血清膽紅素聯合溶血三項試驗在新生兒溶血病早期診斷中的應用價值研究

周 林，林承祥，李 櫻，黃聘婷

（麻城市人民醫院輸血科，湖北 麻城 438300）

新生兒溶血病（HDN）是指因母子血型不合，母體血型抗體和胎兒血型抗原不匹配，經胎盤進入胎兒的抗體誘導胎兒或新生兒紅細胞破壞，從而引起的同族免疫性溶血疾病。常見類型有Rh 溶血和ABO 溶血，其中ABO 溶血約占85.3%[1]。HDN 患兒多為足月新生兒，常見臨床癥狀有黃疸、水腫、肝脾腫大及貧血等[2]，如不及時、有效地進行診斷和治療，不僅會影響新生兒的神經功能、免疫功能、腎功能及心肌細胞的發育，嚴重時還會誘發膽汁黏稠綜合征、新生兒膽紅素腦病，甚至導致循環、呼吸系統衰竭，危及新生兒生命[3]。HDN 非常容易引起新生兒高膽紅素血癥，早期及時診斷和治療對提高HDN 的治愈率及防止后遺癥出現具有重要意義。目前，溶血三項試驗通常被臨床應用于HDN 的檢測中，另外血清膽紅素也被視為HDN 的評價指標[4]。為探究血清膽紅素和溶血三項試驗在HDN 早期診斷中的應用價值，本文特選取96 例母親為O 型血的HDN 患兒為研究對象，現將研究結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2021 年11 月至2022 年10 月在我院出生的96例母親為O 型血的溶血病患兒，產婦血型均為O 型RhD陽性血型。患兒血型：B 型39 例，A 型57 例；患兒日齡3 h 至20 d，平均（6.3±1.8）d。患兒均出現黃疸、水腫、肝脾腫大、貧血等癥狀。其中，排除患先天性肝膽系統疾病患兒。醫院倫理委員會批準本研究，患兒家長知情且均簽署知情同意書。

1.2 方法

（1）血清膽紅素檢測：取患兒3 mL 靜脈血，3000 r/min 轉速下離心，獲得血清后應用全自動生化分析儀（貝克曼，型號AU5800）測定血清膽紅素含量，血清總膽紅素正常參考范圍3.4 ～20.5 mmol/L。（2）溶血三項試驗：包括直抗試驗、游離試驗、釋放試驗。取患兒3 mL 靜脈血，應用新生兒血型檢測卡、HDN 胎兒不完全抗體檢測卡進行溶血三項試驗，嚴格按照試劑要求進行操作。患兒依據HDN 診斷標準及溶血三項試驗結果分為A、B、C、D四組，其中A組直抗和釋放試驗（+）、游離試驗（-），B 組三項試驗均為（+），C 組游離和釋放試驗（+）、直抗試驗（-），D 組直抗試驗（+）、游離和釋放試驗（-）。（3）治療方法：以患兒具體情況為依據進行對癥處理，包括藍光、換血、丙種球蛋白等治療。

1.3 觀察指標

觀察96 例HDN 患兒血型分布及不同血型患兒的溶血三項試驗結果。比較四組HDN 患兒的溶血三項試驗結果。對比四組HDN 患兒治療前后的膽紅素含量。分析膽紅素對HDN 的早期診斷價值。

1.4 統計學方法

采用SPSS 22.0 軟件對數據進行分析，計數資料用百分數（%）表示，采用χ2檢驗；計量資料以±s表示，采用t/F檢驗。以P＜0.05為差異顯著，具有統計學意義。

2 結果

2.1 96 例HDN 患兒血型分布及不同血型患兒的溶血三項試驗結果

96 例HDN 患兒中，直抗試驗陽性率A 型血患兒高于B 型血患兒，且差異有統計學意義（P=0.030）；釋放試驗和游離試驗在兩種血型患兒中的陽性率差異無統計學意義（P＞0.05）。詳見表1。

表1 96 例HDN 患兒血型分布及不同血型患兒的溶血三項試驗結果[例（%）]

2.2 四組HDN 患兒溶血三項試驗結果比較

96 例HDN 患兒直抗試驗陽性率為10.42%，釋放試驗陽性率為100.00%，游離試驗陽性率為62.50%。直抗試驗和釋放試驗同為陽性者占比4.17%，直抗試驗、釋放試驗和游離試驗均為陽性者占比6.25%，釋放試驗和游離試驗同為陽性者占比56.25%，僅釋放試驗陽性者占比33.33%。陽性率比較C 組＞D 組＞B 組＞A 組，且差異有統計學意義（P＜0.05）。詳見表2。

表2 四組HDN 患兒溶血三項試驗結果比較[例（%）]

2.3 四組HDN 患兒治療前后膽紅素含量比較

治療前，四組HDN 患兒膽紅素含量顯著高于正常范圍，且組間比較差異不顯著（F=0.207，P=0.891）。治療后各組患兒的膽紅素水平均明顯下降，且與治療前比較差異顯著（P＜0.05）。詳見表3。

表3 四組HDN 患兒治療前后膽紅素含量比較（μmmol/L，±s）

表3 四組HDN 患兒治療前后膽紅素含量比較（μmmol/L，±s）

組別 例數 治療前 治療后 t 值 P 值A 組 4 269.4±79.21 161.3±31.24 2.539 ＜0.05 B 組 6 266.3±82.45 182.1±40.83 2.242 ＜0.05 C 組 54 252.4±87.64 185.1±48.36 4.941 ＜0.05 D 組 32 243.9±80.76 184.7±43.28 3.669 ＜0.05

2.4 膽紅素對HDN 的早期診斷價值分析

膽紅素預測HDN 陽性的ROC 曲線下面積（AUC）為0.716，靈敏度為0.600，特異性為0.872，詳見圖1、表4。表明膽紅素可以作為HDN 的早期診斷指標，但靈敏度略低，容易造成漏診。

圖1 膽紅素對新生兒溶血病早期診斷分析

表4 膽紅素對HDN 早期診斷價值的分析

3 討論

HDN 是臨床上一種危險性較大的新生兒疾病，臨床主要表現為黃疸、貧血、血清膽紅素水平上升及水腫等。HDN 發生的主要原因是母親與胎兒之間ABO 血型或Rh血型不合[5]。其發病機理為，胎兒代表父母雙方的紅細胞抗原表型不一致，當胎兒體內代表父體紅細胞抗原的紅細胞經臍帶進入母體時，兩者相互融合產生相應抗體，隨后抗體通過胎盤傳遞給胎兒，最終出現抗原抗體等一系列免疫反應，發生溶血，嚴重威脅新生兒與母親的生命安全[6]。臨床研究數據顯示，HDN 在ABO 血型中的發生率要遠高于Rh 血型[7]，且ABO 血型HDN 中以母親為O 型、新生兒為A、B 型為主，在ABO 血型引起的HDN 中大多數癥狀都較輕，有明顯溶血癥狀的患兒約占6%[8]。Rh 血型引起的HDN 多發生于多胎或多次輸血的孕產婦中，其發病率低，但大部分的溶血程度較嚴重。目前，臨床上診斷HDN 的最有效方法是溶血三項試驗，包括直抗試驗、釋放試驗和游離試驗，其中直抗、釋放試驗的目的在于了解紅細胞上結合的血型抗體，二者能夠確診HDN；而游離試驗能反映新生兒血清中母體血型抗體水平，但不能作為診斷HDN 的依據[9]。

釋放試驗 和游離試驗是診斷新生兒HDN 的主要方式，胎兒血清中IgG 類抗體可采用游離試驗檢測，IgG類抗體的檢測有利于HDN 的觀察和治療[10]。母體內IgG抗體效價和抗體數量隨孕期的增加而增加，當抗體數量超過母體自身抵抗范圍時，HDN 則容易被引發，此時IgG 經由胎盤途徑進入胎兒的血液循環系統。由本研究結果可知，游離試驗的陽性率為62.50%，提示游離試驗的檢測敏感度稍差，這可能與母體IgG 進入胎兒體內量的多少有關。釋放試驗檢測結果為陽性則提示母體IgG抗A、B 抗體使患兒紅細胞致敏。在本研究中，釋放試驗的陽性率為100.00%。對HDN 溶血三項試驗結果進行組合分析，結果顯示釋放和游離試驗均為陽性的概率顯著高于其他組合，這表明在新生兒溶血的早期診斷中，溶血三項試驗具有較高的價值。

直接膽紅素和間接膽紅素共同組成人體的血清總膽紅素，其是肝、脾等臟器及骨髓中的單核吞噬細胞吞噬紅細胞的產物[11]。研究表明，總膽紅素在HDN 診斷中也具有重要的參考價值。楊冬梅等[12]研究發現，在HDN 患兒體內，短時間內血清膽紅素水平能夠快速上升且顯著高于正常水平，這表明血清膽紅素在HDN的診斷中可作為關鍵性指標。本研究中，治療前HDN患兒膽紅素含量顯著高于正常范圍，組間比較差異不顯著（F=0.207，P=0.891）。治療后各組患兒的膽紅素水平均明顯下降，且與治療前比較差異有統計學意義（P＜0.05）。此外，在HDN 早期診斷中，血清膽紅素預測HDN 陽性的AUC 為0.716，靈敏度為0.600，特異性為0.872，這表明以膽紅素對HDN 進行早期診斷具有一定的價值。

綜上所述，血清膽紅素聯合溶血三項試驗有助于HDN 的早期診斷。