人參提取物安全毒理學研究

◎ 彭小娟

（瓊臺師范學院，海南 海口 571100）

人參是五加科植物人參的干燥根及根莖，是我國名貴的藥材，已有數千年的藥用和保健歷史[1]。《神農本草經》記載，人參屬于上藥，多服久服不傷人，可延年不老[2]。人參具有“補五臟，安精神，止驚悸，開心益智，明目，輕身延年”功效。現代藥物化學研究表明，人參的主要活性成分為人參皂苷、人參多糖等[3]。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 受試物的制備

將人參粉碎，使用8 倍量70%乙醇回流提取3 次，每次2 h，經過濾、濃縮、干燥及粉碎過篩制得人參提取物[4-5]。人參提取物按人口服0.5 g/日，以成人體重60 kg 計算，相當于8.33 mg·kg-1bw。

1.1.2 實驗動物

SPF 級小鼠、SD 大鼠，購自上海斯萊克實驗動物有限責任公司。

1.2 實驗方法

1.2.1 急性經口毒性試驗

選雌、雄小鼠各10 只，經口灌胃人參提取物最大配制濃度為0.5 g·mL-1，最大灌胃量為20 mL·kg-1bw，即10.0 g·kg-1bw。連續觀察14 d，記錄中毒表現及死亡情況。

1.2.2 90 d 經口毒性試驗

選雌、雄大鼠各60 只，進行90 d 經口毒性試驗。設對照組和低、中、高（0.833 g·kg-1bw、1.670 g·kg-1bw、2.500 g·kg-1bw，分別相當于人體推薦劑量的100、200、300 倍）劑量組，每組20 只；在試驗中期（45 d）、恢復期結束分別設對照衛星組和高劑量衛星組，每組10 只，雌雄各半。低、中、高劑量組受試液配制濃度分別為0.083 3 g·mL-1、0.167 0 g·mL-1、0.250 0 g·mL-1，按10 mL·kg-1bw 體積給大鼠灌胃，對照組給予等體積蒸餾水，每日1 次，連續灌胃90 d。試驗期間對大鼠進行生長發育情況觀察、血液學檢查、血生化學檢查、體重測量、臟器重量及臟/體比值計算、尿液檢查、大體解剖、病理組織學檢查等，并在試驗前和試驗結束時，對高劑量組和對照組大鼠進行眼部檢查。

1.3 數據分析

用SPSS 等軟件對實驗數據進行統計分析。

2 結果與分析

2.1 急性經口毒性試驗

給小鼠灌胃人參提取物后未見明顯中毒癥狀，觀察14 d 無死亡，經口半數致死量LD50＞10.0 g·kg-1bw，屬實際無毒級。結果見表1。

表1 小鼠急性經口毒性試驗結果表

2.2 90 d 經口毒性試驗

2.2.1 樣品對大鼠生長發育的影響

喂養期間，各劑量組大鼠生長發育良好，無異常行為和中毒癥狀，無死亡。

2.2.2 樣品對大鼠血液學指標的影響。

試驗中期（衛星組）、試驗結束（劑量組）、恢復期結束（衛星組），各劑量組大鼠的血常規指標、凝血酶原時間（Prothrombin Time，PT）、活化部分凝血活酶時間（Activated Partial Thromboplastin Time，APTT）與對照組比較差異不顯著（P＞0.05）。結果見表2 ～表4。

表2 受試物大鼠90 d 喂養試驗中期血液學檢查結果表（±s）

表2 受試物大鼠90 d 喂養試驗中期血液學檢查結果表（±s）

項目雄雌對照衛星組高劑量衛星組對照衛星組高劑量衛星組白細胞計數/L（×109）7.16±1.287.24±1.357.12±1.167.09±1.07淋巴細胞/%72.9±2.6271.8±2.4173.1±2.5372.6±2.74中性粒細胞/%21.5±3.5721.9±3.2620.8±3.6321.2±3.47單核細胞/%4.52±1.034.28±0.994.60±0.964.67±1.08紅細胞計數/L（×1012）7.41±0.427.46±0.387.45±0.477.39±0.51血紅蛋白/（g·L-1）146±8.3148±7.5147±6.7146±5.2紅細胞壓積/（L·L-1）0.462±0.030.458±0.040.441±0.020.439±0.03血小板計數/L（×109）753±134760±152739±163732±175 PT/s8.5±1.18.3±0.98.1±0.67.6±0.8 APTT/s24.8±12.424.5±11.624.6±10.725.2±12.1

表3 受試物大鼠90 d 喂養試驗結束血液學檢查結果表（±s）

表3 受試物大鼠90 d 喂養試驗結束血液學檢查結果表（±s）

項目雄雌對照組低劑量中劑量高劑量對照組低劑量中劑量高劑量白細胞計數/L（×109） 7.32±1.42 7.47±1.38 7.24±1.25 7.29±1.16 7.42±1.53 6.83±1.67 7.36±1.85 7.14±1.62淋巴細胞/%74.8±3.75 73.2±3.42 73.9±2.74 74.1±2.36 75.2±3.62 76.0±4.51 75.6±4.27 74.3±3.51中性粒細胞/%21.3±3.86 20.8±4.05 21.2±3.72 21.6±4.13 20.5±3.84 19.9±2.87 21.3±4.10 20.6±3.82單核細胞/%4.71±0.95 4.53±0.88 4.50±0.92 4.39±0.99 4.68±1.27 4.62±1.30 4.70±1.08 4.65.±1.14紅細胞計數/L（×1012） 7.32±0.31 7.38±0.47 7.43±0.39 7.39±0.37 7.42±0.40 7.51±0.51 7.46±0.53 7.48±0.33血紅蛋白/（g·L-1）142±6.2144±7.4145±6.0146±5.7145±6.3148±7.5150±5.6149±4.9紅細胞壓積/（L·L-1） 0.453±0.05 0.452±0.02 0.448±0.03 0.450±0.02 0.439±0.04 0.435±0.02 0.443±0.03 0.440±0.01血小板計數/L（×109） 772±148 783±155 776±137 769±142764±173757±164748±171743±182 PT/s8.2±0.77.9±0.58.1±0.28.0±0.19.1±0.38.8±0.49.0±0.69.3±0.2 APTT/s24.5±11.2 24.3±10.3 23.6±12.1 24.7±10.8 23.9±6.25 22.8±7.42 24.2±5.91 23.5±6.34

表4 受試物大鼠90 d 喂養試驗恢復期結束血液學檢查結果表（±s）

表4 受試物大鼠90 d 喂養試驗恢復期結束血液學檢查結果表（±s）

項目雄雌對照衛星組高劑量衛星組對照衛星組高劑量衛星組白細胞計數/L（×109）7.35±1.427.26±1.307.43±1.347.41±1.52淋巴細胞/%76.3±1.8374.9±2.0577.2±1.8476.8±2.11中性粒細胞/%23.2±2.7622.8±2.5123.6±2.3923.0±2.64單核細胞/%5.20±1.255.13±1.175.18±1.125.24±1.23紅細胞計數/L（×1012）7.70±0.937.59±0.767.68±0.827.64±0.88血紅蛋白/（g·L-1）140±6.4138±5.9146±6.7143±6.2紅細胞壓積/（L·L-1）0.448±0.120.443±0.090.451±0.100.457±0.07血小板計數/L（×109）769±116762±131775±125770±122 PT/s9.0±1.18.7±1.18.5±0.78.3±1.3 APTT/s24.6±10.824.1±11.223.8±10.324.3±11.7

2.2.3 樣品對大鼠血生化學指標的影響

試驗中期（衛星組）、試驗結束（劑量組）、恢復期結束（衛星組），各劑量組大鼠的生化指標與對照組比較均無顯著性差異（P＞0.05），結果見表5～表7。

表5 樣品大鼠90 d 喂養試驗中期生化檢驗結果表（±s）

表5 樣品大鼠90 d 喂養試驗中期生化檢驗結果表（±s）

項目雄雌對照衛星組高劑量衛星組對照衛星組高劑量衛星組丙氨酸氨基轉移酶/（U·L-1）53.6±4.3754.1±4.2952.3±4.8351.9±4.72門冬氨酸氨基轉移酶/（U·L-1）162.8±3.1163.2±2.7150.7±1.8151.1±1.6堿性磷酸酶/（U·L-1）52.4±3.751.8±4.060.6±5.260.2±4.6谷氨酰轉肽酶/（U·L-1）3.5±3.33.6±3.73.6±2.03.4±3.1尿素/（mmol·L-1）6.35±1.136.31±1.246.26±1.056.19±1.10肌酐/（μmol·L-1）47.1±3.7246.9±3.5747.6±5.2447.2±5.13血糖/（mmol·L-1）6.76±1.156.73±1.286.84±1.366.79±1.31總蛋白/（g·L-1）62.2±3.6762.5±3.2458.7±5.1359.3±5.08白蛋白/（g·L-1）33.1±3.2832.6±3.1430.7±2.5331.5±2.19總膽固醇/（mmol·L-1）1.93±0.511.88±0.471.82±0.361.76±0.32甘油三酯/（mmol·L-1）0.70±0.210.69±0.260.65±0.170.62±0.13氯/（mmol·L-1）113.0±3.1112.6±2.8111.4±2.2112.1±2.5鉀/（mmol·L-1）5.30±0.265.26±0.215.17±0.185.10±0.14鈉/（mmol·L-1）149.7±3.0150.8±3.3149.5±2.4148.3±1.9

表6 樣品大鼠90 d 喂養試驗結束生化檢驗結果表（±s）

表6 樣品大鼠90 d 喂養試驗結束生化檢驗結果表（±s）

項目雄雌對照組低劑量中劑量高劑量對照組低劑量中劑量高劑量丙氨酸氨基轉移酶/（U·L-1） 55.8±6.53 54.1±6.14 53.6±4.27 55.2±5.36 54.5±5.71 52.9±6.03 51.8±4.51 53.4±5.26門冬氨酸氨基轉移酶/（U·L-1）145.3±2.8 147.9±1.6 145.6±3.2 144.7±2.5 151.2±2.7 149.3±1.8 150.6±2.2 152.3±1.4堿性磷酸酶/（U·L-1）52.7±6.1 51.6±5.8 50.8±6.3 53.2±4.9 61.5±8.3 62.2±6.7 60.9±7.561.8±6.4谷氨酰轉肽酶/（U·L-1）3.6±1.72.9±2.6 3.2±1.9 3.7±2.23.5±1.83.3±2.42.8±1.03.4±2.3尿素/（mmol·L-1）6.43±1.07 6.25±0.99 5.92±1.14 6.38±1.02 6.17±0.91 6.38±0.88 6.05±1.06 5.98±0.94肌酐/（μmol·L-1）47.6±5.31 48.2±4.96 47.3±6.02 47.8±5.17 48.2±6.42 49.5±5.71 47.8±5.59 50.3±4.76血糖/（mmol·L-1）6.83±1.07 6.71±0.96 6.43±1.16 6.92±1.32 7.06±1.40 6.83±1.29 7.11±2.14 6.75±2.07總蛋白/（g·L-1）61.3±5.37 60.2±5.61 61.5±5.28 62.4±4.98 59.7±6.02 62.4±4.86 59.1±6.12 60.3±5.27白蛋白/（g·L-1）32.4±2.15 33.1±2.36 32.8±2.13 31.9±2.08 31.8±1.83 30.2±2.14 31.6±2.07 32.3±1.94總膽固醇/（mmol·L-1）1.94±0.23 1.90±0.15 1.89±0.19 1.95±0.26 1.89±0.17 1.92±0.31 1.88±0.19 1.97±0.24甘油三酯/（mmol·L-1）0.68±0.15 0.65±0.12 0.59±0.16 0.67±0.18 0.62±0.11 0.64±0.15 0.69±0.21 0.66±0.19氯/（mmol·L-1）112.3±2.6 109.2±3.1 113.5±2.2 112.7±1.9 109.8±1.3 110.2±1.1 108.7±1.8 111.3±1.6鉀/（mmol·L-1）5.27±0.30 5.08±0.26 5.13±0.27 5.22±0.19 4.86±0.15 4.92±0.11 4.81±0.19 5.04±0.23鈉/（mmol·L-1）150.4±1.8 148.7±2.1 149.2±1.3 151.3±2.4 148.6±1.2 147.5±1.6 148.2±2.0 148.8±2.5

表7 樣品大鼠90 d 喂養試驗恢復期結束生化檢驗結果表（±s）

表7 樣品大鼠90 d 喂養試驗恢復期結束生化檢驗結果表（±s）

項目雄雌對照衛星組高劑量衛星組對照衛星組高劑量衛星組丙氨酸氨基轉移酶/（U·L-1）56.1±3.8555.7±3.6253.2±4.1754.1±4.32門冬氨酸氨基轉移酶/（U·L-1）180.3±4.2182.5±5.3164.2±2.8153.1±2.4堿性磷酸酶/（U·L-1）55.6±2.852.9±3.658.8±4.359.3±2.9谷氨酰轉肽酶/（U·L-1）3.8±1.73.6±2.13.3±3.33.2±2.8尿素/（mmol·L-1）6.57±1.096.43±1.036.35±1.276.31±1.18肌酐/（μmol·L-1）48.2±2.6148.5±3.0850.1±4.1651.2±3.95血糖/（mmol·L-1）6.81±1.246.85±1.196.76±1.436.77±1.37總蛋白/（g·L-1）65.1±2.4763.6±2.2461.7±3.5260.8±3.38白蛋白/（g·L-1）35.6±1.8636.1±2.4333.4±3.3432.6±2.80總膽固醇/（mmol·L-1）2.02±0.642.13±0.531.95±0.291.87±0.30甘油三酯/（mmol·L-1）0.68±0.350.67±0.310.66±0.240.64±0.19氯/（mmol·L-1）114.6±1.9113.5±2.4110.8±2.2111.7±1.6鉀/（mmol·L-1）5.29±0.315.27±0.255.20±0.135.24±0.17鈉/（mmol·L-1）151.4±2.8152.3±2.2150.6±1.5148.7±1.3

2.2.4 樣品對大鼠體重、臟器重量及臟/體比值的影響

各劑量組大鼠喂養試驗末禁食后體重、臟器重量及臟/體比值與對照組比較差異無顯著性（P＞0.05）。結果見表8 ～表9。

表8 樣品大鼠90 d 喂養試驗末禁食后體重及臟器重量測量結果表（±s）

表8 樣品大鼠90 d 喂養試驗末禁食后體重及臟器重量測量結果表（±s）

項目雄雌對照組低劑量中劑量高劑量對照組低劑量中劑量高劑量禁食后體重/g 273.2±18.4 262.8±20.1 269.5±18.5 260.8±17.3 200.9±15.4 197.6±12.1 193.8±14.6 201.2±13.5肝臟/g9.46±0.459.27±1.069.12±0.67 9.34±0.59 6.65±0.68 6.81±0.72 6.49±0.616.90±0.77腎臟/g2.41±0.182.38±0.262.43±0.16 2.42±0.23 1.90±0.14 1.88±0.11 1.85±0.171.87±0.19脾臟/g0.80±0.130.81±0.100.76±0.15 0.78±0.12 0.56±0.11 0.57±0.13 0.58±0.100.59±0.08胸腺/g0.52±0.090.51±0.110.49±0.13 0.53±0.15 0.49±0.12 0.48±0.10 0.51±0.080.50±0.09睪丸（卵巢）/g 3.15±0.193.13±0.163.17±0.24 3.16±0.27 0.15±0.03 0.14±0.02 0.13±0.040.14±0.02

表9 樣品大鼠90 d 喂養臟/體比測量結果表（±s）

表9 樣品大鼠90 d 喂養臟/體比測量結果表（±s）

項目雄雌對照組低劑量中劑量高劑量對照組低劑量中劑量高劑量肝/體/%3.47±0.21 3.54±0.33 3.39±0.16 3.58±0.14 3.32±0.25 3.46±0.34 3.35±0.21 3.43±0.41腎/體/%0.89±0.07 0.92±0.09 0.91±0.08 0.93±0.07 0.96±0.06 0.95±0.09 0.96±0.05 0.94±0.08脾/體/%0.30±0.05 0.32±0.06 0.29±0.02 0.31±0.04 0.29±0.06 0.30±0.04 0.31±0.07 0.30±0.05胸腺/體/%0.20±0.05 0.20±0.07 0.19±0.04 0.21±0.06 0.25±0.05 0.25±0.03 0.26±0.04 0.25±0.06睪丸/體（卵巢/體）/% 1.16±0.07 1.19±0.10 1.18±0.11 1.21±0.09 0.074±0.07 0.071±0.05 0.068±0.06 0.070±0.09

2.2.5 樣品對大鼠尿液檢查、眼部檢查、大體解剖及病理組織學檢查結果的影響

各劑量組大鼠尿液各項指標未見異常；試驗前后高劑量組和對照組大鼠角膜、虹膜及晶狀體清晰，球結膜未見充血；各臟器的色澤、大小、形態結構等均未見明顯異常；高劑量組大鼠病理組織學檢查未見明顯與樣品有關的異常改變。

3 結論

本文依據《食品安全國家標準 食品安全性毒理學評價程序》（GB 15193.1—2014）對人參提取物的安全性進行研究。人參提取物的小鼠急性經口LD50＞10.0 g·kg-1bw，屬實際無毒級。大鼠90 d 經口毒性試驗中，各劑量組動物生長發育良好，無中毒、死亡現象，大鼠各項血液學指標、生化學指標、體重、臟器重量及臟/體比值與對照組比較，均無顯著性差異（P＞0.05）；各劑量組大鼠尿液各項指標未見異常；高劑量組和對照組大鼠眼部檢查未見明顯異常；高劑量組大鼠病理組織學檢查未見明顯異常改變。綜上，長期食用人參提取物對小鼠安全無毒副作用。