lncRNA GASL1對慢性心力衰竭診斷及預后的預測價值研究

摘要目的：探究lncRNA GASL1對慢性心力衰竭的診斷及預后的預測。方法：選取我院2018年5月—2020年3月收治的128例慢性心力衰竭病人作為研究組，另選取同期于我院體檢的健康者100名作為對照組。對慢性心力衰竭病人進行6個月的隨訪，根據是否發生不良心血管事件分為預后良好組（93例）和預后不良組（35例）。實時熒光定量逆轉錄聚合酶鏈式反應（qRT-PCR）法檢測各組研究對象血清lncRNA GASL1相對表達量；收集病人一般資料，檢測心功能指標，包括左室舒張末期內徑（LVEDD）、左室收縮末期內徑（LVESD）、左心射血分數（LVEF），比較組間差異。Pearson法分析lncRNA GASL1水平與心功能指標的相關性。繪制受試者工作特征（ROC）曲線分析血清lncRNA GASL1相對表達量對慢性心力衰竭的診斷價值及對預后的評估價值。結果：研究組病人血清lncRNA GASL1相對表達量低于對照組（P＜0.05）；預后不良組血清lncRNA GASL1相對表達量低于預后良好組（P＜0.05）。Pearson法分析結果顯示，lncRNA GASL1與LVEDD、LVESD呈負相關，與LVEF呈正相關（P＜0.05）。ROC曲線分析結果顯示，lncRNA GASL1診斷慢性心力衰竭的曲線下面積（AUC）為0.849，評估慢性心力衰竭病人預后不良的AUC為0.839。結論：慢性心力衰竭病人血清lncRNA GASL1相對表達量下調，且與慢性心力衰竭病人的預后關系密切，有望成為慢性心力衰竭早期診斷及預后評估的潛在生物標志物。

關鍵詞慢性心力衰竭；lncRNA GASL1；預后；心功能

doi：10.12102/j.issn.1672-1349.2024.17.016

隨著年齡的增長，老年人出現各種心血管疾病的風險增加。長期的心血管疾病會使心肌受損，最終可能發展為慢性心力衰竭［1-2］，病人心肌收縮率下降，心輸出量大幅降低，表現為呼吸困難、全身疲乏等臨床癥狀，增加病人死亡的風險［3-4］。近年來，慢性心力衰竭的發病率呈逐年攀升趨勢［5］，因此慢性心力衰竭的早期診斷顯得尤為重要，尋找診斷效能較高、特異性較強的標志物用于慢性心力衰竭的早期診斷成為臨床關注的熱點［6］。長鏈非編碼RNA（long non-coding RNA，lncRNA）是目前生物醫學領域研究的熱點，研究發現，lncRNA GASL1參與細胞的增殖和凋亡過程，在癌癥的發展中通常起到抑癌因子的作用［7-8］。但關于lncRNA GASL1與慢性心力衰竭的研究報道較少。因此，本研究將通過檢測慢性心力衰竭病人血清lncRNA GASL1水平，分析其與慢性心力衰竭診斷及預后的關系。現報道如下。

1資料與方法

1.1研究對象

選取我院2018年5月—2020年3月收治的128例慢性心力衰竭病人作為研究組，男72例，女56例，年齡53～75（63.82±7.05）歲。另選取同期于我院體檢的健康者100名作為對照組，男57名，女43名，年齡52～73（62.59±6.52）歲。本研究所有試驗過程均符合《赫爾辛基宣言》相關要求，并通過本院倫理委員會批準（批準文號：2018-04006）。

1.2納入與排除標準

納入標準：符合《中國心力衰竭診斷和治療指南2018》［9］的相關標準，確診為慢性心力衰竭；病人為首次確診，就診前未接受相關治療；存在心肌結構或功能改變；病人知情同意本研究，臨床資料完整，配合度較好。排除標準：合并先天性心臟疾病；合并嚴重肝、腎功能不全；合并感染性疾病、免疫功能障礙；合并惡性腫瘤。

1.3方法

1.3.1實時熒光定量逆轉錄聚合酶鏈式反應法（qRT-PCR）檢測血清lncRNA GASL1水平

采集所有研究對象空腹靜脈血4 mL，以3 000 r/min的速度離心10 min，取血清，按照Trizol試劑（廣州濟恒醫藥科技有限公司）說明書操作分離提取血清總RNA，使用逆轉錄試劑盒（北京索萊寶科技有限公司）合成cDNA，GASL1引物序列：正向引物為5′-GGGCACAAACAGTTCATGTG-3′；反向引物為5′-TGCGTTTGA ATGATTTTCCA-3′，引物由上海生工生物工程有限公司合成，GAPDH做內參，采用Bio-Red T100型qRT-PCR儀（美國Bio-Red公司）檢測各組樣品，獲取Ct值，采用2－△△Ct方法計算lncRNA GASL1的相對表達量。

1.3.2心臟超聲檢查

多普勒超聲心動診斷儀（HPSONOS550，美國Agiln）檢測心功能指標，包括左室舒張末期內徑（LVEDD）、左室收縮末期內徑（LVESD）、左室射血分數（LVEF）。

1.3.3隨訪

病人出院后進行為期6個月的隨訪，記錄不良心血管事件，包括心力衰竭復發、心源性死亡等［10］。將發生不良心血管事件的病人納入預后不良組，其余納入預后良好組。

1.4統計學處理

采用SPSS 20.0軟件進行數據分析。符合正態分布的定量資料以均數±標準差（x±s）表示，組間比較采用獨立樣本t檢驗，組內比較采用配對t檢驗。定性資料以例數、百分比（%）表示，采用χ2檢驗。Pearson法分析血清lncRNA GASL1水平與心功能指標的相關性；利用受試者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲線分析血清中lncRNA GASL1水平對慢性心力衰竭的診斷價值及對病人預后的評估價值，并計算曲線下面積（area under curve，AUC）。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1研究組與對照組一般資料及血清lncRNA GASL1相對表達量比較

研究組年齡、性別、吸煙史、飲酒史、高血壓史、糖尿病史比例及TC、TG、LDL-C、空腹血糖與對照組比較，差異無統計學意義（P＞0.05），研究組LVEDD、LVESD、肌酐高于對照組（P＜0.05），LVEF、血清HDL-C及lncRNA GASL1相對表達量低于對照組（P＜0.05）。詳見表1。

2.2不同預后慢性心力衰竭病人一般資料及血清lncRNA GASL1相對表達量比較

對128例病人進行6個月的隨訪，無失訪病例。統計顯示，預后良好組（93例）年齡、性別、吸煙史、飲酒史、高血壓史、糖尿病史比例與預后不良組（35例）比較，差異無統計學意義（P＞0.05），預后不良組病人LVEDD、LVESD增加，LVEF減小（P＜0.05）。另外，預后不良組病人血清lncRNA GASL1水平低于預后良好組，差異有統計學意義（P＜0.05）。詳見表2。

2.3血清lncRNA GASL1相對表達量與心功能指標的相關性

Pearson法分析結果顯示，慢性心力衰竭病人血清lncRNA GASL1相對表達量與LVEDD、LVESD均呈負相關（P＜0.05），與LVEF呈正相關（P＜0.05）。詳見表3。

2.4lncRNA GASL1對慢性心力衰竭的診斷價值

以是否患慢性心力衰竭為狀態變量，以血清lncRNA GASL1水平為檢驗變量繪制ROC曲線，結果顯示，lncRNA GASL1診斷慢性心力衰竭的AUC為0.849［95%CI（0.796，0.893）］，敏感度和特異度分別為81.25%，74.00%，最佳截斷值為0.89。詳見圖1。

2.5lncRNA GASL1對慢性心力衰竭病人預后的評估價值

以慢性心力衰竭病人預后情況為狀態變量，以lncRNA GASL1為檢驗變量繪制ROC曲線，結果顯示，lncRNA GASL1評估慢性心力衰竭病人預后不良的AUC為0.839［95%CI（0.763，0.898）］，敏感度和特異度分別為82.86%，73.12%，最佳截斷值為0.64。詳見圖2。

3討論

慢性心力衰竭是由多種心血管疾病導致心功能不全的綜合性疾病，主要表現為機體血供不足、肺循環或體循環障礙以及心室充盈等心肌功能障礙，是患有心血管疾病的老年人死亡的主要原因［11-12］。近年來，我國心血管疾病病人數呈逐年上升趨勢，2021年我國慢性心力衰竭病人高達890萬例［13］。雖然慢性心力衰竭在心血管疾病中的占比不高，但其預后總體情況欠佳，病人容易復發，出現心律失常甚至心源性死亡，給病人家庭增加經濟負擔。心肌細胞的損傷、纖維化等過程伴隨著慢性心力衰竭的發展過程，而這些變化可以通過血清學指標來體現［14］。血清學指標是近年來生物醫學領域研究的熱點，其取材方便，檢測速度快，為慢性心力衰竭的早期診斷及靶向治療提供了新的研究思路。

lncRNA雖然是非編碼RNA，但廣泛參與機體的生長發育過程，在心肌細胞的增殖與凋亡、心肌纖維化等過程中發揮重要的調控作用［15］。目前已有大量研究報道了可用于慢性心力衰竭早期診斷的LncRNA，王建軍等［16］研究發現，慢性心力衰竭病人血清lncRNA GAS5低于健康對照組，且lncRNA GAS5低表達病人2年生存率顯著低于lncRNA GAS5高表達病人，ROC曲線分析結果顯示lncRNA GAS5對慢性心力衰竭的早期診斷及預后具有較高的診斷價值；Zhang等［17］通過研究證實，lncRNA MHRT在慢性心力衰竭病人血漿中表達下調，且診斷慢性心力衰竭的AUC高達0.929，具有較高的診斷效能。表明lncRNA與慢性心力衰竭密切相關，可能成為慢性心力衰竭早期診斷的潛在生物標志物。

GASL1是近年來新發現的lncRNA，研究表明具有抑制腫瘤細胞增殖的作用［18］。有研究表明lncRNA GASL1通過靶向轉化生長因子-β1（TGF-β1）促進人血管平滑肌細胞增殖［19］，而TGF-β1與心功能密切相關，因此，推測GASL1可能也和慢性心力衰竭相關。本研究結果顯示，研究組病人的心功能指標LVEDD、LVESD高于對照組，LVEF低于對照組，另外，研究組病人血清lncRNA GASL1相對表達量低于對照組，這提示lncRNA GASL1可能參與了慢性心力衰竭的調控過程，Deng等［20］的研究證實慢性心力衰竭病人血清lncRNA GASL1相對表達量下調，與本研究結果一致。通過對比慢性心力衰竭病人的預后情況發現，預后不良組病人血清lncRNA GASL1相對表達量低于預后良好組，且心功能進一步減弱，表明lncRNA GASL1相對表達量也會影響慢性心力衰竭病人的預后情況。通過Pearson法分析慢性心力衰竭病人血清lncRNA GASL1相對表達量與心功能指標的關系，結果顯示血清lncRNA GASL1水平與LVEDD、LVESD呈負相關（P＜0.05），與LVEF呈正相關（P＜0.05），說明lncRNA GASL1水平越低，提示病人心功能越弱。通過繪制ROC曲線進一步分析血清lncRNA GASL1對慢性心力衰竭的診斷價值及對預后的評估價值，結果顯示血清lncRNA GASL1診斷慢性心力衰竭的AUC為0.849，敏感度和特異度分別為81.25%，74.00%，當血清lncRNA GASL1水平＜0.89，提示患慢性心力衰竭的可能性較大；血清lncRNA GASL1評估慢性心力衰竭病人預后不良的AUC為0.839，敏感度和特異度分別為82.86%，73.12%，當血清lncRNA GASL1水平低于0.64，提示病人預后不良的可能性較大。Deng等［20］研究還證實，慢性心力衰竭病人lncRNA GASL1與TGF-β1呈負相關，因此lncRNA GASL1可能是通過抑制TGF-β1表達來抑制心肌細胞凋亡，從而改善心力衰竭，但仍需后續設計動物實驗或細胞實驗進行驗證。

綜上所述，慢性心力衰竭病人血清lncRNA GASL1水平顯著下調，且與慢性心力衰竭病人的預后密切相關，可能成為慢性心力衰竭早期診斷和預后評估的潛在生物標志物。但lncRNA GASL1參與慢性心力衰竭的具體機制尚需深入研究。

參考文獻：

［1］CAPRIOTTI T，MICARI M.Chronic heart failure treatment with the left ventricular assist device［J］.Home Healthcare Now，2019，37（4）：190-197.

［2］SWEDBERG K.Editorial commentary：guidelines for the treatment of chronic heart failure［J］.Trends in Cardiovascular Medicine，2017，27（5）：324-325.

［3］符明昌，周蓮，曾宗鼎.血清微小RNA-140-5p和趨化因子12對老年慢性心力衰竭患者的診斷價值分析［J］.中華老年心腦血管病雜志，2022，24（9）：924-927.

［4］HMAN J，HARJOLA V P，KARJALAINEN P，et al.Rapid cardiothoracic ultrasound protocol for diagnosis of acute heart failure in the emergency department［J］.European Journal of Emergency Medicine，2019，26（2）：112-117.

［5］呂雄勝，李媛媛，李蓓蕾.IL-27在慢性心力衰竭合并肺部感染病情監測中的臨床意義［J］.心電與循環，2022，41（4）：378-380.

［6］周翠翠，呂風華，王現偉.血清同型半胱氨酸和胱抑素C對慢性心力衰竭患者早期腎損傷的診斷價值［J］.新鄉醫學院學報，2021，38（11）：1025-1028.

［7］鮑紅玉，張凱英，黃廣翅，等.LncRNA GASL1對宮頸癌細胞增殖的影響及其機制探討［J］.中國婦產科臨床雜志，2021，22（5）：458-460.

［8］PENG C，LI X H，YU Y H，et al.LncRNA GASL1 inhibits tumor growth in gastric carcinoma by inactivating the Wnt/β-catenin signaling pathway［J］.Experimental and Therapeutic Medicine，2019，17（5）：4039-4045.

［9］中華醫學會心血管病學分會心力衰竭學組，中國醫師協會心力衰竭專業委員會，中華心血管病雜志編輯委員會.中國心力衰竭診斷和治療指南2018［J］.中華心血管病雜志，2018，46（10）：760-789.

［10］潘文麒，陸林.Vasostatin-2與心肌梗死患者慢性心力衰竭發生及預后的關系［J］.檢驗醫學，2022，37（7）：623-627.

［11］WELSH P，KOU L，YU C H，et al.Prognostic importance of emerging cardiac，inflammatory，and renal biomarkers in chronic heart failure patients with reduced ejection fraction and anaemia：red-HF study［J］.European Journal of Heart Failure，2018，20（2）：268-277.

［12］XU L，PAGANO J，CHOW K，et al.Cardiac remodelling predicts out- come in patients with chronic heart failure［J］.ESC Heart Fail，2021，8（6）：5352-5362．

［13］中國心血管健康與疾病報告編寫組.中國心血管健康與疾病報告2021概要［J］.中國循環雜志，2022，37（6）：553-578.

［14］BRUGTS J J，MANINTVELD O C，VAN MIEGHEM N.Remote monitoring of pulmonary artery pressures with CardioMEMS in patients with chronic heart failure and NYHA classIII：first experiences in the Netherlands［J］.Netherlands Heart Journal，2018，26（2）：55-57.

［15］XU Y Y，FANG H Y，XU Q，et al.LncRNA GAS5 inhibits NLRP3 inflammasome activation-mediated pyroptosis in diabetic cardiomyopathy by targeting miR-34b-3p/AHR［J］.Cell Cycle，2020，19（22）：3054-3065.

［16］王建軍，郭瑩，張淑芳.LncRNA GAS5和miR-142-5p在慢性心力衰竭患者血清中表達及臨床意義［J］.中國循證心血管醫學雜志，2022，14（6）：696-699.

［17］ZHANG L，WU Y J，ZHANG S L.Circulating lncRNA MHRT predicts survival of patients with chronic heart failure［J］.Journal of Geriatric Cardiology，2019，16（11）：818-821.

［18］LIU D Q，XIAO P，FENG C，et al.Long non-coding RNA GASL1 restrains gastric carcinoma cell proliferation and metastasis by sponging microRNA-106a［J］.Cell Cycle，2020，19（20）：2611-2621.

［19］MAN H B，BI W P.Expression of a novel long noncoding RNA （lncRNA），GASL1，is downregulated in patients with intracranial aneurysms and regulates the proliferation of vascular smooth muscle cells in vitro［J］.Medical Science Monitor，2019，25：1133-1139.

［20］DENG H H，OUYANG W B，ZHANG L，et al.LncRNA GASL1 is downregulated in chronic heart failure and regulates cardiomyocyte apoptosis［J］.Cellular amp; Molecular Biology Letters，2019，24：41.

（收稿日期：2023-01-06）

（本文編輯鄒麗）