血清DNMT1在心力衰竭病人中的表達及其與預后的相關性

摘要 目的：探討血清DNA甲基化轉移酶1（DNMT1）在心力衰竭病人中的表達情況及其與預后的相關性。方法：選取華北醫療健康集團邯礦總醫院收治的128例心力衰竭病人作為觀察組，另選取120名同期健康體檢者為對照組，采用酶聯免疫吸附法檢測兩組觀察對象的血清DNMT1、超敏C反應蛋白（hs－CRP）水平，用Pearson相關性分析血清DNMT1、hs－CRP與血清白細胞介素－1（IL－1）、白細胞介素－6（IL－6）、N末端B型鈉尿肽前體（NT－proBNP）的相關性，隨訪12個月，統計病人預后情況，采用受試者工作特征曲線（ROC）分析DNMT1、hs－CRP對心力衰竭病人預后的預測價值，多因素Logistic回歸分析心力衰竭病人預后的影響因素。結果：觀察組血清DNMT1、hs－CRP水平高于對照組（P＜0.05）；預后不良組紐約心臟病協會（NYHA） 心功能分級Ⅲ級或Ⅳ級比例、DNMT1、hs－CRP、IL－1、IL－6、NT－proBNP、左室舒張末期內徑（LVEDD）水平高于預后良好組，左室射血分數（LVEF）水平低于預后良好組（P＜0.05））；經Pearson相關性分析，血清DNMT1與IL－1、IL－6、NT－proBNP呈正相關（r值分別為0.351，0.527，0.326，P均＜0.05），血清hs－CRP與血清IL－1、IL－6、NT－proBNP呈正相關（r值分別為0.453，0.324，0.443，P均＜0.05）；ROC曲線顯示，血清DNMT1預測心力衰竭病人預后不良的ROC曲線下面積（AUC）為0.780，最佳截斷值為40.206 μg/L；血清hs－CRP預測心力衰竭病人預后不良的AUC為0.840，最佳截斷值為2.347 mg/L；血清DNMT1與hs－CRP聯合預測心力衰竭病人預后不良的AUC為0.922，大于DNMT1、hs－CRP單獨預測；多因素Logistic回歸分析顯示，DNMT1、hs－CRP、心功能分級、LVEF、LVEDD是心力衰竭病人預后不良的影響因素（P＜0.05）。結論：DNMT1在心力衰竭病人血清中高表達，是心力衰竭病人預后的影響因素，其與hs－CRP聯合檢測對心力衰竭病人預后具有較高預測效能。

關鍵詞 心力衰竭；DNA甲基化轉移酶1；心功能；預后；相關性

doi：10.12102/j.issn.1672－1349.2024.12.022

心力衰竭（heart failure，HF）是一種復雜的臨床綜合征，近年來其發病率和致死率逐年增加。心力衰竭是由于心肌凋亡和缺血引起心肌收縮能力下降，導致心功能下降，進而誘發心力衰竭發生。已有研究表明，炎癥是引起心力衰竭重要的病理生理機制之一，病人在病理狀態下各種細胞能產生不同的炎癥介質，從而加重病人的病情［1－2］。心力衰竭過程復雜，常伴有心肌細胞氧化應激損傷以及心肌纖維化的病理過程［3］，因此，可通過檢測全身的炎癥狀態、心肌重構有利于對心力衰竭的病情以及預后判斷。相關研究報道，心血管疾病發展到心力衰竭的過程是不可逆的，找到能夠快速檢測、準確度高、靈敏度高的臨床指標對于改善心力衰竭病人的預后有重大意義［4］。DNA甲基化轉移酶1（DNMT1）是體細胞內分布較多的甲基轉移酶，其主要功能是維持DNA甲基化［5］。研究表明DNMT1參與腫瘤、肝炎以及心血管等疾病的發生發展［6－7］。既往研究中，對于血清DNMT1在心力衰竭病人中的表達以及與預后的關系報道較少。本研究旨在探討血清DNMT1在心力衰竭病人中的表達及其與預后的相關性，為改善心力衰竭病人預后提供一定的參考依據。

1 資料與方法

1.1 研究對象

選取華北醫療健康集團邯礦總醫院收治的128例心力衰竭病人作為觀察組，其中男67例，女61例，年齡61～77（69.00±7.69）歲。納入標準：1）符合我國心力衰竭診斷和治療指南中的診斷標準［8］；2）臨床資料完整；3）病人及家屬知情同意。排除標準：1）患有嚴重心、肝、腎疾病者；2）合并有其他惡性腫瘤者；3）有嚴重免疫缺陷者；4）不能完成定期隨訪者。另選取120名同期健康體檢者為對照組，其中，男59名，女61名，年齡63～77（70.00±6.38）歲。兩組性別、年齡比較差異均無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經華北醫療健康集團邯礦總醫院倫理委員會審核批準。觀察組隨訪12個月后，根據預后情況分為預后不良組（57例）與預后良好組（71例）。

1.2 檢測指標

采集病人入院當日及健康體檢者體檢當日清晨空腹靜脈血5mL，4000r/min離心8min，分離血清，于－80 ℃冰箱中保存備用。采用酶聯免疫吸附法檢測血清DNMT1、超敏C反應蛋白（hs－CRP）、白細胞介素－1（IL－1）、白細胞介素－6（IL－6）水平。DNMT1試劑盒購自武漢菲恩生物科技有限公司，貨號：EH2103；hs－CRP試劑盒購自上海淳麥生物科技有限公司，貨號：MM－0900H2；IL－1、IL－6試劑盒均購自上海酶研生物科技有限公司，貨號：EK－R36881，EK－R36903。N末端B型鈉尿肽前體（NT－proBNP）試劑盒購自武漢菲恩生物科技有限公司，貨號：EH0350。

1.3 臨床資料收集

觀察組所有病人均嚴格按照心力衰竭診斷和治療指南［8］中的相關指導給予治療，治療結束后進行預后隨訪，隨訪時間12個月，終點事件為因心力衰竭加重而再次入院或記錄主要的不良心血管事件。收集臨床資料，包括年齡、性別、體質指數（BMI）、吸煙、糖尿病、高血壓、總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL－C）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL－C）、心率、舒張壓、收縮壓等，按照紐約心臟病協會（NYHA）心功能分級標準［9］評價心功能。彩色多普勒超聲診斷儀檢測左室射血分數（LVEF）、左室舒張末期內徑（LVEDD）。

1.4 統計學處理

采用SPSS 25.0統計軟件進行數據分析。符合正態分布的定量資料以均數±標準差（x±s）表示，組間比較采用t檢驗；定性資料采用例數、百分比（%）表示，組間比較采用χ2檢驗；Pearson法分析血清DNMT1、hs－CRP與血清IL－1、IL－6、NT－proBNP的相關性，采用受試者工作特征（ROC）曲線分析DNMT1、hs－CRP對心力衰竭病人預后的預測價值，多因素Logistic回歸分析心力衰竭病人預后的影響因素。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 觀察組與對照組血清DNMT1、hs－CRP水平比較

觀察組血清DNMT1、hs－CRP水平高于對照組（P＜0.001）。詳見表1。

2.2 預后不良組與預后良好組基線資料比較

預后不良組與預后良好組年齡、性別、BMI、吸煙、糖尿病、高血壓、TG、TC、LDL－C、HDL－C、心率、舒張壓、收縮壓比較差異均無統計學意義（P＞0.05）。預后不良組NYHA心功能Ⅲ級或Ⅳ級比例、DNMT1、hs－CRP、IL－1、IL－6、NT－proBNP、LVEDD高于預后良好組，LVEF低于預后良好組（P＜0.05）。詳見表2。

2.3 血清DNMT1、hs－CRP與血清IL－1、IL－6、NT－proBNP水平的相關性

Pearson相關性分析結果顯示，血清DNMT1與血清IL－1、IL－6、NT－proBNP呈正相關（r值分別為0.351，0.527，0.326，P均＜0.05），血清hs－CRP與血清IL－1、IL－6、NT－proBNP呈正相關（r值分別為0.453，0.324，0.443，P均＜0.05）。

2.4 血清DNMT1、hs－CRP對心力衰竭病人預后不良的預測價值

ROC曲線顯示，血清DNMT1預測心力衰竭病人預后不良的曲線下面積（AUC）為0.780，95%CI［0.696，0.864］，最佳截斷值為40.206 μg/L；血清hs－CRP預測心力衰竭病人預后不良的AUC為0.840［95%CI（0.772，0.908）］，最佳截斷值為2.347 mg/L，血清DNMT1與hs－CRP聯合預測心力衰竭病人預后不良的AUC為0.922［95%CI（0.869，0.974）］，大于DNMT1、hs－CRP單獨預測。詳見表3、圖1。

2.5 多因素Logistic回歸分析心力衰竭病人預后不良的影響因素

以心力衰竭病人血清DNMT1、hs－CRP、IL－1、IL－6、NT－proBNP、LVEF、LVEDD均值為截點，將連續變量轉化為二分類變量，其中，DNMT1≥38.45 μg/L為高表達，＜38.45 μg/L為低表達；hs－CRP≥2.56 mg/L為高表達，＜2.56 mg/L為低表達；IL－1≥20.22 ng/mL為高表達，＜20.22 ng/mL為低表達；IL－6≥23.28 ng/L為高表達，＜23.28 ng/L為低表達；NT－proBNP≥213.45 pg/mL為高表達，＜213.45 pg/mL為低表達；LVEF≥45.12%為高表達，＜45.12%為低表達；LVEDD≥52.16 mm為高表達，＜52.16 mm為低表達。以心力衰竭病人預后不良為因變量（不良＝1，良好＝0），以DNMT1（高表達＝1，低表達＝0）、hs－CRP（高表達＝1，低表達＝0）、心功能分級（Ⅲ級或Ⅳ級＝1，Ⅰ級或Ⅱ級＝0）、IL－1（高表達＝1，低表達＝0）、IL－6（高表達＝1，低表達＝0）、NT－proBNP（高表達＝1，低表達＝0）、LVEF（低水平＝1，高水平＝0）、LVEDD（高水平＝1，低水平＝0）為自變量進行多因素Logistic回歸分析，結果顯示，DNMT1、hs－CRP、心功能分級、LVEF、LVEDD是心力衰竭病人預后不良的影響因素（P＜0.05）。詳見表4。

3 討 論

心力衰竭是由多種原因引起的心臟泵血功能受損，心血排放量無法提供組織基本代謝的綜合征。在心力衰竭發病過程中，激活間質細胞的炎性反應，會進一步影響心臟收縮的功能［10］。傳統的影像學檢查時效性差，具有延后性等，故需要能夠更好預測心力衰竭的生物性檢測指標［11］。研究發現不同生物標志物與心力衰竭的不同病理特征有關，且對其預后有一定預測價值［12］。

研究發現DNMT1參與了動脈粥樣硬化以及胰腺炎的病理過程，能夠促進巨噬細胞促炎因子的釋放［13－14］。Deng等［15］研究表明DNMT1可以抑制miR－152－3p的表達，從而誘導ras同源家族成員H轉錄激活并抑制線粒體自噬，促進心力衰竭的發展。另有研究表明DNMT1在心力衰竭病人中高表達，通過促進心肌細胞肥大，誘導心力衰竭的發生［16］。本研究中DNMT1在心力衰竭病人中高表達，且預后不良組高于預后良好組，提示DNMT1水平升高與心力衰竭病人的發生以及預后不良密切相關。慢性炎癥是心力衰竭的發病機制之一，其與心力衰竭的發展和預后有關，炎癥介質可直接導致心肌肥厚、心功能受損。hs－CRP是由肝臟產生的一種細胞因子，研究表明其高表達與急性炎癥反應及心血管疾病的預后有關，并且是心血管疾病的危險因子［17－18］。路軼晴等［19］發現hs－CRP在慢性心力衰竭病人中的表達水平明顯高于健康對照組，并且與心功能分級呈正相關。本研究中，觀察組血清hs－CRP水平高于對照組，且在預后不良組中高表達，原因可能是hs－CRP水平升高與其發生促炎反應有關。

IL－1與IL－6是具有重要作用的促炎性因子。IL－1水平升高可造成心肌細胞負性肌力作用，還可誘導心肌肥大［20－21］。有研究發現hs－CRP、IL－1以及IL－6水平升高與心肌損害嚴重程度呈正相關［19］，本研究中預后不良病人血清DNMT1、hs－CRP分別與血清IL－1、IL－6、NT－proBNP呈正相關，間接說明DNMT1、hs－CRP二者可能在心力衰竭疾病中發揮了促炎作用，原因可能與心肌細胞受損有關。心力衰竭因心臟功能異常而發展迅速，其預后效果一直不佳，本研究中預后不良組NYHA心功能Ⅲ級或Ⅳ級比例、DNMT1、hs－CRP、IL－1、IL－6、NT－proBNP水平高于預后良好組，提示上述因子與預后不良密切相關。周依蒙等［2］研究發現冠心病合并心力衰竭病人血清NT－proBNP水平均明顯升高，且與心功能指標及炎性因子均存在密切關系。ROC曲線顯示，DNMT1、hs－CRP兩者聯合預測心力衰竭病人預后不良的AUC及敏感度均較高，進一步回歸分析發現，DNMT1、hs－CRP、NYHA心功能分級、LVEF、LVEDD是心力衰竭病人預后的影響因素，提示DNMT1與hs－CRP水平升高不利于病人預后，且二者聯合對心力衰竭病人預后不良具有較好的預測價值，可作為臨床評估心力衰竭病人預后的生物指標。

綜上所述，血清DNMT1在心力衰竭病人中高表達，其與hs－CRP聯合檢測對病人預后具有較高預測效能，DNMT1是心力衰竭病人預后不良的影響因素，可作為心力衰竭輔助診斷和預后判斷的生物標志物。本研究的局限性在于樣本量較少，后期將進一步擴大樣本量，對心力衰竭病人按LVEF分類的作用機制進一步深入研究。

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（收稿日期：2022－11－09）

（本文編輯王雅潔）

引用信息 范源潔，馮強，韓國衛，等.血清DNMT1在心力衰竭病人中的表達及其與預后的相關性［J］.中西醫結合心腦血管病雜志，2024，22（12）：2228－2232.