和厚樸酚的抗腫瘤作用機(jī)制研究現(xiàn)狀

張琪，李鶴楠，王臨江，劉丹，王婧，蔡德富

齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院醫(yī)藥科學(xué)研究院，黑龍江齊齊哈爾 161006

腫瘤是威脅人類生命健康的第二大疾病，也是阻礙人類預(yù)期壽命提高的主要原因之一。盡管已經(jīng)對(duì)腫瘤研究做出了長(zhǎng)時(shí)間的努力，但化療仍然是多種腫瘤的主要治療方法。且嚴(yán)重的不良反應(yīng)和長(zhǎng)期的耐藥性限制了化療的臨床應(yīng)用。因此，臨床上迫切需要開(kāi)發(fā)新的抗腫瘤藥物。中藥是中華民族的巨大財(cái)富，是多種潛在抗腫瘤候選藥物的豐富來(lái)源，為尋找有效性強(qiáng)且毒性小的治療藥物，越來(lái)越多的研究者開(kāi)始將視線轉(zhuǎn)向中藥。和厚樸酚（Honokiol, HNK）是從中藥厚樸中提取得到的小分子雙酚木質(zhì)素類化合物，是厚樸的主要活性成分之一，其具有抗菌、抗炎、抗氧化、抑制血管生成、抗痙攣、抗抑郁、抗病毒和抗腫瘤等廣泛的藥理作用。特別是關(guān)于HNK抗腫瘤作用及相關(guān)機(jī)制的研究報(bào)道在逐漸增加。本文就近年國(guó)內(nèi)外HNK的抗腫瘤作用及相關(guān)機(jī)制進(jìn)行總結(jié)分析，以期為HNK的進(jìn)一步新藥開(kāi)發(fā)和臨床應(yīng)用提供一定參考。

1 抗腫瘤作用

多項(xiàng)研究表明HNK可在腫瘤發(fā)生、發(fā)展進(jìn)程中關(guān)鍵節(jié)點(diǎn)包括腫瘤細(xì)胞增殖、凋亡、遷移、血管生成和腫瘤免疫原性中發(fā)揮作用。與靶向抗腫瘤藥物不同，HNK具有多靶點(diǎn)、并通過(guò)作用于多條信號(hào)通路產(chǎn)生抗腫瘤作用。

1.1 誘導(dǎo)凋亡和抑制增殖

程序性細(xì)胞死亡或凋亡是一種進(jìn)化上保守且高度受控的細(xì)胞死亡形式，對(duì)多細(xì)胞生物的穩(wěn)態(tài)和發(fā)育至關(guān)重要。多項(xiàng)在不同癌癥細(xì)胞系和動(dòng)物模型的臨床前研究表明，HNK可以增強(qiáng)促凋亡蛋白的表達(dá)如Bcl-2相關(guān)X蛋白（Bax）、BH3相互作用結(jié)構(gòu)域死亡激動(dòng)劑（Bid）和Bcl-2同源拮抗劑/殺傷劑（Bak），并減少抗凋亡蛋白如B細(xì)胞淋巴瘤的表達(dá)蛋白-2（Bcl-2）和Bcl-xL。另外，HNK還可以觸發(fā)釋放線粒體細(xì)胞色素c進(jìn)入胞質(zhì)并激活caspase級(jí)聯(lián)反應(yīng)，進(jìn)而在凋亡介導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞死亡與聚二磷酸腺苷核糖聚合酶裂解中發(fā)揮重要作用。

有研究表明，HNK對(duì)人膀胱移行腫瘤細(xì)胞BFTC-905具有顯著的抗增殖作用。此外，HNK在低劑量下可以誘導(dǎo)G0/G1期細(xì)胞周期停滯，而在高劑量下顯著誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。此外，在HNK處理的細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)了活性氧的顯著積累并且誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞線粒體膜超極化。同時(shí)，在大劑量HNK處理的膀胱腫瘤細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)caspase-3/7被激活。這些結(jié)果表明HNK可以通過(guò)干預(yù)線粒體途徑誘導(dǎo)膀胱腫瘤細(xì)胞凋亡[1]。未來(lái)在治療膀胱腫瘤方面，HNK可能具有潛在的臨床應(yīng)用價(jià)值。也有研究表明HNK能明顯抑制乳腺癌4T1細(xì)胞增殖，且隨時(shí)間增加，抑制作用也相應(yīng)地增強(qiáng)。其作用機(jī)制可能是通過(guò)上調(diào)凋亡相關(guān)蛋白Cleaved-Caspase 3的表達(dá)來(lái)誘導(dǎo)乳腺腫瘤細(xì)胞凋亡。同時(shí)，體內(nèi)研究結(jié)果表明HNK可顯著延長(zhǎng)小鼠乳腺癌細(xì)胞4T1肺轉(zhuǎn)移Balb/c小鼠模型生存期[2]。Lou GG等[3]研究發(fā)現(xiàn)HNK以劑量依賴的方式誘導(dǎo)膀胱腫瘤細(xì)胞T24凋亡，HNK與羥基喜樹(shù)堿組凋亡更加明顯。進(jìn)一步的機(jī)制研究表明HNK誘導(dǎo)凋亡主要是通過(guò)激活Caspase通路和抑制NF-κB、Akt和ERK蛋白磷酸化進(jìn)行。

1.2 阻滯細(xì)胞周期

細(xì)胞周期涉及DNA復(fù)制、細(xì)胞器和細(xì)胞質(zhì)分裂等一系列過(guò)程，多種蛋白參與細(xì)胞周期的進(jìn)展，是細(xì)胞生長(zhǎng)和分裂中的一個(gè)高度組織和調(diào)節(jié)過(guò)程[4]。有研究顯示，在體外HNK可濃度和時(shí)間依賴性抑制Hep3B肝癌細(xì)胞生長(zhǎng)，但相同濃度或者時(shí)間下，HNK對(duì)正常肝細(xì)胞毒性相對(duì)較小。進(jìn)一步研究顯示，HNK可能是通過(guò)誘導(dǎo)Hep3B細(xì)胞周期G1/S阻滯，從而抑制肝癌細(xì)胞的增殖。小鼠皮下移植腫瘤模型結(jié)果表明，HNK可顯著抑制腫瘤生長(zhǎng)，機(jī)制研究發(fā)現(xiàn)HNK給藥后，Hep3B細(xì)胞周期蛋白Cyclin D1表達(dá)顯著降低，而細(xì)胞周期負(fù)調(diào)控蛋白P53、P27、P21表達(dá)均不同程度升高[5]。HNK可以通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞周期調(diào)節(jié)蛋白如cyclin、CDKs及CDKi等引起細(xì)胞周期阻滯。采用碘化丙啶（Propidium Iodide, PI）染色法和流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)HNK給藥處理48 h的H4人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞周期，發(fā)現(xiàn)HNK給藥組S期和G2/M期H4細(xì)胞百分比明顯增多。Western-blot結(jié)果進(jìn)一步證明HNK給藥處理后可以顯著抑制H4人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞中細(xì)胞周期相關(guān)蛋白Cyclin B1、CDC2和cdc25蛋白的表達(dá)，而上調(diào)p-CDC2和pcdc25c的表達(dá)[6]。另外，將PC-3前列腺癌癥細(xì)胞暴露一定劑量的HNK后，c-Myc蛋白總量和/或磷酸化蛋白水平及其mRNA表達(dá)顯著降低。HNK處理進(jìn)一步降低了c-Myc下游靶標(biāo)包括細(xì)胞周期蛋白Cyclin D1和Zeste同源增強(qiáng)子2（EZH2）的表達(dá)，進(jìn)而將PC-3細(xì)胞更多地阻滯在G0/G1期[7]。Wang J等[8]構(gòu)建了基于萊苞迪苷A（Rebaudioside A, RA）的新型納米膠束用于遞送HNK，發(fā)現(xiàn)RA-HNK納米膠束可以增強(qiáng)HNK的體內(nèi)外抗腫瘤活性，游離HNK和RA-HK納米膠束都能夠?qū)uH-7細(xì)胞更多地阻滯在G0/G1期，初步機(jī)制研究表明，游離HNK和RA-HNK納米膠束可以抑制周期相關(guān)蛋白cyclin D1和CDK4的表達(dá)。RA-HNK納米膠束組對(duì)G0/G1期細(xì)胞百分?jǐn)?shù)、周期相關(guān)蛋白的表達(dá)量等的效果要遠(yuǎn)好于游離HNK，這說(shuō)明RA-HNK納米膠束可以提高HNK的體外生物活性。

1.3 誘導(dǎo)自噬

自噬是一種嚴(yán)格調(diào)節(jié)的溶酶體系統(tǒng)，細(xì)胞吞噬自身細(xì)胞質(zhì)蛋白或細(xì)胞器并使其包被進(jìn)入囊泡，并與溶酶體融合形成自噬溶酶體，是眾所周知的Ⅱ型程序性細(xì)胞死亡（Programed Cell Death, PCD）。自噬在癌癥細(xì)胞干性維持以及誘導(dǎo)癌癥復(fù)發(fā)過(guò)程發(fā)揮關(guān)鍵作用。多項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)HNK不僅可以通過(guò)激活凋亡途徑引導(dǎo)癌癥細(xì)胞死亡，也可通過(guò)誘導(dǎo)自噬的途徑顯著誘導(dǎo)癌癥細(xì)胞死亡。羅敏等[9]的研究顯示HNK可誘導(dǎo)人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞A549的G1期阻滯和凋亡，而自噬抑制劑3-甲基腺嘌呤可減弱這種作用。進(jìn)一步機(jī)制研究顯示HNK可以增加腺苷酸激活蛋白激酶（AMP-Activated Protein Kinase,AMPK）磷酸化水平并抑制哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白（Mammalian Target of Rapamycin, mTOR）的磷酸化水平，以上結(jié)果提示HNK主要依賴于AMPKmTOR信號(hào)通路誘導(dǎo)的自噬促進(jìn)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞凋亡。也有研究顯示經(jīng)HNK處理后，可以誘導(dǎo)PC-3、LNCaP和Myc-CaP三種細(xì)胞顯現(xiàn)明顯的保護(hù)性自噬。與對(duì)照組腫瘤相比，來(lái)自HNK處理的小鼠PC-3異種移植腫瘤含有更高水平的LC3BII蛋白。而使用3-甲基腺嘌呤以及自噬調(diào)節(jié)因子重組人自體吞噬相關(guān)蛋白5（Recombinant Human Autophagy Related 5, ATG5）的RNA干擾對(duì)自噬進(jìn)行抑制，顯著增強(qiáng)了HNK暴露引起的細(xì)胞活力抑制和凋亡誘導(dǎo)。

HNK介導(dǎo)的LC3BII蛋白水平的增加在抗氧化劑的存在下又顯著減少。這表明HNK能夠提高前列腺癌細(xì)胞的保護(hù)性自噬[10]。Mottaghi S等[11]發(fā)現(xiàn)HNK能夠引起劑量和時(shí)間依賴性的人骨肉瘤細(xì)胞死亡。HNK誘導(dǎo)的細(xì)胞死亡類型主要為自噬和細(xì)胞凋亡。細(xì)胞內(nèi)活性氧的產(chǎn)生、促分裂原活化蛋白激酶的激活和Atg7的上調(diào)對(duì)HNK誘導(dǎo)骨肉瘤細(xì)胞發(fā)生自噬起關(guān)鍵作用。這些結(jié)果表明，HNK通過(guò)活性氧/細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1/2信號(hào)通路在人骨肉瘤細(xì)胞中引起G0/G1期阻滯、誘導(dǎo)細(xì)胞自噬和凋亡。Sabarwal A等[12]的最新研究結(jié)果顯示，HNK與雷帕霉素聯(lián)合治療有很大的潛力限制移植受者和其他免疫抑制患者的腎腫瘤生長(zhǎng)。這種聯(lián)合可顯著誘導(dǎo)腎腫瘤細(xì)胞的自噬和凋亡，促進(jìn)癌癥細(xì)胞死亡。而這些主要是通過(guò)升高自噬相關(guān)蛋白Carabin和降低自噬抑制蛋白R(shí)ubicon來(lái)實(shí)現(xiàn)，并且與腫瘤促進(jìn)受體酪氨酸激酶AXL的表達(dá)減少有關(guān)。

1.4 抑制上皮－間質(zhì)轉(zhuǎn)化

上皮－間充質(zhì)轉(zhuǎn)化（Epithelial Mesenchymal Transition, EMT）是發(fā)育過(guò)程中上皮細(xì)胞獲得侵襲性間充質(zhì)細(xì)胞特征的一個(gè)復(fù)雜而關(guān)鍵的過(guò)程。EMT被發(fā)現(xiàn)與癌癥的侵襲和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，被認(rèn)為是促進(jìn)腫瘤細(xì)胞遷移和侵襲的重要因素。EMT的主要特征是上調(diào)間充質(zhì)標(biāo)志物N-cadherin蛋白，隨后上皮表面標(biāo)志物E-cadherin蛋白下調(diào)。在EMT過(guò)程中E-cadherin蛋白的下調(diào)主要是通過(guò)EMT轉(zhuǎn)錄因子例如TWIST、SNAIL和SLUG與E-cadherin蛋白啟動(dòng)子結(jié)合介導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄抑制所引起[11]。研究發(fā)現(xiàn)，通過(guò)將不同濃度的和厚樸酚（0、10、20、40 μM）處理PC3細(xì)胞48 h，可顯著抑制細(xì)胞遷移與侵襲能力。Western-bloting結(jié)果進(jìn)一步提示HNK處理非小細(xì)胞肺癌可顯著降低N-cadherin，vimentin及β-catenin蛋白的表達(dá)，E-cadherin蛋白表達(dá)量則顯著升高。mRNA檢測(cè)結(jié)果顯示β-catenin及基質(zhì)金屬蛋白酶9的相對(duì)mRNA表達(dá)量顯著降低。這表明HNK可以通過(guò)靶向調(diào)控Wnt/β-catenin在體外抑制EMT介導(dǎo)的前列腺癌PC3細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)和遷移，而HNK可成為潛在的抗肺癌轉(zhuǎn)移藥物或先導(dǎo)化合物[13]。HNK還可以通過(guò)調(diào)節(jié)β-catenin/MITF軸促使Calpain-10和CHOP/GADD153調(diào)節(jié)的級(jí)聯(lián)反應(yīng)顯著抑制高度轉(zhuǎn)移性黑色素瘤的進(jìn)展。研究認(rèn)為HNK通過(guò)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激激活和EMT標(biāo)志物抑制，可以有效減少黑色素瘤腹膜播散和器官轉(zhuǎn)移[14]。Wang WD等[15]的研究發(fā)現(xiàn)HNK（10-70 μmol/L）能以劑量依賴性方式抑制人乳腺腫瘤細(xì)胞系MCF7、MDA-MB-231和小鼠乳腺腫瘤細(xì)胞系4T1的生存能力。在transwell和劃痕遷移實(shí)驗(yàn)中，HNK劑量依賴性地抑制乳腺癌癥細(xì)胞的侵襲和遷移。證明HNK（10-50 μmol/L）劑量依賴性上調(diào)乳腺癌癥細(xì)胞蛋白質(zhì)水平的上皮標(biāo)記物E-cadherin，下調(diào)間充質(zhì)標(biāo)記物如Snail和Vimentin等。通過(guò)嘌呤霉素?fù)饺朐囼?yàn)發(fā)現(xiàn)HNK降低了乳腺腫瘤細(xì)胞中Snail的翻譯效率。在腫瘤轉(zhuǎn)移的小鼠模型中，腹膜內(nèi)給予HNK[50 mg/（kg·d），6次/周，持續(xù)30 d]顯著減少了轉(zhuǎn)移性4T1細(xì)胞衍生結(jié)節(jié)的數(shù)量，并改善了肺部的組織學(xué)改變。此外，HNK治療的小鼠在轉(zhuǎn)移性結(jié)節(jié)中表現(xiàn)出Snail表達(dá)降低和E-cadherin蛋白表達(dá)增加。

1.5 激活內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激

內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激也稱為未折疊蛋白反應(yīng)（Unfolded Protein Sesponse, UPR），是一種由于錯(cuò)誤折疊和未折疊蛋白的積累而發(fā)生的細(xì)胞狀況。Zhu JF等[16]的研究表明HNK能夠以劑量和時(shí)間依賴的方式顯著降低人肺癌A549和95-D細(xì)胞的活力。顯著上調(diào)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)的凋亡信號(hào)分子像GRP78、p-PERK、p-eIF2α、CHOP、Bcl-2、Bax和Caspase9的表達(dá)。這些結(jié)果表明HNK對(duì)A549和95-D細(xì)胞中的抗癌活性至少部分是通過(guò)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激信號(hào)通路介導(dǎo)的。有研究表明HNK通過(guò)與GRP78 ATP酶結(jié)構(gòu)域的未折疊構(gòu)象結(jié)合，進(jìn)而誘導(dǎo)6種神經(jīng)外胚層腫瘤細(xì)胞系死亡。而且HNK誘導(dǎo)凋亡的效果是表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯的兩倍。同時(shí)，HNK與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)劑芬瑞汀或硼替佐米聯(lián)合用藥對(duì)黑色素瘤和膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞具有協(xié)同作用，但對(duì)神經(jīng)母細(xì)胞瘤的細(xì)胞僅具有相加作用（芬瑞汀）或抑制作用（硼替佐米）。結(jié)果表明HNK可作為一種候選抗腫瘤藥物值得進(jìn)一步研究開(kāi)發(fā)[17]。Chiu CS等[14]也研究發(fā)現(xiàn)可以利用HNK誘導(dǎo)的ER應(yīng)激激活CHOP，進(jìn)而抑制MITF和β-catenin途徑實(shí)現(xiàn)抑制黑色素瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。

1.6 抑制腫瘤細(xì)胞遷移

HNK能夠調(diào)節(jié)腫瘤轉(zhuǎn)移關(guān)鍵信號(hào)通路包括基質(zhì)金屬蛋白酶9、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)因子和轉(zhuǎn)錄激活因子3及其下游分子，顯著降低腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移能力[15]。遷移和侵襲是轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵步驟，而細(xì)胞運(yùn)動(dòng)性降低意味著腫瘤細(xì)胞從原發(fā)位置轉(zhuǎn)移到遠(yuǎn)端的機(jī)會(huì)減少。多項(xiàng)研究證實(shí)HNK對(duì)多種類型腫瘤細(xì)胞具有抑制遷移和侵襲的能力。傷口愈合和Transwell小室的實(shí)驗(yàn)研究也表明HNK及其納米制劑能夠顯著抑制乳腺癌4T1細(xì)胞的侵襲和遷移。進(jìn)一步的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)也證明HNK能夠抑制乳腺癌肺和肝的轉(zhuǎn)移，顯著提高了乳腺癌的治療效果[18-19]。也有研究發(fā)現(xiàn)HNK能夠降低M2標(biāo)記物如CD206、Arg1和CCL2的表達(dá)，顯著抑制M2極化巨噬細(xì)胞中信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)子和轉(zhuǎn)錄激活子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)因子和轉(zhuǎn)錄激活因子6和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)因子和轉(zhuǎn)錄激活因子3的激活。同時(shí)，和厚樸酚通過(guò)促進(jìn)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)因子和轉(zhuǎn)錄激活因子1磷酸化增加M1標(biāo)記物如CD11c、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶和白介素12的表達(dá)。此外，HNK還降低了肺組織中M2/M1巨噬細(xì)胞的比例和白介素-10/白介素-12基因的表達(dá)，從而抑制了小鼠乳腺癌癥的增殖和肺部轉(zhuǎn)移。HNK還可以通過(guò)調(diào)控趨化因子配體2/趨化因子C-C-基元受體2途徑減少巨噬細(xì)胞對(duì)肺組織的浸潤(rùn)。表明HNK具備通過(guò)調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞的極化和募集來(lái)抑制乳腺癌進(jìn)展和肺轉(zhuǎn)移的潛力[20]。HNK還會(huì)進(jìn)一步影響表細(xì)胞黏附分子的表達(dá)，HNK劑量依賴性地抑制腫瘤壞死因子－α刺激的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HUVECs中細(xì)胞間黏附分子1和血管細(xì)胞黏附分子1的表達(dá)，從而抑制腫瘤細(xì)胞黏附以及之后的侵入周圍組織或脈管系統(tǒng)，最終阻止腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移[21]。

1.7 誘導(dǎo)活性氧生成

活性氧（Reactive Oxygen Species, ROS）是指在生物體內(nèi)與氧代謝有關(guān)的、含氧自由基和易形成自由基的過(guò)氧化物的總稱。在機(jī)體內(nèi)，ROS的主要來(lái)源之一是線粒體內(nèi)膜的呼吸鏈底物端，在線粒體中的電子傳遞鏈復(fù)合物將電子傳遞給氧氣的過(guò)程中，有一部分氧氣被還原，形成O2-或過(guò)氧化氫。ROS形成氧的正常代謝的天然副產(chǎn)物，并且在細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)和體內(nèi)平衡中具有重要作用[22]。眾所周知，ROS在細(xì)胞內(nèi)信號(hào)通路的調(diào)節(jié)中起著重要作用，過(guò)量的ROS產(chǎn)生會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞凋亡[23]。HNK具有誘導(dǎo)膀胱腫瘤細(xì)胞BFTC-905的ROS依賴性凋亡的潛力。其可導(dǎo)致ROS的顯著積累以及膀胱癌癥細(xì)胞中基質(zhì)金屬蛋白酶的下調(diào)，進(jìn)而誘導(dǎo)線粒體膜超極化導(dǎo)致線粒體功能障礙，導(dǎo)致caspase-3和caspase-7的激活通過(guò)線粒體途徑誘導(dǎo)膀胱腫瘤細(xì)胞凋亡[24]。Li SL等[25]的研究顯示裝載HNK的脂質(zhì)體能夠增加人髓母細(xì)胞瘤D283細(xì)胞和DAOY細(xì)胞的ROS產(chǎn)生，而該作用可被ROS清除劑N-乙酰半胱氨酸阻斷。進(jìn)一步的研究提示細(xì)胞內(nèi)ROS的增加主要是由抑制ERK/p38-MAPK信號(hào)通路所引起。該發(fā)現(xiàn)表明HNK脂質(zhì)體可以克服其水溶性差、生物利用度低的缺點(diǎn)，可作為髓母細(xì)胞瘤的新型治療候選藥物。

2 討論

到目前為止，多個(gè)文獻(xiàn)已經(jīng)證實(shí)HNK具有強(qiáng)大的藥理活性，在體外和體內(nèi)對(duì)各種類型腫瘤顯示出良好的治療作用。然而，HNK的確切抗腫瘤機(jī)制尚未被完全闡明，特別是在臨床與人類腫瘤相關(guān)的機(jī)制。同時(shí)，由于HNK水溶性差、廣泛的首過(guò)代謝和低吸收，HNK的口服生物利用度較差。因此，HNK的生物利用度需要改進(jìn)以促進(jìn)其臨床進(jìn)一步的使用。到目前為止，多個(gè)研究團(tuán)隊(duì)開(kāi)展利用脂質(zhì)體、納米粒等納米載體改善HNK的溶解度、提高生物利用度和抗腫瘤活性的嘗試，取得了良好的效果。然而，還需要進(jìn)行更深入和系統(tǒng)的研究來(lái)探索更有效的納米遞送系統(tǒng)，以提高HNK的生物利用度和抗腫瘤活性。另外，由于HNK在體內(nèi)被代謝為不同的代謝產(chǎn)物，為了更好地了解HNK給藥后的體內(nèi)去向，識(shí)別體內(nèi)循環(huán)的不同類型的代謝產(chǎn)物顯得至關(guān)重要。而與HNK相關(guān)的體內(nèi)代謝研究、人類有效治療劑量的臨床轉(zhuǎn)化研究還不完善，缺乏HNK的不良反應(yīng)和安全性數(shù)據(jù)的毒理學(xué)研究，缺乏HNK對(duì)免疫系統(tǒng)影響以及與其他細(xì)胞毒性藥物或常規(guī)化療藥物相互作用的研究。以上相關(guān)研究的缺失限制了HNK作為一線抗腫瘤藥物的臨床使用。加強(qiáng)上述與HNK相關(guān)的作用機(jī)制、代謝、安全性及納米制劑的研究，將HNK開(kāi)發(fā)為一種療效顯著、安全性高并且抗腫瘤機(jī)制明晰的臨床新藥應(yīng)該成為醫(yī)藥工作者未來(lái)的首要任務(wù)。