細(xì)菌性陰道病四聯(lián)檢測(cè)法在細(xì)菌性陰道病中的應(yīng)用

紀(jì)鳳卿 陳君穎 藍(lán)玉芬

【摘要】 目的 分析評(píng)估細(xì)菌性陰道病四聯(lián)檢測(cè)法在細(xì)菌性陰道病（bacterial vaginosis，BV）中的應(yīng)用情況。方法 選取廈門(mén)市中醫(yī)院2022年2—3月收治的1 000例陰道炎患者作為研究對(duì)象，同時(shí)行白帶常規(guī)鏡檢和細(xì)菌性陰道病四聯(lián)檢測(cè)法，對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析。結(jié)果 常規(guī)濕片鏡檢診斷線索細(xì)胞與胺試驗(yàn)均陽(yáng)性118例，四聯(lián)BV Set試劑盒檢出唾液酸酯酶陽(yáng)性130例。常規(guī)鏡檢結(jié)果與BV Set試劑盒檢出結(jié)果一致的有118例，濕片鏡檢結(jié)果與細(xì)菌性陰道病四聯(lián)檢測(cè)法結(jié)果的符合率達(dá)90.77%。BV Set試劑盒檢測(cè)中過(guò)氧化氫陽(yáng)性率為92.00%，國(guó)內(nèi)首次報(bào)道廈門(mén)地區(qū)陰道炎患者過(guò)氧化氫陽(yáng)性率92.00%，應(yīng)引起臨床關(guān)注。BV Set試劑盒檢測(cè)唾液酸酶陽(yáng)性率為13.00%，白細(xì)胞酯酶陽(yáng)性率為41.00%，pH陽(yáng)性率為76.00%。該研究4項(xiàng)指標(biāo)陽(yáng)性率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。過(guò)氧化氫陽(yáng)性的920例標(biāo)本在白帶常規(guī)各級(jí)清潔度患者中均有分布，其中Ⅰ度、Ⅱ度、Ⅲ度、Ⅳ度陽(yáng)性率分別為5.00%、13.00%、32.00%、50.00%。各清潔度病例中過(guò)氧化氫陽(yáng)性率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論 采用細(xì)菌性陰道病四聯(lián)檢測(cè)法能有效綜合評(píng)估女性陰道微生態(tài)環(huán)境，提高BV診斷準(zhǔn)確率，為患者帶來(lái)益處，提高患者的生活質(zhì)量，值得大力推廣。

【關(guān)鍵詞】 細(xì)菌性陰道病；陰道清潔度；四聯(lián)檢測(cè)法；陰道微生態(tài)

文章編號(hào)：1672-1721（2024）01-0112-03 ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A ? ? 中國(guó)圖書(shū)分類號(hào)：R446.5

陰道微生態(tài)系統(tǒng)在維持女性生殖道內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定中發(fā)揮著重要的作用。若女性陰道微生態(tài)失調(diào)，則容易發(fā)生各種類型的陰道炎和生殖系統(tǒng)感染[1]。醫(yī)學(xué)數(shù)據(jù)資料顯示，BV以明顯陰道菌群失調(diào)導(dǎo)致多種致病性細(xì)菌感染為特征。如果患者沒(méi)有得到準(zhǔn)確的檢查，很有可能會(huì)造成檢測(cè)不及時(shí)、診斷不準(zhǔn)確[2]。目前醫(yī)學(xué)界認(rèn)為，正常的陰道微生物菌群以乳桿菌為優(yōu)勢(shì)菌，陰道微生態(tài)評(píng)估以陰道乳酸桿菌[3]變化為主。這是臨床診斷最有價(jià)值的檢測(cè)指標(biāo)。

本研究回顧性綜合評(píng)估細(xì)菌性陰道病四聯(lián)檢測(cè)法對(duì)女性陰道微生態(tài)的檢測(cè)結(jié)果，分析這一方法在BV診斷中的應(yīng)用，現(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料和方法

1.1 一般資料

選取廈門(mén)市中醫(yī)院門(mén)診及住院2022年2—3月收治的1 000例陰道炎患者作為研究對(duì)象，年齡21～60歲，平均年齡為（32.62±8.36）歲。

1.2 方法與儀器

1.2.1 儀器與試劑

儀器：bPR-2014A陰道炎自動(dòng)檢測(cè)工作站，日本OLYMPUS CX-21 雙目顯微鏡。

試劑：江蘇碩世生物科技股份有限公司細(xì)菌性陰道病（BV）檢測(cè)試劑盒，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的KOH溶液。

1.2.2 方法

在本次研究中，所有患者同時(shí)行白帶常規(guī)檢查與細(xì)菌性陰道病四聯(lián)檢測(cè)法。每位患者送檢的2份白帶標(biāo)本，1份進(jìn)行Amsel試驗(yàn)，由實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技師嚴(yán)格按照《臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第4版操作。另1份用BV 4項(xiàng)試劑盒檢測(cè)，由實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技師嚴(yán)格按照bPR-2014A陰道炎自動(dòng)檢測(cè)工作站標(biāo)本操作流程操作。BV 4項(xiàng)檢測(cè)內(nèi)容包括H2O2濃度、唾液酸苷酶、白細(xì)胞酯酶和pH值，檢測(cè)原理均采用干化學(xué)酶技術(shù)。根據(jù)酶解特異性底物而顯色或者添加顯色液顯色，并且呈色深度與所含酶的濃度成正比，從而輔助診斷細(xì)菌性陰道病。

Amsel臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]：（1）陰道分泌物稀薄均勻；（2）分泌物pH值＞4.5；（3）胺試驗(yàn)結(jié)果為陽(yáng)性；（4）涂片染色找到線索細(xì)胞。凡檢出線索細(xì)胞再加上述任意2條即可診斷為BV。

BV 4項(xiàng)試劑盒判斷標(biāo)準(zhǔn)：（1）H2O2濃度。不顯色或者淡黃色為陽(yáng)性，顯粉紅色表示弱陽(yáng)性，顯紅色或者紫紅色為陰性。（2）唾液酸苷酶。顯紅色或紫紅色為陽(yáng)性，顯粉紅色表示弱陽(yáng)性，不顯色或者淡黃色為陰性。（3）白細(xì)胞酯酶。顯藍(lán)色或綠色為陽(yáng)性，顯淡藍(lán)色表示弱陽(yáng)性，不顯色為陰性。（4）pH值。試劑顏色由黃色—青色—綠色—藍(lán)色變化，表示pH值在3.8～5.4變化。正常pH值參考范圍為3.8～4.5，當(dāng)pH值＞4.5時(shí)代表分泌物細(xì)菌性陰道病為陽(yáng)性。

陰道分泌物涂片清潔度判定標(biāo)準(zhǔn)見(jiàn)表1。

1.3 觀察指標(biāo)

在整個(gè)過(guò)程中，主要觀察指標(biāo)為：（1）不同檢測(cè)方法陽(yáng)性檢驗(yàn)結(jié)果；（2）細(xì)菌性陰道病四聯(lián)檢測(cè)法檢查4項(xiàng)

指標(biāo)陽(yáng)性率；（3）過(guò)氧化氫陽(yáng)性標(biāo)本白帶常規(guī)清潔度。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料以百分比表示，行χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同檢測(cè)方法陽(yáng)性檢驗(yàn)結(jié)果

1 000例標(biāo)本中，白帶常規(guī)鏡檢檢出線索細(xì)胞與胺試驗(yàn)均陽(yáng)性為118例，細(xì)菌性陰道病四聯(lián)檢測(cè)法檢出唾液酸酯酶陽(yáng)性130例。常規(guī)鏡檢結(jié)果與BV Set試劑盒檢出結(jié)果一致的有118例，白帶常規(guī)鏡檢結(jié)果與細(xì)菌性陰道病四聯(lián)檢測(cè)法結(jié)果的符合率達(dá)90.76%，該部分患者可判斷為BV，見(jiàn)表2。

2.2 細(xì)菌性陰道病四聯(lián)檢測(cè)法檢查4項(xiàng)指標(biāo)陽(yáng)性率

1 000例標(biāo)本行細(xì)菌性陰道病四聯(lián)檢測(cè)法檢查4項(xiàng)指標(biāo)（過(guò)氧化氫、唾液酸酶、白細(xì)胞酯酶、pH值），陽(yáng)性率結(jié)果見(jiàn)表3。

研究病例4項(xiàng)指標(biāo)中陽(yáng)性率比較，χ2=1 503.660，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001）。其中，過(guò)氧化氫陽(yáng)性率最高，達(dá)到92.00%。此為首次報(bào)道廈門(mén)本地區(qū)細(xì)菌性陰道炎患者過(guò)氧化氫陽(yáng)性率如此之高，應(yīng)引起臨床關(guān)注。

2.3 過(guò)氧化氫陽(yáng)性標(biāo)本白帶常規(guī)清潔度

記錄過(guò)氧化氫陽(yáng)性的920例標(biāo)本的白帶常規(guī)清潔度，見(jiàn)表4。

隨著患者清潔度惡化，過(guò)氧化氫陽(yáng)性率也逐步提高。各清潔度病例中過(guò)氧化氫陽(yáng)性率比較，χ2=596.823，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001）。

3 討論

BV是由陰道內(nèi)乳桿菌減少或消失、兼性厭氧菌及厭氧菌增多導(dǎo)致的常見(jiàn)陰道感染性疾病之一，具有臨床癥狀不典型、復(fù)發(fā)率高的特點(diǎn)。BV與婦科術(shù)后感染、盆腔炎癥、早產(chǎn)或產(chǎn)后子宮內(nèi)膜炎、反復(fù)流產(chǎn)等不良妊娠結(jié)局及淋病、HIV等性傳播疾病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)具有相關(guān)性，實(shí)驗(yàn)室診斷主要依據(jù)革蘭染色Nugent評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)和臨床Amsel標(biāo)準(zhǔn)[5]。面對(duì)育齡期婦女患病率4.96%～36.00%、婦科門(mén)診發(fā)病率高達(dá)50.40%的情況，臨床迫切希望對(duì)該病進(jìn)行及時(shí)準(zhǔn)確的診斷。近年細(xì)菌性陰道病四聯(lián)檢測(cè)法應(yīng)運(yùn)而生，成為BV檢測(cè)的另一種補(bǔ)充方式。BV的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)一直以傳統(tǒng)Amsel法為主，費(fèi)力費(fèi)時(shí)，容易受主觀因素干擾影響。比如近期性生活和陰道沖洗均可導(dǎo)致pH值升高；胺試驗(yàn)的氣味鑒別結(jié)果因人而異；線索細(xì)胞的判別受標(biāo)本采集部位、操作者的涂片方式、經(jīng)驗(yàn)等影響，不易做到標(biāo)準(zhǔn)化。雖然革蘭染色Nugent評(píng)分法準(zhǔn)確性高，但操作復(fù)雜、周期長(zhǎng)，不適于作為常規(guī)檢測(cè)方法。而采用細(xì)菌性陰道病四聯(lián)檢測(cè)法應(yīng)用bPR-2014A陰道炎自動(dòng)檢測(cè)工作站進(jìn)行檢測(cè)的方法更容易標(biāo)準(zhǔn)化，克服Amsel法、革蘭染色Nugent評(píng)分法諸多缺陷。

實(shí)驗(yàn)室BV試劑盒共檢測(cè)4項(xiàng)指標(biāo)，即pH值、過(guò)氧化氫濃度、白細(xì)胞酯酶、唾液酸苷酶。其中pH值用以判斷陰道整體酸堿度情況，輔助診斷是否存在陰道病原體感染影響環(huán)境酸堿度。國(guó)內(nèi)學(xué)者曹建英[6]研究顯示，白帶pH值≤4.5，可以有效控制細(xì)菌性陰道病的發(fā)病率。臨床不可忽視pH值這一檢測(cè)項(xiàng)目。過(guò)氧化氫由陰道中的正常菌群乳酸桿菌產(chǎn)生，且其濃度與乳酸桿菌數(shù)量成正比。過(guò)氧化氫水平可作為陰道乳酸桿菌狀態(tài)的檢測(cè)指標(biāo)，與BV診斷有很強(qiáng)相關(guān)性。乳酸桿菌從多方面維持陰道微生態(tài)環(huán)境穩(wěn)定[7]，即與致病菌競(jìng)爭(zhēng)黏附在陰道上皮細(xì)胞；酵解糖原產(chǎn)生乳酸，維持陰道酸堿度；乳酸桿菌及其代謝產(chǎn)物激發(fā)陰道上皮細(xì)胞的免疫功能，抑制致病菌菌群的生長(zhǎng)繁殖；產(chǎn)生廣譜抗菌因子過(guò)氧化氫。當(dāng)發(fā)生感染時(shí)，白細(xì)胞酯酶通過(guò)陰道上皮細(xì)胞黏膜滲透到分泌物中，檢測(cè)白細(xì)胞酯酶活性可間接反映白細(xì)胞數(shù)量。然而B(niǎo)V試劑盒無(wú)法檢測(cè)不產(chǎn)生白細(xì)胞酯酶的免疫細(xì)胞，比如淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞，此時(shí)需要結(jié)合人工鏡檢白帶常規(guī)涂片進(jìn)行輔助確認(rèn)。唾液酸苷酶是一種存在于溶酶體、細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞膜上的酶蛋白，研究表明其活性與BV密切相關(guān)。

本研究發(fā)現(xiàn)，1 000例標(biāo)本中經(jīng)白帶常規(guī)濕片鏡檢檢出線索細(xì)胞與胺試驗(yàn)均陽(yáng)性的118例，用細(xì)菌性陰道病四聯(lián)檢測(cè)法檢出唾液酸酯酶陽(yáng)性130例。常規(guī)鏡檢結(jié)果與細(xì)菌性陰道病四聯(lián)檢測(cè)法檢出結(jié)果一致的有118例，濕片鏡檢結(jié)果與細(xì)菌性陰道病四聯(lián)檢測(cè)法結(jié)果的符合率達(dá)90.76%。同時(shí)本研究發(fā)現(xiàn)，細(xì)菌性陰道病四聯(lián)檢測(cè)法檢查中過(guò)氧化氫陽(yáng)性率為92.00%，唾液酸酶陽(yáng)性率為13.00%，白細(xì)胞酯酶陽(yáng)性率為41.00%，并且pH值陽(yáng)性率為76.00%。本研究病例4項(xiàng)指標(biāo)陽(yáng)性率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。過(guò)氧化氫呈陽(yáng)性的920例標(biāo)本在白帶常規(guī)各級(jí)清潔度患者中均有分布，其中Ⅰ度、Ⅱ度、Ⅲ度、Ⅳ度陽(yáng)性率分別為5.00%、13.00%、32.00%、50.00%。這表明隨著患者清潔度惡化，過(guò)氧化氫陽(yáng)性率也逐步提高。各清潔度病例中過(guò)氧化氫陽(yáng)性率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。本研究也是在國(guó)內(nèi)首次報(bào)道廈門(mén)地區(qū)陰道炎患者過(guò)氧化氫陽(yáng)性率高達(dá)92.00%，應(yīng)引起臨床關(guān)注。多年來(lái)，對(duì)無(wú)癥狀陰道炎患者是否需要臨床干預(yù)治療存在一定爭(zhēng)議[8]。

本研究隨訪了幾位主診的婦產(chǎn)科醫(yī)生，對(duì)于如此高的過(guò)氧化氫陽(yáng)性率，大部分婦產(chǎn)科醫(yī)生認(rèn)為單項(xiàng)過(guò)氧化氫陽(yáng)性的病患若無(wú)任何臨床癥狀，可暫不予以治療，留觀隨訪即可。目前本地區(qū)婦女人群中過(guò)氧化氫陽(yáng)性率極高，發(fā)現(xiàn)可能與不良生活習(xí)慣等因素有關(guān)，諸如性生活頻率過(guò)度、內(nèi)褲與其他衣物同洗、盆浴、陰道沖洗、非經(jīng)期使用護(hù)墊，導(dǎo)致陰道優(yōu)勢(shì)菌群變化，過(guò)氧化氫乳酸桿菌減少，其他球菌增多。亦可能與該研究病例選取的南方潮濕春季病患有關(guān)，春季沿海地區(qū)濕冷氣候有利于各種陰道病原菌滋生生長(zhǎng)。pH值的升高對(duì)內(nèi)部環(huán)境有嚴(yán)重的影響，可導(dǎo)致大量的線索細(xì)胞存在。加德納細(xì)菌黏附可削弱陰道上皮防御功能，讓有害細(xì)菌順勢(shì)進(jìn)入陰道，最終可能導(dǎo)致流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎、反復(fù)盆腔炎等疾病[9]。目前醫(yī)學(xué)界統(tǒng)一認(rèn)為，導(dǎo)致霉菌感染的關(guān)鍵因素也是細(xì)菌陰道感染[10-11]。BV的抗生素療法耐藥日益嚴(yán)重。臨床治療婦產(chǎn)科疾病的過(guò)程使用各種抗生素、滅滴蟲(chóng)藥物，在殺菌殺蟲(chóng)的同時(shí)也殺滅了乳酸桿菌，致使陰道微生態(tài)失衡，造成各種婦產(chǎn)科疾病復(fù)發(fā)甚至再次感染。有研究表明，經(jīng)過(guò)抗菌治療后用乳菌桿菌治療重建陰道微生態(tài)平衡，復(fù)發(fā)率遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于單一的抗生素治療。鑒于此，靶向陰道菌群以恢復(fù)陰道健康的微生態(tài)療法越來(lái)越受到臨床和研究人員的關(guān)注。

目前已有較多文獻(xiàn)報(bào)道將益生菌用于治療BV。張瑞等[8]研究亦表明，益生菌是改善育齡期無(wú)癥狀BV預(yù)后安全、有效的措施。醫(yī)學(xué)界認(rèn)為，陰道菌群的異常變化是臨床診斷最有價(jià)值的形態(tài)學(xué)研究指標(biāo)[12]。BV Set試劑盒的過(guò)氧化氫指標(biāo)亦可以應(yīng)用于評(píng)估陰道微生態(tài)菌群是否恢復(fù)重建。細(xì)菌性陰道病四聯(lián)檢測(cè)法剛好從陰道酸堿環(huán)境、乳酸桿菌數(shù)量、是否存在陰道加德納菌感染及是否存在炎癥感染方面評(píng)估陰道微生態(tài)環(huán)境，有利于BV的防治。該試劑盒的使用還能有效彌補(bǔ)白帶常規(guī)檢測(cè)臨床取材問(wèn)題、檢驗(yàn)技師鏡檢水平差異導(dǎo)致的漏檢、誤診現(xiàn)象。為此提倡采用4項(xiàng)BV Set試劑盒檢查，提高BV診斷效果。

綜上所述，采用細(xì)菌性陰道病四聯(lián)檢測(cè)法能從陰道酸堿環(huán)境、乳酸桿菌數(shù)量、是否存在陰道加德納菌感染及是否存在炎癥感染方面評(píng)估陰道微生態(tài)環(huán)境，提高BV診斷效果，從而提高患者的生活質(zhì)量，為患者帶來(lái)益處，值得大力推廣。

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（編輯：許 琪）