竹節伸筋飲片質量標準研究*

歐巧玲，王竹鑫，周 宜，林麗美，包 敏，胡冠羽

（1.湖南中醫藥大學第二附屬醫院，湖南 長沙 410005；2.湖南中醫藥大學藥學院，湖南 長沙 410208；3.株洲市食品藥品檢驗所，湖南 株洲 412000）

竹節伸筋為百合科植物蜘蛛抱蛋Aspidistra elatiorBlume的干燥根莖，具有活血止痛、清肺止咳、利尿通淋等功效，常用于跌打損傷、風濕痹痛等疾病的治療[1-2]。化學成分研究[3-5]表明竹節伸筋主要含有甾體皂苷。藥理活性研究顯示其具有抗菌[6-7]、抗腫瘤[8-9]、抗炎[10]和止咳[11]等藥理作用。

竹節伸筋主要收錄于地方標準[1，12]。另外，也有文獻報道其質量標準研究[3]。這些都為竹節伸筋質量評判提供了法、理依據。但2010年版《湖南省中藥飲片炮制規范》中，竹節伸筋只有性狀鑒別、橫截面鑒別、理化鑒別等評判項，不足以全面地評判竹節伸筋飲片的質量，有必要對其標準進行提升研究[13-14]。

因此，在湖南省市場監督管理局的支持下，本實驗組啟動了關于2010版《湖南省中藥飲片炮制規范》中竹節伸筋飲片標準提升項目。根據項目要求進行了性狀鑒別、粉末鑒別、橫截面鑒別、理化鑒別，以及水分、總灰分、醇溶性浸出物含量測定等項目的研究，旨在為竹節伸筋飲片質量標準提升提供依據。

1 儀器與材料

1.1 儀器 電子天平（XSE205 DV，梅特勒托利多儀器有限公司），電子顯微鏡（BX-61，奧林巴斯有限公司），電熱恒溫干燥箱（DHG-9147A，上海精宏實驗設備有限公司），馬弗爐（SX-4-10，北京市永光明醫療儀器有限公司）。

1.2 試劑 乙腈（色譜級，批號：TA3A1H，霍尼韋爾有限公司）、甲醇（色譜級，批號：W9PG1H，霍尼韋爾有限公司），五水合硫酸銅（分析級，批號：20170426，國藥控股股份有限公司）、四水合酒石酸鉀鈉（分析級，批號：20190815，國藥控股股份有限公司）和氫氧化鈉（分析級，批號：20200218，國藥控股股份有限公司）。

1.3 飲片 從不同生產企業收集竹節伸筋飲片共計15批，樣品信息如表1所示。所有批次飲片經株洲市食品藥品檢驗所胡冠宇主管藥師鑒定為百合科植物蜘蛛抱蛋Aspidistra elatiorBlume的干燥根莖。樣本存放于株洲市食品藥品檢驗所中藥樣品室。

表1 竹節伸筋飲片信息

2 方法與結果

2.1 性狀鑒別

2.1.1 鑒別方法 取竹節伸筋飲片，通過眼看、口嘗、鼻嗅、手摸等方法從形狀、規格、大小、表面或切面顏色、特征、質地、氣味等方面對其進行鑒別。并將其按不同角度擺放于藍色膠片上，利用數碼相機對其進行拍攝，獲得該樣品最佳數碼圖片。

2.1.2 鑒別結果 經鑒別，確定其主要性狀特征為：本品呈圓柱形或不規則形的段。外表面灰黃色或黃棕色，有疏密不勻的環節和縱溝。根莖一面的節上殘留未除盡的須根或點狀根痕。質硬，切面黃白色，纖維性，氣微，微甜而后苦。（見圖1）

2.2 橫截面鑒別

2.2.1 鑒別方法 取大小適中竹節伸筋飲片，置于裝有水的培養皿中，浸泡數小時，軟化后，用泡沫夾住，刀片進行徒手切削，用毛筆蘸取粘在刀片上的薄片，置于水中伸展，然后用毛筆蘸取厚度合適的薄切片置于載玻片上，加清水1~2滴，蓋上蓋玻片，用吸水紙吸去多余清水，置于顯微鏡下觀察。

2.2.2 鑒別結果 通過觀察，確定其主要橫截面顯微特征為：表皮為一列類方形的薄壁細胞（見圖2a、圖2b），外被角質層。皮層由十余列類圓形的薄壁細胞組成（見圖2a），近中部有少數纖維束散在，纖維壁厚，微木化，稀有葉跡維管束。內皮層細胞壁呈“ U”字形增厚（見圖2c），木化。中柱鞘細胞1列，木化。維管束多為周木型，具纖維鞘。薄壁細胞含草酸鈣結晶（見圖2d）。

圖2 竹節伸筋飲片橫截面顯微鑒別

2.3 粉末鑒別

2.3.1 鑒別方法 取細粉（過4號篩）少許放在載玻片上，加1～2滴水合氯醛，置于酒精燈上透化至近無色，取下，滴1滴甘油裝片，用吸水紙吸去多余甘油，置于顯微鏡下觀察并拍照。

2.3.2 鑒別結果 通過觀察，確定其主要粉末顯微特征為：黃棕色。薄壁細胞黃色或近無色，類方形，長方形或不規則形，直徑20～150 μm，內含草酸鈣針晶。導管為網紋，直徑20～70 μm。非腺毛3～5細胞，長150～250 μm，直徑約20 μm。（見圖3）

圖3 竹節伸筋飲片粉末顯微鑒別

2.4 理化鑒別

2.4.1 鑒別方法 取本品粉末（過4號篩）2 g，加水15 mL，浸漬1 h，濾過。取濾液1 mL，置帶塞試管中，強力振搖后觀察，放置10 min后再觀察。整個過程標記為試驗a。再取濾液2 mL，加稀鹽酸1 mL，置沸水浴中加熱10 min，冷后調至中性，加入堿性酒石酸銅試液4～5滴，再置沸水中加熱數分鐘，取出靜置數分鐘，觀察。整個過程標記為試驗b。

2.4.2 鑒別結果 經處理后，試驗a續濾液產生大量蜂窩狀泡沫，放置10 min泡沫無明顯消失（見圖4a）；試驗b續濾液產生紅棕色沉淀（見圖4b）。

圖4 竹節伸筋飲片理化鑒別

2.5 水分、總灰分、醇溶性浸出物測定

2.5.1 測定方法 按照《中華人民共和國藥典》2020年版四部通則0832第二法，測定竹節伸筋飲片的水分[15]；按照《中華人民共和國藥典》2020年版四部通則2302，測定竹節伸筋飲片的總灰分[15]；按照《中華人民共和國藥典》2020年版四部通則2201，測定竹節伸筋飲片的醇溶性浸出物[15]。（見表2）

表2 葉下珠飲片中水分、總灰分及醇溶性浸出物的含量（n=2）

2.5.2 測定結果 經測定，竹節伸筋飲片中水分、總灰分及醇溶性浸出物百分含量如表2所示。

3 討論與結論

3.1 性狀鑒別 本項目共收集15批次樣本，經鑒別，序號為1~12的12批次為主根莖（見圖1），序號為13~15的3批次含主根莖較少，含大量須根，且灰屑較多。后3批次樣本與原標準[1]和已發表文獻[3]等的描述均不符，因此，不納入本次標準修訂所述范疇。

3.2 顯微鑒別 湖南省地方標準[1，12]和左盛奇等[3]發表的竹節伸筋質量標準論文記錄了竹節伸筋的顯微特征，經比較，和本研究所述大多相似或相同，但仍然存在一些區別。

在橫截面鑒別中，本研究發現竹節伸筋外皮層為1列外被角質層的類方形薄壁細胞，而左盛奇等[3]描述為1~2列。另外，湖南省地方標準[1]將維管束特征描述為“周木型及外韌型”，而本研究只發現周木型，未發現外韌型。

在粉末鑒別中，左盛奇等[3]描述薄壁細胞尺寸為20~240 μm，但是本研究發現為20~150 μm。另外，左盛奇等[3]描述導管為梯紋，而本研究發現為網紋。

3.3 水分、總灰分、醇溶性浸出物結果分析和限量值推薦 根據實驗結果，竹節伸筋飲片的水分含量在5.66%～9.92%，平均值為7.77%。左盛奇等[3]測定的水分含量在12.12%～12.86%，平均值為12.75%。兩者存在一定差異。而《湖南省中藥材標準》[12]規定限量值范圍為不得過12%，左盛奇等[3]根據不超過上限20%的原則推薦為不得過15%，本研究則沿用原省級標準推薦為不得過12%。

竹節伸筋飲片的總灰分含量在4.46%～5.41%，平均值為4.75%。左盛奇等[3]測定的總灰分含量在5.98%～6.67%，平均值為6.43%。相對本結果，整體偏高。左盛奇等[3]根據不超過上限的20%，推薦為8%。本研究同樣根據不超過上限20%的原則推薦為7%。

竹節伸筋飲片的醇浸出物含量在30.03%～56.29%，平均值為39.26%。左盛奇等[3]測定的醇浸出物含量在4.48%～5.44%，平均值為4.86%。兩者差異巨大。其原因可能與樣品來源相關。左盛奇等[3]的樣品為自采野生原藥材，本研究為基地種植后經炮制加工的飲片。而人工種植品種更為肥厚，糖分等營養物質累積量大，浸出物含量高。其次，自采藥材非浸出物含總灰分和水分含量等占比相對飲片高，本研究結果可說明這一點。綜上，鑒于左盛奇等[3]研究結果對本研究不具有參考意義，本研究另根據不低于平均值30%的原則，推薦為不低于28%。

3.4 總結 綜上所述，筆者在原2010年版《湖南省中藥飲片炮制規范》[1]上，增加了粉末鑒別，水分、總灰分及醇溶性浸出物測定等，修訂了橫截面鑒別。在原標準上有較大提升，能夠更為準確、全面地控制竹節伸筋飲片的質量。