背對背處理，然后將結(jié)果進(jìn)行比較綜合，如有爭議則邀請第3人進(jìn)行判定。

1.4 數(shù)據(jù)預(yù)處理與算法分析

本研究主要運用Python語言調(diào)用Pandas、Numpy、Networkx等包，完成數(shù)據(jù)預(yù)處理、構(gòu)建獨熱編碼矩陣和無向圖等任務(wù)。

（1）獨熱編碼：用sklearn的onehot_enconder對藥物進(jìn)行編碼，將每一條病例使用的藥物標(biāo)為1，未使用的藥物標(biāo)為0。由于炙甘草、生姜、大棗三味藥在方劑中主要是調(diào)和藥性，且其應(yīng)用頻率較高，因此在獨熱編碼階段去掉三味藥物，降低稀疏矩陣的維度，去除噪聲數(shù)據(jù)。

（2）頻次分析和關(guān)聯(lián)規(guī)則分析：以Numpy對矩陣進(jìn)行運算，得到名老中醫(yī)治療LDH高頻藥物；應(yīng)用Apriori算法進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析，以支持度和置信度判定藥物之間的關(guān)聯(lián)強(qiáng)度。本研究根據(jù)數(shù)據(jù)實際情況，將支持度和置信度均設(shè)置為60%，尋找滿足條件的強(qiáng)關(guān)聯(lián)規(guī)則。支持度和置信度計算公式如下。

SX→Y=N(X∩Y) /N

CX→Y=N(X∩Y) /N(X)

（3）圖網(wǎng)絡(luò)和隨機(jī)游走模型分析：根據(jù)關(guān)聯(lián)規(guī)則的結(jié)果，以Networkx構(gòu)建藥物之間的關(guān)聯(lián)網(wǎng)絡(luò)圖，并以Numpy等包在圖上進(jìn)行步長為7、無回退的隨機(jī)游走進(jìn)行圖采樣，減小網(wǎng)絡(luò)圖的復(fù)雜程度。通過隨機(jī)游走模型對復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)圖進(jìn)行采樣，不僅可以減少圖中噪聲數(shù)據(jù)，在關(guān)聯(lián)規(guī)則結(jié)果的基礎(chǔ)上更精準(zhǔn)分析核心藥對，而且通過這種隨機(jī)游走進(jìn)行欠采樣的“布朗運動”可以獲取樣本總體特征分布，保證得到的數(shù)據(jù)分析結(jié)果更加穩(wěn)定。

根據(jù)采樣的結(jié)果，計算采樣形成鏈路長度，尋找最短路徑。然后在最短路徑形成的網(wǎng)絡(luò)圖上統(tǒng)計邊數(shù)，判定邊數(shù)較高的邊所連接的藥物重要性較高。最后確定重要度較高藥物的劑量應(yīng)用范圍。

1.5 網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析

1.5.1 藥物成分和作用靶點挖掘

從中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫與分析平臺（TCMSP,tcmspw.com/tcmsp.php）與BATMAN-TCM 數(shù)據(jù)庫（bionet.ncpsb.org.cn/batman-tcm/）獲取各藥物（甘草、丹參、澤瀉、絡(luò)石藤、狗脊、杜仲、陳皮、牛膝、延胡索、雞血藤）的成分及其對應(yīng)靶點。在TCMSP數(shù)據(jù)庫中，以口服生物利用度（OB）和類藥性（DL）對相關(guān)成分進(jìn)行篩選。將OB≥30%、DL≥0.18的活性成分納入研究。在篩選活性成分后，使用UniProt數(shù)據(jù)庫（www.uniprot.org/）中的UniProtKB搜索功能，通過輸入物種限制為“Homo sapiens”的蛋白質(zhì)名稱，來獲得每種蛋白質(zhì)的官方基因名稱。而在BATMAN-TCM中，設(shè)置Score cutoff為20，Adjusted P-value為0.05進(jìn)行篩選，獲得藥物對LDH的作用靶點。

1.5.2 腰椎間盤突出癥的藥物-疾病靶點挖掘與預(yù)測

在線人類孟德爾遺傳數(shù)據(jù)庫（OMIM，https://omim.org/）、DisGeNET（https://www.disgenet.org/）和GeneCards 數(shù)據(jù)庫（https://www.genecards.org/），以lumbar disc herniation為關(guān)鍵詞進(jìn)行檢索，合并3個數(shù)據(jù)庫的結(jié)果得到疾病靶點。將已經(jīng)收集到的藥物活性成分的靶點與LDH的靶點進(jìn)行交集操作，并使用R4.0.2與相關(guān)R包（venn）繪制維恩圖，以交集靶點作為藥物治療LDH的有效靶點。

1.5.3 蛋白相互作用網(wǎng)絡(luò)分析

為進(jìn)一步確定調(diào)節(jié)核心，將上述藥物-疾病共同作用靶點提交至目前擁有最多生物與蛋白質(zhì)及廣泛和多樣化的STRING數(shù)據(jù)庫（https://string-db.org/），設(shè)置操作條件為“Homo sapiens”，置信度設(shè)置為0.9，并隱藏獨立存在的節(jié)點。將蛋白相互作用（PPI）網(wǎng)絡(luò)結(jié)果從STRING 導(dǎo)出，并導(dǎo)入Cytoscape3.9.0 軟件，利用MCODE插件分析核心網(wǎng)絡(luò)，識別聯(lián)系緊密的子模塊。將參數(shù)設(shè)置為degree cutoff=2，node score cutoff=0.2，K-core=2，max depth=100，選擇其中score值最高的網(wǎng)絡(luò)。

1.5.4 富集分析

將收集到的共有靶點轉(zhuǎn)化為相關(guān)的Entrez ID后，進(jìn)行GO富集分析和KEGG通路富集分析。使用R4.0.2與相關(guān)R 包（clusterProfiler,org.Hs.eg.db,enrichplot,ggplot2,pathview,ggnewscale,stringr）進(jìn)行富集分析，P＜0.05認(rèn)為有顯著性差異。

2 結(jié)果

2.1 頻次分析結(jié)果

本研究共納入476例有效病例，病例涉及9位名老中醫(yī)，病例數(shù)據(jù)詳見http://mingyi.bucm.edu.cn。涉及203味中藥，其中頻次≥50的中藥40味。將頻次≥50的中藥保留并更新獨熱編碼矩陣。

表1 476例名老中醫(yī)治療LDH病例處方高頻藥物（頻次≥50）

2.2 關(guān)聯(lián)規(guī)則分析結(jié)果

對頻次≥50的40味藥物進(jìn)行關(guān)聯(lián)規(guī)則分析，設(shè)置置信度閾值為0.6、支持度閾值為0.6。本研究共獲得符合條件的2味藥物強(qiáng)關(guān)聯(lián)規(guī)則81對，其中支持度排前5位的藥對分別是延胡索-陳皮、杜仲-陳皮、杜仲-雞血藤、陳皮-雞血藤和牛膝-陳皮。對強(qiáng)關(guān)聯(lián)規(guī)則藥對以熱圖進(jìn)行可視化展示，詳見圖1。

圖1 476例名老中醫(yī)治療LDH病例處方藥物關(guān)聯(lián)規(guī)則熱圖（置信度≥0.6，支持度≥0.6）

2.3 無向圖游走分析結(jié)果

將藥物作為無向圖的節(jié)點，藥物之間的關(guān)聯(lián)關(guān)系作為節(jié)點之間的邊，構(gòu)建名老中醫(yī)治療LDH中藥處方的無向同構(gòu)圖。本研究以邊權(quán)重代表兩節(jié)點間的距離，在對邊權(quán)重的設(shè)置上，其計算公式如下：

藥對之間的關(guān)聯(lián)程度可以用邊的權(quán)重來衡量。邊的權(quán)重越小，則藥對之間的距離越短，藥對之間的關(guān)聯(lián)性越強(qiáng)，二者相互配合應(yīng)用的可能性越大。通過這種方式，便可以構(gòu)建藥物之間的無向有權(quán)圖。以Networkx對無向圖進(jìn)行可視化展示，詳見圖2。

圖2 476例名老中醫(yī)治療LDH處方藥物無向網(wǎng)絡(luò)

以每個節(jié)點作為起點，進(jìn)行步長為7的無回退游走。由于藥物網(wǎng)絡(luò)圖是無向圖，因此其游走方式為雙向游走。如對于藥對（附子，肉桂），附子→肉桂和肉桂→附子的路徑皆可行。通過在無向圖進(jìn)行游走，生成包含8個節(jié)點的路徑42 503 924條。計算每一條路徑的長度，尋找出基于每個起點的最短路徑，其計算公式如下：

路徑長度可以反映中藥聯(lián)合配伍成立的可能性，路徑越短，則聯(lián)合應(yīng)用可能性越大。通過在無向圖上進(jìn)行游走，獲得以每個節(jié)點為起點的所有路徑，然后取最短路徑進(jìn)行下游任務(wù)。

2.4 基于游走結(jié)果的常用藥物發(fā)現(xiàn)結(jié)果

根據(jù)游走規(guī)則，本研究共獲得86條路徑。然后將這些路徑以Networkx進(jìn)行可視化分析，形成采樣后的藥物配伍復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)圖，并基于采樣后的復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)分析用藥規(guī)律。見圖3。為清晰分析用藥規(guī)律，本研究將出現(xiàn)邊數(shù)＜26的藥對路徑以藍(lán)色虛線表示，將邊數(shù)＞26的藥對路徑以紅色實線表示。從圖3可見，基于圖數(shù)據(jù)模型的高頻藥物主要涉及丹參、澤瀉、絡(luò)石藤、狗脊、杜仲、陳皮、牛膝、延胡索、雞血藤9味藥。由于甘草已在數(shù)據(jù)預(yù)處理階段去掉，因此在網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究過程中加上調(diào)和藥性的炙甘草。

圖3 476例名老中醫(yī)治療LDH病例處方常用路徑

2.5 常用藥物劑量分析結(jié)果

藥物的用量并非固定值，而是根據(jù)疾病的輕重、患者體質(zhì)等相關(guān)因素進(jìn)行調(diào)整。同時藥量少量的變動對方劑的功效影響不大。因此，本研究基于臨床上藥物的應(yīng)用劑量，進(jìn)一步探討藥物的劑量應(yīng)用范圍。以Pandas的cut函數(shù)對每個藥物的應(yīng)用劑量進(jìn)行分箱，探索最佳分箱數(shù)目和藥量集中范圍，最終得到表2、圖4所示的藥物高頻用量范圍。將藥物的用量范圍與對應(yīng)中藥相結(jié)合，最終得到結(jié)果：丹參15～25 g，澤瀉12～15 g，絡(luò)石藤15～18 g，狗脊10～20 g，杜仲17～25 g，陳皮12～15 g，牛膝12～20 g，延胡索12～15 g，雞血藤17～30 g，炙甘草9～15 g。

圖4 476例名老中醫(yī)治療LDH病例處方常用藥物劑量分布

表2 476例名老中醫(yī)治療LDH病例處方常用藥物劑量使用情況

2.6 基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的作用機(jī)制探討結(jié)果

2.6.1 活性成分和靶點篩選結(jié)果

在TCMSP 和BATMAN-TCM 中，按照篩選條件得到篩選后的活性成分，其中陳皮4個、丹參58個、杜仲24個、甘草88個、狗脊5個、雞血藤23個、絡(luò)石藤9個、牛膝16個、延胡索49個、澤瀉7個。合并，去除重復(fù)項后，共得到258個活性成分，將其作為相關(guān)藥物的有效成分。

使用TCMSP數(shù)據(jù)庫得到各藥物成分的預(yù)測靶點后，使用UniProt數(shù)據(jù)庫進(jìn)行蛋白-基因名稱轉(zhuǎn)換，與BATMAN-TCM中得到的靶點進(jìn)行合并去重后，共得到306個相關(guān)基因名稱，即為相關(guān)藥物有效成分對人體的作用靶點。

2.6.2 蛋白、基因分析結(jié)果

從OMIM數(shù)據(jù)庫、DisGeNET數(shù)據(jù)庫和GeneCards數(shù)據(jù)庫獲得LDH靶點。合并所有靶點并去重，共獲取靶點558個。將疾病靶點和藥物作用靶點經(jīng)過交集操作后，藥物-疾病共得到58個交集靶點，即藥物作用于LDH的有效靶點。

將藥物作用于LDH有效靶點上傳至STRING數(shù)據(jù)庫，得到含58個點、171條邊，average node degree=5.9的PPI網(wǎng)絡(luò)（見圖5）。使用MCODE插件進(jìn)行進(jìn)一步分析，最終得到EGFR、HIF1A、FOS、MAPK1、MPAK14、ESR1共6個核心基因（見圖6）。

圖5 476例名老中醫(yī)治療LDH病例處方常用藥物靶點PPI網(wǎng)絡(luò)

圖6 476例名老中醫(yī)治療LDH病例處方常用藥物靶點作用核心基因

2.6.3 GO和KEGG通路富集分析結(jié)果

為進(jìn)一步闡明藥物治療LDH的潛在機(jī)制與生物通路，本研究進(jìn)行了GO富集分析與KEGG通路富集分析。通過GO富集分析分析，共獲得了2 324個條目，包括2 090個生物過程（biological process）條目，74個細(xì)胞組分（cellular component）條目與160個分子功能（molecular function）條目（見圖7）。

圖7 476例名老中醫(yī)治療LDH病例處方常用藥物靶點GO富集分析

藥物治療LDH 主要途徑涉及活性氧反應(yīng)、氧化應(yīng)激反應(yīng)及輻射反應(yīng)等生物過程；膜筏、膜微區(qū)、囊泡管腔等細(xì)胞成分；RNA聚合酶ii特異性DNA結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合、磷酸酶結(jié)合、蛋白酶結(jié)合等分子功能。

應(yīng)用KEGG 富集分析研究藥物治療LDH 的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，共有144條具有統(tǒng)計學(xué)意義的相關(guān)通路（見圖8），包括AGE-RAGE信號通路、流體剪切應(yīng)力和動脈粥樣硬化、脂質(zhì)與動脈粥樣硬化、IL-17信號通路、卡波濟(jì)肉瘤-相關(guān)皰疹病毒感染、腫瘤壞死因子信號通路等。

圖8 476例名老中醫(yī)治療LDH病例處方常用藥物靶點KEGG通路富集分析

3 討論

3.1 名老中醫(yī)治療腰椎間盤突出癥用藥特點

《張氏醫(yī)通·卷五腰痛》云：“其（腰痛）有風(fēng)寒濕熱閃挫瘀血滯氣痰積，皆為標(biāo)病，而腎虛則其本也。”從本虛標(biāo)實的角度論述腰痛。此言與現(xiàn)代名老中醫(yī)辨治LDH的思路十分吻合，從名老中醫(yī)治療LDH的高頻藥物和藥對分析可以發(fā)現(xiàn)，其處方用藥主要從補(bǔ)虛和祛邪入手。補(bǔ)虛方面，對于肝腎不足者以牛膝、狗脊、杜仲等藥補(bǔ)肝腎，強(qiáng)筋骨。驅(qū)邪方面，寒濕者以薏苡仁、澤瀉、防己、羌活、獨活等祛風(fēng)除濕；陽虛寒凝者，以附子、肉桂等大辛大熱之品與白術(shù)、當(dāng)歸等少火之品，溫陽散寒止痛；瘀血者，以雞血藤、土鱉蟲、延胡索等活血行氣止痛。

3.2 中藥治療腰椎間盤突出癥配伍規(guī)律探討

《中醫(yī)內(nèi)科常見病診療指南》將腰痛分為肝腎虧虛型、瘀血型、寒濕型、濕熱型4型。基于圖數(shù)據(jù)模型發(fā)現(xiàn)，名老中醫(yī)治療LDH常用藥物按照功效主要分為以下4類：補(bǔ)肝益腎、祛風(fēng)除濕、清利濕熱和活血化痰止痛。《諸病源候論·腰背痛諸侯》云：“夫腰痛，皆由傷腎氣所為。”《雜病源流犀燭·腰臍病源流》亦云“諸般腰痛，其源皆屬腎虛”，可見腎虛為LDH關(guān)鍵病機(jī)[17]，因此名老中醫(yī)以杜仲“堅筋骨”（《神農(nóng)本草經(jīng)》）、牛膝“補(bǔ)精氣，利腰膝，填骨髓”（《雷公炮制藥性解》）、狗脊“強(qiáng)筋壯骨”（《玉楸藥解》），三藥相伍為用，共同達(dá)到補(bǔ)肝腎、強(qiáng)腰膝[18]的功效。現(xiàn)代研究亦表明，杜仲-牛膝是治療腰痛的常用藥對[19]，通過AGE-RAGE 信號通路作用于腰神經(jīng)病理性疼痛[20]，從而達(dá)到治療LDH作用。

《金匱要略·五臟風(fēng)寒積聚病脈證并治》云：“腎著之病，其人身體重，腰中冷，如坐水中，形如水狀，反不渴，小便自利，飲食如故，病屬下焦。身勞汗出，衣里冷濕，久久得之，腰以下冷痛，如帶五千錢。”詳細(xì)論述寒濕導(dǎo)致腰痛的病機(jī)與癥狀。腎著癥狀與LDH吻合[21]，可見，寒濕在LDH 發(fā)展過程中十分重要。《丹溪心法·腰痛》有“腰痛主濕熱、腎虛、瘀血、挫閃、有痰積”，肯定濕熱對于腰痛的重要性。因此名老中醫(yī)以絡(luò)石藤“舒經(jīng)活絡(luò)”（《要藥分劑》）以止痛，與澤瀉相伍共奏清熱除濕之功，與杜仲相配又有補(bǔ)肝益腎之效，伍雞血藤、丹參等活血藥又可活血化瘀，一藥而有三功；澤瀉“專主滲泄”，善治風(fēng)寒濕痹（《神農(nóng)本草經(jīng)》《本草經(jīng)解》），陳皮“燥脾濕”（《本草求真》），二藥與狗脊配伍祛風(fēng)除濕，與絡(luò)石藤合用清除濕熱。同時陳皮“同補(bǔ)藥則補(bǔ)，瀉藥則瀉，升藥則升，降藥則降”（《本草備要》），可以調(diào)和全方藥性，使補(bǔ)肝腎、祛風(fēng)濕和活血化瘀之功并進(jìn)。三藥相伍，全面兼顧風(fēng)、寒、濕、熱等外邪，使外邪驅(qū)散，經(jīng)絡(luò)得通，氣血津液運行正常，腰痛自解。

《金匱翼·瘀血腰痛》云：“瘀血腰痛者，閃挫及強(qiáng)立舉重得之。”認(rèn)為瘀血是導(dǎo)致腰痛的重要原因之一。而氣滯血瘀型是LDH常見中醫(yī)證型[22]，二者之論不謀而合。瘀血停于腰部，使腰部氣血痹阻不通，不通則痛。丹參“破宿血，補(bǔ)新血”（《雷公炮制藥性解》），治“腰脊強(qiáng)”（《本草經(jīng)集注》）；延胡索“活血、利氣、止痛”（《本草綱目》），治“一切因血作痛之證”（《雷公炮制藥性解》）雞血藤“活血，暖腰膝”（《本草綱目拾遺》）。三藥合用，行氣活血、通經(jīng)止痛之效甚佳，如《臨證醫(yī)案醫(yī)方》之活血祛瘀湯便以三藥配伍。瘀血得散，腰部氣機(jī)通暢，通則不痛，腰痛自除。

3.3 中藥治療腰椎間盤突出癥作用機(jī)制探討

中醫(yī)藥治療LDH顯示了多通路、多靶點的特點。研究表明，LDH患者椎間盤組織白細(xì)胞介素（IL）-23、IL-17、IL-6、IL-1β、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）基因表達(dá)較高，嚴(yán)重程度與IL-17呈正相關(guān)[23]。動物實驗發(fā)現(xiàn)，LDH大鼠髓核內(nèi)IL-6、TNF-α的mRNA和核因子-κB p65蛋白表達(dá)水平升高[24]。本研究初步探討中藥治療LDH的主要作用靶點及其可能的生物學(xué)過程和信號通路，發(fā)現(xiàn)中藥可能通過IL-17信號通路和TNF信號通路減輕炎癥反應(yīng)和調(diào)節(jié)免疫功能發(fā)揮作用。同時，本研究從臨床數(shù)據(jù)中分析出高頻藥物常用劑量范圍，為進(jìn)一步實驗驗證提供參考。