抗生素質量標準的發展及關注點

摘要：藥品質量標準服務于藥品監管，是藥品監督檢驗人員、質量管理人員和產品生產者判斷產品質量的法律/法規性文件，其隨著社會的發展和科學技術的進步而變化。本文從論述抗生素質量標準的發展規律著手，探討當前抗生素標準的熱點問題。通過精準的定性與定量分析，有效地表征/控制藥物的安全性與有效性，利用精準的化學分析替代傳統的生物學分析是當代抗生素質量標準的發展方向。

關鍵詞：抗生素；質量標準；藥典；質量控制

中圖分類號：R978.1 文獻標志碼：A

Development and concerns on antibiotic specifications

Hu Changqin， Yao Shangchen， and Feng Yanchun

（National Institutes for Food and Drug Control， Beijing 102629）

Abstract Drug specifications play a crucial role in drug supervision. It is the legal/regulatory documents to judge product quality for drug inspectors， quality management personnel and product producers， which change with the development of society and the progress of science and technology. In this paper， starting from discussing the development of knowledge more generally of antibiotic specification， the current hot issues were explored. Through accurate qualitative and quantitative analysis to effective characterization/control of drug safety and effectiveness， the use of accurate chemical analysis instead of traditional biological analysis could be the way forward for contemporary antibiotic specifications.

Key words Antibiotics; Drug specification; Pharmacopeia; Quality control

藥品質量標準（藥品標準）是藥品監督檢驗人員、質量管理人員和產品生產者判斷產品質量的法律/法規性文件，其通過對與藥品安全性和有效性相關的諸指標的控制，保證產品可以滿足臨床使用的基本需求，即藥品標準是判斷產品能否應用的最低標準。藥品標準通常具有以下屬性：①不能隨意更改：修改必需依照一定的法律/法規程序，且新標準實施后，原標準自動廢止；②必需強制執行：在標準未修改前，即便有一定的缺陷，也必需執行；③具有局限性（地域性）：不同的藥品標準如《中國藥典》（ChP）、《美國藥典》（USP）、《歐洲藥典》（EP）等可能具有一定的差異，在不同地區如中國、美國和歐盟等上市的藥品，必須首先符合該地域藥品標準的規定；企業根據自身產品的特點，可以建立自己的企業標準；用戶根據自己的需求亦可提出特定的合同標準。國內對建立/修訂藥品標準的認知可分為3個階段：早期以模仿為主，主要模仿《英國藥典》（BP）標準；之后，采用“就高不就低” 原則，即根據各國藥典標準，取“高指標”建立國內標準；目前則依據“合理性（reasonable）原則”，即質控項目綜合考慮藥品的特性和生產工藝等因素，質控限度綜合考慮藥品特性、實驗方法誤差和生產工藝等因素建立嚴謹的藥品標準。

抗生素藥品早期多來源于微生物發酵，由于其通常含多個組分，活性組分的變異致使產品的組成易發生變異，且其結構較一般化學藥品更復雜，使得在新藥研發中對其結構的認知滯后于對其活性的認知，加之穩定性一般較化學藥品差，純度一般較化學藥品低，使得早期的抗生素藥品標準與普通化學藥品標準相比較略有差異。本文從論述抗生素質量標準的發展規律著手，探討目前抗生素標準的熱點問題。

1 抗生素質控理念的沿革

中國的藥品質量控制體系自50年代起，伴隨著質量控制技術的發展逐漸演化為3大質控體系（圖1）：①以形態分析/顯微鑒別為基礎逐漸形成的中藥質量控制體系；②由經典分析化學容量分析為基礎形成的化學藥品質量控制體系；③以生物檢定為基礎形成的抗生素（生物藥）質量控制體系。傳統的抗生素質控理念以生物活性控制為核心，即抗生素的含量用效價（potency）表示，通過效價測定控制產品的有效性，通過生物學實驗，如異常毒性、降壓物質和熱原等控制產品的安全性。至20世紀末，以生物活性控制為核心的抗生素質控理念已經相當完善，在ChP 2000年版之前，抗生素的質量控制基本遵循該理念，較好地解決了不同企業和批次產品臨床療效（安全性、有效性）的一致性問題；利用效價表征含量（認為活性相同，臨床療效一致），不僅解決了對活性成分精準測定的難題，也解決了多組分抗生素含量測定的難題。但以生物活性控制為核心的抗生素質控理念不能及時發現生產菌種變異引起的質量變化；亦無法控制藥品中雜質特別是具有特定毒性（如遺傳毒性、心臟毒性等）雜質帶來的安全性問題。

伴隨著藥物分析技術特別是藥物分離分析技術的快速發展，人們對抗生素的結構包括多組分抗生素的結構越來越清楚，對雜質的來源和結構越來越清晰，對產品質量與毒副反應的關系越來越明確，也使得以活性控制為核心的藥品質控體系的缺陷逐漸顯現。進入21世紀，抗生素的質量控制聚焦于：①發酵類抗生素生產菌株與發酵工藝的控制；②半合成抗生素起始原料與合成工藝的控制；③產品晶型控制；④制劑處方與工藝控制；⑤產品包材相容性研究。為此，抗生素標準中逐漸引入理化檢驗方法，以生物學控制為主，化學分析為輔的質控理念逐漸起主導作用。從ChP 2005年版起，先進的分析理念和分析方法逐漸被采用：在ChP 2005年版中，①專屬的HPLC方法開始替代傳統的容量法和效價法測定抗生素的含量；②開始重視對抗生素組分、相關物質（包括旋光異構體）的控制；③重視對殘留溶劑的控制；④重視對產品晶型、粒度的控制；⑤用細菌內毒素檢查法替代熱原檢查法；⑥基本取消了異常毒性檢查[1]。在ChP 2010年版中，①化學分析方法進一步取代了生物學分析方法，一些結構明確、含量和生物活性基本一致的單組分抗生素，含量測定基本已由效價法修訂為HPLC法，對多組分抗生素則采用效價和組分分別控制的策略；②對有關物質的控制越來越嚴格；③采用多指標、多角度綜合控制產品質量，且指標與方法越來越細化[2]。伴隨著質量源于設計（QbD）理念的推廣，為鼓勵采用先進的生產工藝，并實現對生產過程的控制，進而實現由可靠的生產工藝持續生產質量一致的產品之目標。在ChP 2015年版中，①進一步強化了對藥物雜質譜的控制：通過對不同來源的雜質設定不同的限度，實現對原料質量的控制；通過針對性地控制不同工藝的特定雜質，鼓勵采用先進的生產工藝，并實現對生產過程的控制；通過對微量有害殘留物（如對β-內酰胺抗生素中的聚合物）、特定毒性雜質和殘留溶劑等的控制，保證藥品的安全性；②通過開展生物利用度/等效性與藥物溶出度的相關性研究，建立合理的溶出度標準，保證藥品的有效性[3]。至此，從ChP 2015年版起，抗生素的質控理念已經轉變為以化學分析為主，生物學分析為輔（圖2）。

2 化學藥品質量標準的發展

藥品標準主要由質控項目、質控方法和質控限度構成。質控項目、限度的合理性及檢驗方法的可操作性直接影響著藥品標準的可執行性。國家食品藥品監督管理局于2005年已經發布了《化學藥物質量標準建立的規范化過程技術指導原則》，馬磊[4]對該指導原則進行了解讀，并對化學藥質量標準建立的過程進行了歸納分析。藥品標準是其藥學研究的結晶，其與藥學研究的關系見圖3；且藥品標準中收載的具體質控方法均需進行科學的驗證，操作方法應具有可控性。ChP從2010年版起，基本確定了化學藥品標準的增修訂原則，其基本要點可概括為：在質控項目方面，強調安全性、保證有效性、突出科學性；在質控方法方面，推廣先進性、鼓勵方便性、關注普及性、提倡環保性；在藥品質控限度方面，注意指標間的互補性、注意方法與限度的統一性、注意與原研產品/國外藥典的一致性[5]。ChP 2020年版化學藥質量標準在延續上述原則的基礎上，更強調品種遴選的合理性和與國際標準的協調性；且基于現代藥物分析技術的發展，加強了先進成熟檢測技術在控制藥品安全性和有效性方面的應用，提高了檢測方法的專屬性、靈敏度、穩定性和適用性[6]。

3 抗生素質量標準的發展

按ChP凡例之規定，每一種抗生素藥品正文項下根據品種和劑型的不同，按順序可分別列有：品名（包括中文名、漢語拼音與英文名）、有機藥物的結構式、分子式和分子量、來源或有機藥物的化學名、含量或效價規定、性狀、鑒別、檢查、含量或效價測定、類別、規格、貯藏和制劑等。正文品種的中文藥品名稱系按照《中國藥品通用名稱》推薦的名稱及其命名原則命名；英文名稱均采用國際非專利藥名（INN）。藥品化學結構式按世界衛生組織推薦的“藥品化學結構式書寫指南（Guidelines for the graphic representation of chemical formulae[7]）”書寫。有機藥物的化學名稱根據中國化學會編撰的《有機化學命名原則》[8]命名，母體的選定應與國際純粹與應用化學聯合會（IUPAC）的命名系統一致。上述基本要求仍是目前藥品標準遵循的基本點，但在一些具體項目上則伴隨著時代的發展而變化。

3.1 含量/效價的規定方式

早期抗生素分析采用效價（生物活性）表征抗生素的含量。為將抗生素的效價單位（u）與質量單位相關聯，規定采用抗生素活性成分的質量計量效價，定義“1 mg＝1000單位”（抗生素的理論效價）。對抗生素制劑，為便于臨床應用，一般采用活性成分的量表征制劑的標示含量，以消除相同抗生素由于成鹽種類的不同（如青霉素鈉與青霉素鉀）導致標示含量的差異。為與制劑相匹配，各國藥典對抗生素原料早期也普遍采用活性成分的量表征其純度（含量）。例如：頭孢曲松鈉（C18H16N8Na2O7S3·3.5H2O）分子中含有兩個鈉離子和3.5個水分子，根據其分子式，頭孢曲松鈉（C18H16N8Na2O7S3）和水的理論含量分別為83.8%和9.5%；如按無水物計算，含頭孢曲松（C18H18N8O7S3）原料的理論含量約為92.7%。各國藥典均據此設定頭孢曲松鈉的質控限度，如ChP 2020年版注射用頭孢曲松鈉規定，“按無水物計算，含頭孢曲松（C18H18N8O7S3）不得少于84.0%（約為理論值的90%）；按平均裝量計算，含頭孢曲松（C18H18N8O7S3）應為標示量的90.0%～110.0%”。但近年來發現，采用活性成分的量表征鹽類抗生素的純度（含量）存在一定缺陷。仍以頭孢曲松鈉為例，本品為結晶性粉末，1991年在國內仿制成功。由于國產頭孢曲松鈉的結晶工藝與原研產品不同[9]，表現為國產仿制藥的成鹽率普遍偏低[10]。成鹽率偏低的產品更易與血清蛋白結合，使得給藥初期患者體內游離藥物的濃度偏低，表現為國產頭孢曲松鈉仿制藥較原研藥起效略慢。EP從第四版（2002年）開始將頭孢曲松鈉原料含量的限度修訂為“按無水物計算，含頭孢曲松鈉（C18H18N8Na2O7S3）應為96.0%～102.0%”，通過設定上限，有效地保證了產品的成鹽率大于98%；對注射用頭孢曲松鈉，仍采用頭孢曲松（C18H18N8O7S3）表征其標示量。這種通過設定頭孢菌素鹽類原料含量的上限，控制不易完全成鹽產品的成鹽率，目前已在EP中廣泛用于對頭孢菌素含量的控制。

對抗生素前藥，因其在體內需首先水解成相應的活性成分才能發揮抗菌活性，因而，各國藥典均采用活性成分表征其制劑的含量，但對前藥原料的含量則有采用活性成分計量或整個分子計量兩種不同的表征方法。以頭孢呋辛酯為例，對頭孢呋辛酯片等制劑，ChP 2020年版和現版BP均規定其含量為“含頭孢呋辛酯按頭孢呋辛（C16H16N4O8S）計”， 分別為標示量的90.0%～110.0%和92.5%～105.0%。但對頭孢呋辛酯原料的含量，ChP 2020年版規定“按無水物計算，含頭孢呋辛（C16H16N4O8S）不得少于75.0%（約為理論值的90%）”；現版USP規定“按無水物計算，含頭孢呋辛（C16H16N4O8S）應為745～875 μg/mg”；EP和BP則規定“按無水物計算，含頭孢呋辛酯（C20H22N4O10S）應為96.0%～102.0%”。兩種表征前藥含量的方法各有利弊：以活性成分計量，可以與制劑的含量直接相關，但其與原料的固有純度不直接相關；以整個分子計量，在制劑生產時需將其換算成活性成分的量進行投料。目前，國外藥典對抗生素前藥原料采用分別設定下限和上限控制含量的方式較為普遍。

對抗生素復方制劑亦采用活性成分的量表征復方制劑的比例。例如阿莫西林鈉/克拉維酸鉀（5：1），其中5：1是指活性成分阿莫西林和克拉維酸的比例，而不是阿莫西林鈉與克拉維酸鉀的質量比。按無水物計算，1 mg阿莫西林鈉/克拉維酸鉀（5：1）制劑中理論上應含183.5 μg的克拉維酸鉀（154 μg克拉維酸）和816.5 μg的阿莫西林鈉（770 μg阿莫西林）。

3.2 對【性狀】的一般要求

藥品標準的【性狀】項中通常包括“描述”“溶解性”“比旋度”和“E值”等。

（1）描述：通過簡練的語言描述藥品形狀、顏色等與生產工藝相關的特性；采用模糊性語言，如“白色至類白色”等，表征藥品生產過程中工藝是否出現異常，已經成為共識。實際檢驗中，除非產品與標準中的描述有非常大的差異，通常描述項不作為判斷樣品是否符合規定的必要條件，而是結合【檢查】項中的相關檢測項目綜合判斷，如粉針劑的顏色與描述項略有差異時，通常結合“溶液的顏色”檢查結果綜合判斷。

（2）溶解性：藥品標準中通常僅給出藥品在常用溶劑中的溶解性，供精制或制備溶液時參考。溶解度不作為藥品的常規檢查項目，僅幫助理解藥品的溶解特性。溶解度的測定方法可參考藥典凡例。

（3）比旋度和E值均為與原料純度相關的特征值，測定值與實驗所用的溶劑有關。該特征值受生產工藝的影響較大：如鹽酸頭孢唑蘭在《日本藥局方》（JP）第十四版中的比旋度限度為-73°～-78°，國內仿制時由于雜質譜與原研藥品不同，多數仿制品的比旋度均在JP標準的上限（約-73°）附近[11]；氨芐西林鈉采用輻照滅菌后，比旋度從280°隨輻照劑量的增加而降低[12]；因而，常作為控制產品變異的輔助指標。在設立其限度范圍時，通常需采用成熟工藝的多批樣品，在3臺不同的儀器上分別進行測定，根據其標準差（SD）確定限度范圍。消旋體通常不設立比旋度檢查項。對多組分抗生素，早期曾利用比旋度輔助控制原料藥的組成變化，如ChP規定硫酸慶大霉素（含4個主要組分）原料的比旋度“應為+107°至+121°（50 mg/mL水溶液）”。

3.3 對【鑒別】的一般要求

藥品標準中【鑒別】項不是對未知物的定性分析，而是采用原理清楚的理化方法反映已知藥品的某些物理、化學或生物學特性，進而證明該藥品的真實性。

根據ICH（The International Council for Harmonisation of Technical Requirements for Pharmaceuticals for Human Use）的要求，通常采用兩種或兩種以上不同原理的方法進行鑒別，具體要求可概括為：①利用專屬性不同的鑒別方法互相補充；②方法應再現性好，簡單易操作；③兼顧對藥品活性成分和其鹽基的鑒別。常用的藥物鑒別方法包括：生成物的熔點；反應機理明確的呈色、沉淀或其他化學反應；色譜法，最常用的有薄層色譜法（TLC）和高效液相色譜法（HPLC）；光譜法包括紫外吸收光譜法（UV），紅外光譜法（IR）和拉曼光譜法等；以及常見的鹽基或酸根的一般鑒別試驗等。從發展趨勢上看，鑒別反應的專屬性越來越受到關注，表現為近年來新藥標準中對官能團鑒別反應的應用越來越少。此外，【性狀】項下的物理常數也有助于對藥物的鑒別。

從應用角度，光譜法與色譜法是目前最常用的鑒別組合；IR和色譜法組合多用于對原料藥的鑒別；UV法和色譜法組合常用于對藥物制劑的鑒別。ChP 2020年版在通則“0512高效液相色譜法”中增訂了“利用光譜相似性定性”的表述，使得利用HPLC-DAD檢測器同時獲得藥物的色譜保留信息和UV光譜信息進行藥物鑒別成為可能。拉曼光譜具有與IR相似的專屬性，且可以不經前處理，直接鑒別液體制劑中的活性成分，有望成為注射液鑒別的有效方法[13]。

目前利用IR進行鑒別時大多數情況下采用全譜比較法，這有利于對具有同質異晶現象的藥品鑒別，如頭孢呋辛酯原料應為無定型粉末，《藥品紅外光譜集》收載的標準圖譜是頭孢呋辛酯無定型樣品的圖譜，IR鑒別時應關注供試品與標準圖譜指紋區的差異。由于利用計算化學的方法可以較好地揭示出結構相近化合物的IR/拉曼光譜的差異原因，如替比培南（tebipenem）和替比培南酯[14]，因而，特殊情況還可以不通過比較IR全譜，僅通過對IR圖譜中特定吸收峰的識別進行鑒別。

3.4 對【檢查】的一般要求

藥品質量標準中設立【檢查】項的目的是確保藥品在受控的生產條件下生產，進而保證藥品的安全有效。具體檢驗項目主要依據藥品生產工藝特性和藥品安全性特性而設立，以保證組成藥品的各種成分包括活性成分、非活性成分和雜質等均處于受控狀態，保證與安全性相關的指標均低于安全閾值。

【檢查】項中常見的化學分析項目包括：組分、鹽基測定、有關物質、殘留溶劑、溶液的澄清度與顏色、酸堿度、干燥失重/水分、灰分、重金屬等；常見的生物學檢查項目包括：無菌、微生物限度、熱原/細菌內毒素、異常毒性、降壓物質等；與制劑有關的檢測項目包括：溶出度、崩解度、沉降體積比、滲透壓比、裝量差異、最低裝量等。此外，檢驗項目與藥品的用途有關，如注射劑必須檢測無菌和熱原/細菌內毒素等；口服制劑通常需控制微生物限度和溶出度等。與抗生素藥品密切相關的重要質控項目有組分、有關物質、溶液的澄清度與顏色和無菌等。目前常見的生物學檢查，熱原已經基本由細菌內毒素替代，異常毒性已經基本被取消，降壓物質僅用于對少數直接發酵來源的抗生素的檢驗。

3.4.1 多組分抗生素的組分控制

對發酵來源的多組分抗生素同時控制其效價（生物活性）和活性組分的比例/含量是當前各國藥典的共同質控策略。ChP 2015年版開始利用“絕對含量”替代“相對比例”對多組分抗生素的活性組分進行控制，并將發酵來源的多組分抗生素中的組分進一步分為活性組分和無效組分/雜質分別進行控制[3]。

早期對多組分抗生素多選擇相對比例而非絕對含量進行組分控制，其優點在于實驗中無需對照品即可進行測定。但當產品中出現新的表觀活性較高的無效組分時，將可能導致產品有效組分的比例不變，但含量降低。例如麥白霉素（以麥迪霉素A1和吉他霉素A6為主的多組分抗生素），20世紀80年在國內上市時，二者的總量約占70%[15]；當時由于僅控制其二者的相對含量，沒能對其絕對含量進行有效地控制， ChP 2005年版在對其進行增訂時，產品已變異成含有8個組分，麥迪霉素A1的量為30%～50%，吉他霉素A6的量為10%～20%，二者的總量為40%～70%[16-17]；不得以ChP 2005年版將麥迪霉素A1的量由“不低于40%”修訂為“不低于35%”。如采用絕對含量控制有效組分的量，則可以有效規避組分變異的風險。ChP從2015年版開始，已將硫酸慶大霉素C組分的含量由控制“相對比例”修訂為控制“絕對含量”[18]。

如何區分多組分抗生素中的活性組分和無效組分（雜質）已取得共識[19]。可概括為：①仿制類抗生素的組分及組成比例應與原研產品一致，原研產品中沒有被定義為活性成分的組分被認為是雜質；②對與母體化合物結構相關的小組分，如其在其他品種中已經被認為是有效組分，如交沙霉素中的麥迪霉素A1，則可作為有效組分；③對其他新組分，如果沒有足夠的臨床前/臨床研究數據的支持，一般應作為雜質控制。如ChP從2015年版起對交沙霉素中的諸多組分，吉他霉素A1、A3、A4、A5、A6、A7和麥迪霉素A1組分被認為是有效成分；雜質包括雜質B、C、D、E、J和其他未知雜質；其中要求吉他霉素A3不低于89.0%，吉他霉素A1、A3、A4、A5、A6、A7和麥迪霉素A1組分之和不低于91.0%；雜質B、C、D的含量不得大于3.0%，雜質E的含量不得大于5.0%，其他單個雜質的含量不得大于3.0%，總雜質含量不得大于10.0%。

分別控制多組分抗生素中有效組分和無效組分/雜質的含量，保證產品的安全性和有效性，已經成為多組分抗生素質量標準增修訂的方向。按照EMA（European Medicines Agency）《抗生素有關物質標準制訂的指導原則》要求，與母體化合物結構密切相關的雜質的控制限度一般為0.50%，其他雜質的控制限度一般為0.15%。

3.4.2 有關物質控制

ChP從2015年版起用雜質譜分析理念替代了傳統的雜質分析，在藥品標準中表現為要求檢測方法更具有專屬性，強調方法與國外藥典接軌，并鼓勵常規應用中采用先進的分離技術。從方法執行角度，對含有復雜雜質成分的樣品，如何設定特定雜質（specified impurity）與非特定雜質，如何識別特定雜質，如何對特定雜質進行定量等細節，直接關系到雜質譜分析方法的可執行性。

（1）分析方法的發展" RP-HPLC分析目前仍是藥物雜質譜分析的常規方法，為適應抗生素雜質譜通常更為復雜的特點，采用互補分析的方法完善單一HPLC分析方法的不足已經成為共識。包括：采用不同的檢測波長測定不同類型的雜質，如對兩性霉素雜質的分析，ChP從2015年版起采用303 nm檢測其中的四烯類雜質（雜質A），采用383 nm檢測其中的七烯類雜質（雜質B、C、D）；采用不同類型的色譜柱，如對頭孢噻吩鈉的雜質譜分析，ChP從2015年版起采用C18色譜柱分析一般有關物質，采用苯已基三健鍵合亞乙基橋雜化顆粒填料作為互補方法分析3-位異構體；采用不同的分離模型，如鹽酸頭孢吡肟，ChP 2010年版采用RP-HPLC分析一般有關物質，采用高效毛細管電泳法（第一法）或羧酸基鍵合硅膠色譜柱-電導檢測（第二法）測定其中的N-甲基吡咯烷。

在與國外藥典接軌方面，針對國外藥典多采用電化學測定方法（HPLC-PDA）分析氨基糖苷類抗生素有關物質，而國內多采用蒸發光散射（HPLC-ELSD）進行分析的現狀，國內經對比研究已經基本達成共識：雖然電化學檢測的靈敏度較高，但ELSD方法的靈敏度足可以滿足對0.5%雜質控制的需要[20]；且HPLC-PDA分析的進樣量通常受限，HPLC-ELSD通過增加進樣量可以彌補其檢測靈敏度較低的缺點[21]；HPLC-PAD分析中對部分雜質的響應因子進行校正后，可使得HPLC-PAD與HPLC-ELSD的分析結果一致[22]。ChP 2015年版在硫酸依替米星各論中首次同時收載了HPLC-PAD（第一法）和HPLC-ELSD（第二法）分析其有關物質，在推動與國際接軌的同時，也兼顧了國內分析的習慣。

為鼓勵常規分析中采用先進的UPLC/UHPLC替代傳統的HPLC方法，ChP 2020年版在通則“0512高效液相色譜法”中增加了“可通過相關軟件計算流速、進樣體積、和梯度洗脫程序的調整范圍…….”的表述，大大方便了UPLC/UHPLC的推廣應用。如對ChP 2015年版青霉素鈉有關物質分析方法的轉換，選擇適宜的快速色譜柱，利用Waters Empower 3軟件中的液相方法轉換器，對藥典HPLC方法的流速、進樣體積和梯度時間進行幾何縮放，可使得方法的系統適用性符合要求，色譜峰順序與原方法相同[23]。此時，根據通則僅需要進行簡單驗證即可應用。

（2）特定雜質/非特定雜質" 有關物質檢測項中被明確給出質控限度的雜質稱為特定雜質；特定雜質通常是已知雜質，也可以是結構未被鑒定但在檢測方法中被特指的雜質，如色譜圖中以保留值表征的雜質。特定雜質的含量一般大于鑒別閾值，但是否作為特定雜質主要依據其安全性，如頭孢氨芐/頭孢拉定中殘留的2-萘酚[24]，根據風險評估結果，ChP 2015年版在頭孢氨芐和頭孢拉定原料各論項中將2-萘酚作為特定雜質控制，限度分別為“應不得過0.05%”（原料供口服制劑用）或者“應不得過0.0025%”（原料供注射用）；或該雜質是否直接與工藝控制相關，如阿莫西林閉環二聚體可作為監控阿莫西林三水合物制粒干燥工藝的指針性雜質[25]。對含量小于鑒別閾值但具有較強生理活性的雜質如基因毒性雜質等通常也應作為特定雜質控制。非特定雜質的含量一般小于鑒別閾值；但如果一個已知雜質在產品中的含量較低，且沒有較明確的強生理活性，通常亦可作為非特定雜質。如EP對頭孢西丁鈉的雜質控制，其各論中給出了10個已知雜質，但僅6個雜質（A、B、E、H、I、J）被作為特定雜質。各論中列出的已知雜質信息，代表了對該品種雜質譜的認知，這些雜質在給出的分析方法中均能被檢出；對非特定雜質在實際檢測中不必對其進行定位，簡化了分析難度。這種質控策略應是雜質譜控制的發展方向。

（3）對特定雜質的定量方法" "利用雜質對照品采用外標法對特定雜質進行定量是理想的質控方法。但雜質對照品通常較難制備。對雜質譜復雜的抗生素品種，“有關物質”測定中涉及的“特定雜質”可多達十余種，如ChP中頭孢地尼及其制劑中有26個（雜質A～雜質U）特定雜質，頭孢泊肟酯中有12個特定雜質。此時，在對雜質峰進行有效識別的基礎上，采用加校正因子的主成分對照法定量（當雜質與主成分的校正因子在0.9～1.1之間，可以直接采用主成分自身對照法計算含量）是可行的解決方案。雖然通常可利用相對保留時間（relative retention time， RRT）定位特定雜質，但質量標準中規定的特定雜質的RRT值在實際測定中可在一定的范圍內變化，使得檢測中對特定雜質的定位成為制約因素。采用混合雜質對照品進行系統適用性試驗，并同時進行雜質定位可以較好地解決上述問題。如阿奇霉素的已知雜質有19種（雜質A～雜質S）[26]，根據國產阿奇霉素雜質譜的特點及主要雜質的來源[27]，ChP將常見的9種雜質作為特定雜質，并采用主成分自身對照法對其進行控制。但實際分析中，阿奇霉素及其雜質的色譜保留行為與色譜柱類型和柱溫呈交互作用，使得各雜質對阿奇霉素主峰的RRT在不同C18色譜柱中表現出較大的變動，因此很難利用RRT對各雜質峰進行準確定位[28]。ChP采用含有6種特定雜質的阿奇霉素混合雜質對照品進行系統適用性試驗（圖4），雜質Q與雜質R、雜質I與雜質J作為兩對較難分離的物質對，其分離度可以評價色譜系統的有效性；雜質H的保留行為受色譜柱/柱溫的影響最大，根據雜質H的實際保留值，可以方便地對樣品中的雜質H進行定位；雜質B的保留值相對穩定，利用雜質B的保留值可以幫助判斷色譜過程的結束時間（阿奇霉素諸雜質中僅雜質G的保留值大于雜質B，但國內阿奇霉素原料基本不含雜質G）。即利用上述混合雜質對照品保證了檢驗的順利實施。

測定雜質校正因子的常規方法是標準曲線斜率比法，雜質對照品含量的準確性是影響校正因子準確性的關鍵原因。利用HPLC結合定量NMR技術[29]，或采用紫外檢測器與其它通用型質量檢測器聯用法分析[30]可消除響校正因子測定中雜質對照品含量不準確引入的誤差。

綜上，研制混合雜質系統適用性試驗對照品，用其評價色譜系統有效性同時對特定雜質進行定位，采用加校正因子的主成分對照法對雜質進行定量，是藥品雜質譜控制的發展方向之一。

（4）復雜色譜系統的系統適用性試驗" " 系統適用性試驗（system suitability test， SST）通常被用于判斷常規實驗中色譜系統是否達到預期設計的要求，并快速指示實驗中出現的各類與色譜過程相關的偶發問題。目前，各國藥典已基本對HPLC的SST參數設置達成共識：采用含有多個檢測對象（包括主成分與多個特定雜質）的復雜樣品溶液（SST溶液），通過主峰保留時間、色譜峰順序、難分離色譜峰的分離度保證每一次實驗色譜系統的一致性；利用靈敏度測試溶液，通過信噪比（S/N），保證色譜系統的檢測能力；必要時，利用連續進樣對照品溶液峰面積的相對標準偏差（relative standard deviation， RSD），評價方法的精密度。SST參數的限度通常需結合具體方法驗證的結果設定；通過與典型的系統適用性試驗色譜圖的比較，SST可作為評價復雜雜質譜分析方法轉移/耐用性的理想指標。同時，采用混合雜質溶液進行SST試驗有助于對特定雜質的識別。

混合雜質溶液可通過：①利用混合雜質對照品制備；②依據藥物降解反應機理，通過特定的原位降解（in situ degradation）反應獲得；③利用實際生產中的藥物粗品制備。采用強制降解實驗，結合LC-MS分析確定其中主要雜質的結構，是制備混合雜質對照品的方法之一[31]。采用原位降解反應溶液進行SST亦是常見的方法，如利用頭孢呋辛溶液在60 ℃水浴主要產生脫氨基甲酰基頭孢呋辛，米諾環素溶液加熱產生差相米諾環素等，以主要降解產物與主成分的分離度表征方法的有效性。而利用LC-MS分析確定原位降解溶液中的主要雜質結構，再結合計算機技術得到“標準模擬色譜圖”；將測得的原位降解溶液色譜圖與標準模擬色譜圖進行比較，如ChP 2020年版頭孢泊肟酯、頭孢地尼的SST方法，應是更理想的SST解決方案。

3.4.3 β-內酰胺抗生素聚合物控制

β-內酰胺抗生素聚合物類雜質作為一類引發臨床中過敏反應的重要過敏性雜質，由于其含量較低且結構不穩定，一直是雜質譜控制中的最薄弱環節。國內對該類雜質的控制可概括為3個階段[32]：ChP從2000年版起采用Sephadex G-10凝膠色譜系統/自身對照外標法控制多種青霉素、頭孢菌素的聚合物，但由于Sephadex G-10凝膠色譜法不適宜連續自動化分析，2010年版之后未再收載新的標準。ChP 2010年版首次采用TSK G2000SW高效凝膠色譜系統控制地嗪鈉聚合物，希望將其作為常規有關物質檢測方法的互補方法（稱為“有關物質Ⅱ”），并替代Sephadex G-10凝膠色譜法；2015年版又收載了頭孢米諾鈉有關物質Ⅱ檢查法。但后續采用二維HPLC-MS分析證明，高效凝膠色譜系統的聚合物峰（主成分峰前的雜質峰）通常包含有多種小分子降解物雜質，因而不宜作為常規有關物質檢查法的互補方法。ChP 2015年版采用專屬的RP-HPLC方法控制頭孢唑肟鈉中的二聚體雜質，開啟了利用指針性聚合物控制聚合物總量的先河。

伴隨著對β-內酰胺抗生素聚合物結構和聚合機理等的深入研究[33-35]，人們發現：β-內酰胺抗生素雖然具有多個聚合反應位點和多種不同的聚合反應途徑，但對一個具體品種，通常只能發現一種主要聚合產物；不同品種中聚合物的種類和含量與其分子結構和生產工藝有關；產品中聚合降解物的種類可反映其工藝及工藝控制水平。因而，采用專屬的RP-HPLC方法，利用聚合物譜（polymer profile）評價生產工藝；同時，利用指針性聚合物控制聚合物的總量和工藝的穩定性，已經成為控制β-內酰胺抗生素聚合物的理想方案[32]。

近年來在仿制藥一致性評價過程中，利用強制聚合-柱切換-LC-MS技術，多個品種的聚合物譜已經被闡明；通過控制產品中的主要特定聚合物雜質（指針性雜質）如氨芐西林閉環二聚體、頭孢噻肟二聚體，利用RP-HPLC已經較好地實現了有關物質和聚合物雜質測定方法的統一。但在控制策略上，對不宜形成穩定聚合物的頭孢菌素（側鏈通常不含氨基）如頭孢西丁鈉、頭孢唑林鈉等，由于其實際產品中特定聚合物的含量通常低于0.1%，實際檢測中對該類聚合物雜質是否需要進行定位將其作為特定雜質控制，還是可以將其作為非特定雜質（作為任意單個雜質）進行控制，仍在討論過程中。

3.4.4 溶液的澄清度與顏色檢查

溶液的澄清度與顏色是藥物注射劑常見的質控項目。溶液的澄清度通常用于控制多種未知因素引起的藥品溶液的渾濁，如β-內酰胺抗生素粉針劑采用了不適宜的膠塞，特定的膠塞遷移物與藥物發生相互作用，形成不溶性復合物導致溶液渾濁[36]。而藥物溶液顏色的變化通常認為與其特定的降解反應有關，對溶液顏色的控制是對藥物雜質譜的有效補充。可見，溶液的澄清度與顏色所反映的“藥品質量”內涵，不僅包括藥品出廠時的質量情況，亦可通過其在藥品在貯藏過程中的變化，掌握藥品的穩定性及與包材相互作用等信息。

溶液的澄清度系指藥物溶解后溶液的渾濁程度。藥物中未溶解的固體顆粒懸浮于溶液中，懸浮顆粒對光線可產生散射現象，使得溶液表現為渾濁。各國藥典中收載的溶液澄淸度檢查法均系將藥品溶液與規定的濁度標準液進行比較。ChP收載的基本檢查方法為目視法，2015年版藥典在原有目視法（第一法）的基礎上增加了濁度儀法（第二法），但考慮當時儀器法的普及性，要求“除另有規定外，應采用第一法進行檢測。第一法無法準確判斷兩者的澄清度差異時，采用第二法進行測定”。由于目視法的敏感度不如儀器法，且存在主觀因素，目前儀器法取代目視法已經成為必然。此外，由于各國藥典配制濁度標準液的方法不完全相同，導致濁度標準液略有差異[37]，可能導致測定結果略有不同。對濁度標準液配制與標定的標準化應是各國藥典協調的關鍵。

溶液的顏色系將藥物溶液與規定的標準比色液進行比較檢查藥物溶液的顏色。目前ChP收載的溶液顏色檢查法有目視比色法、色差計法和紫外-可見分光光度計法。目視比色法和色差計法的檢測原理相同，但人眼感覺無法準確量化，對觀察者的經驗有較強的依賴性，色差計法可以更客觀地量化溶液的顏色，因而是理想檢查的方法。紫外-可見分光光度計法，通過特定波長處的吸光度表征溶液的顏色，無法對顏色進行具體描述，且選擇不同的波長檢測結果可能不同[38]，相似品種之間無法進行比較。

ChP與EP/BP收載的溶液顏色檢查法雖然均基于與顏色標準比色液進行比較的原理，但二者的顏色標準比色液存在明顯差異，且色號的變化規律相反（ChP色號增加，顏色漸變深；EP/BP色號增加，顏色漸變淺）；因此二者不具有可比性。采用色差計法將ChP與EP/BP的色度指數分布曲線合并，即可清楚顯現ChP顏色標準溶液與EP顏色標準溶液之間的關系（圖5）。EP-紅色系（EP-R）基本位于ChP-棕紅色系（CHP-BR）與橙紅色系（CHP-OR）的中間；EP-棕色系（EP-B）位于ChP-橙黃色系（CHP-OY）與ChP-黃色系（CHP-Y）之間，大色號接近ChP黃色系，小色號接近ChP橙黃色系；EP-棕黃色系（EP-BY）和黃色系（EP-Y）均位于ChP-黃色系（CHP-Y）與黃綠色系（CHP-YG）之間，偏向黃綠色系；EP-綠黃色（EP-YG）系則完全在ChP-黃綠色系（CHP-YG）之外[39]。

3.4.5 無菌/微生物限度檢查

注射劑和滴眼劑等抗生素制劑應為無菌制劑，需進行無菌檢查；口服制劑等非無菌抗生素藥品需對產品中的需氧菌總數、霉菌酵母菌總數和控制菌進行控制。在對抗生素藥品進行無菌/微生物限度檢查時，也應首先消除樣品的抗菌活性，并通過實驗確認抑菌活性被徹底去除，以保證檢驗結果的有效性。在即將頒布的ChP 2025年版中，無菌/微生物限度檢查法已經完成了與ICH Q4B標準的協調。

（1）無菌" 抗生素藥品的無菌檢查通常選用薄膜過濾法去除其抗菌活性。實驗過程中應關注操作細節如溶解、過濾、沖洗和中和劑等對實驗的影響[40]：采用較低濃度的藥品溶液，少量多次方式沖洗，能最有效地消除吸附在濾膜上的藥物；利用適宜的中和劑可以有效地消除殘留于濾膜上藥物的抑菌活性，其中，卵磷脂和吐溫80是最常用的非特異性中和劑，各類β-內酰胺酶如青霉素酶、頭孢菌素酶和金屬酶等可專屬性地作用于不同的β-內酰胺抗生素，二價金屬離子如鎂離子、鈣離子和錳離子等與喹諾酮類抗生素可形成絡合物，是常用的喹諾酮類抗生素的中和劑。在建立無菌檢查方法時，可首先根據具體抗生素的抗菌譜，選擇敏感菌作為篩選菌株；再利用篩選菌株選擇檢驗條件，確定抑菌成分是否被有效消除；最后再利用藥典規定的代表性菌株完成方法驗證。為保證后續檢驗工作的順利實施與方法轉移，在藥品標準中的無菌檢查項中應明確必要的實驗條件，通常應包括供試液的制備、中和劑、濾膜種類、沖洗液、沖洗流程和陽性對照菌（實驗中的敏感菌）（圖6）。以頭孢菌素為例，結合其抗菌譜和藥典中常用的驗證菌株，第一代頭孢菌素可選擇金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus），第三代頭孢菌素可選擇大腸埃希菌（Escherichia coli）作為篩選菌株，第二代和第四代頭孢菌素可選擇金黃色葡萄球菌和/或大腸埃希菌作為篩選菌株，進行實驗條件的篩選[41]

對抗生素藥品，經協調后的ChP與ICH Q4B的主要差異表現為進行無菌方法的驗證時，要求所采用的菌株略有差異。ICH Q4B采用銅綠假單胞菌作為革蘭陰性菌的代表菌，進行無菌方法的驗證。由于銅綠假單胞菌對多種抗生素為天然多重耐藥菌，而采用敏感菌株進行方法驗證更能反映抑菌性的去除情況，即更具有科學性。因此，ChP從2010年版起采用大腸埃希菌替代銅綠假單胞菌株進行無菌方法的驗證。新協調的ChP，一般情況可以采用銅綠假單胞菌進行無菌方法的驗證，與ICH一致，但增加“對大腸埃希菌敏感的抗生素類產品宜選用大腸埃希菌代替銅綠假單胞菌”的要求。

（2）微生物限度檢查" 對抗細菌的抗生素藥品可采用薄膜過濾法進行需氧菌總數和控制菌檢查，采用培養基稀釋法進行霉菌酵母菌總數檢查[42]；對抗真菌的抗生素則通常需要采用薄膜過濾法進行霉菌酵母菌總數檢查，采用培養基稀釋法進行需氧菌總數和控制菌檢查。與無菌實驗相似，通常首先選擇敏感菌作為篩選菌株，利用篩選菌株選擇檢驗條件，再進行方法驗證，最后完成日常標準操作規程（SOP）。在建立口服制劑微生物限度檢查方法時，根據不同抗生素的溶解性選擇不同的溶解、沖洗方法是薄膜過濾法的關鍵。如對β-內酰胺抗生素，采用“0.1%蛋白胨水（45 ℃）100 mL全量通過薄膜后，再用0.1%蛋白胨水（45 ℃）沖洗薄膜2次（100 mL/次）”[43]；對大環內酯類抗生素，采用“含0.1%吐溫80的0.1%蛋白胨水（45 ℃）100 mL，全量通過薄膜后，再用含0.1%吐溫80的0.1%蛋白胨水（45 ℃）沖洗薄膜5次（100 mL/次）”[44]；對普那霉素片，則需首先利用十四烷酸異丙酯制成濃度為100 g/L的混懸液， 離心取上清液作為供試液，用十四烷酸異丙酯稀釋，再用含0.1%吐溫80的0.1%蛋白胨水（45 ℃）沖洗薄膜6次，每次100 mL[45]；對喹諾酮類抗生素，選擇適應的中和劑是關鍵[46]。由于影響微生物限度檢查方法的因素較多，諸多具體試驗環節如中和劑的合理用量與配制、表面活性劑或增溶劑的合理配制、濾膜材質和培養基等均對實驗有影響，細化檢驗SOP是保證方法穩定、結果可靠的關鍵。

3.4.6 質控限度的確定

質控項目可分為直接與安全性相關的項目，如熱原/細菌內毒素、基因毒性雜質等和與生產過程控制相關的項目兩類，在確定質控限度時對二者的關注點不同。

（1）與安全性直接相關的質控項目" 對與安全性直接相關的質控項目，應以臨床中不出現藥物不良反應的閾值作為最高限度，其中，閾值又可分為絕對閾值和相當閾值。

絕對閾值指已經明確認知，當限度超過該閾值時產品在臨床中大概率出現明確的不良反應。如導致普通注射劑熱原反應的細菌內毒素閾值為“人每公斤體重每小時最大可接受的內毒素劑量（K）為5EU[K=5EU/（kg·h）]”。相對閾值通常指已經明確產品中的某種特性與臨床中的某種不良反應相關，但二者的量-效反應關系尚不十分明確，如產品中的某種特定雜質，已知其能導致臨床的某種不良反應，但不能確定導致該不良反應的絕對閾值。按ICH Q3C的要求，確定該類檢查項目的限度時，通常以在臨床試驗中未發生明顯不良反應的臨床試驗樣品的量值作為參考閾值，后續產品不得超過該量值，并持續進行工藝優化逐漸降低該限值。如臨床中的青霉素速發型過敏反應與產品中的致敏性雜質（青霉噻唑蛋白）的量呈明顯相關[47]，但不能確定產品引發過敏反應的絕對閾值，通過持續的工藝改進，目前青霉素類產品已經基本不再含青霉噻唑蛋白類雜質。

（2）與生產過程控制相關的質控項目" 與生產過程控制相關的質控項目如pH、水分等，通常是為了發現成熟生產工藝的異常情況。其基本理念為在受控的生產條件下，產品的各【檢查】項指標應按一定的統計規律分布；【檢查】項指標超出其固有的分布范圍，提示生產過程出現了異常。但目前按質量源于設計（QbD）的理念，應在明確藥品關鍵生產工藝的基礎上，建立生產工藝（包括原料/輔料屬性和工藝參數）與產品關鍵質量屬性（產品性能）之間的關系，并確認其允許變化的范圍（【檢查】項的指標范圍）。產品在效期內的變化情況、檢測方法的誤差和測定過程中產品的穩定性均影響【檢查】項指標范圍的合理性。如ChP對頭孢噻肟鈉水分限度的修訂，在2015年版之前，根據國內仿制品水分的統計分析結果，將其限度規定為“不得過6.0%”。然而，固體加速穩定性實驗揭示，水分＜3.0%的樣品更穩定；而水分與水分活度的關系研究表明，當水分＜3.0%時，可以忽略水分對穩定性的影響。據此，ChP 2015年版將頭孢噻肟鈉的水分限度修訂為“不得過3.0%”。

3.5 【含量測定】的一般要求與發展方向

利用抗生素微生物檢定法測定抗生素的效價，用其表征抗生素藥物的含量是以生物活性控制為核心的抗生素質控理念的基礎。近年來對抗生素標準中含量測定方法的增修訂集中于兩個方面：①傳統效價測定方法的標準化；②采用化學方法替代傳統的效價法；利用HPLC測定抗生素的含量/效價是發展方向。

（1）傳統效價測定方法的標準化" 抗生素效價測定方法按其原理可分為（瓊脂）擴散法（管碟法）和濁度法，通過與抗生素標準品進行對比檢定確定供試品的效價。

抗生素效價測定的經典方法是管碟法，其利用抗生素溶液在含有試驗菌的固體培養基中擴散產生的抑菌圈大小表征抗生素的抗菌活性，依據抗生素量的對數（lgM）與抑菌圈半徑的平方（r2）呈直線關系進行定量。管碟法易受實驗操作的影響[48]。為保證測定結果的準確性，歷版ChP均要求其試驗應符合以下要求：①測定效價應在估計效價的90%～110%之間，否則應調整估計效價重新試驗；②方法的可信限率一般不得大于5%；③按照生物檢定統計法檢驗結果的可靠性。在新建立管碟法時，應重點關注抗生素在培養基中的擴散行為對結果的影響。如兩性霉素B在不同pH的磷酸鹽緩沖液中可呈不同的解離形式，不同解離形式的兩性霉素B的擴散行為差異，常導致抑菌圈邊緣模糊[49]；琥乙紅霉素和依托紅霉素等紅霉素酯類抗生素，需將供試品水解成紅霉素后與紅霉素標準品比對測定其效價，由于未水解的酯類和紅霉素的擴散行為不同，如果水解不完全，將導致測定結果偏差[50]；多組分抗生素的不同組分如果擴散行為不同亦易導致偏差，如硫酸慶大霉素在不同的培養基中的測量差異可高達20%。對管碟法測定的另一關鍵影響因素是檢定菌。檢定菌的變異可能導致標準品與供試品對其的敏感度不同，進而導致結果偏差[48]。多組分抗生素的不同組分對檢定菌的敏感度不同時，亦可導致測定偏差。如替考拉寧主要由5個結構非常相似的組分TA2-1、TA2-2、TA2-3、TA2-4和TA2-5和少量TA3-1組成。分析不同廠家的替考拉寧產品，其中組分TA2-1和TA2-3的含量差異不大，但TA2-2、TA2-4和TA2-5的含量有較大差異[51]；ChP和EP等均選擇枯草芽胞桿菌如ATCC6633為檢定菌測定替考拉寧的效價，但枯草芽胞桿菌對替考拉寧不同組分的敏感度不同，表現為不同組分的量反應曲線斜率存在顯著性差異。當供試品與標準品的組分比例存在差異時，將導致供試品效價的偏差。采用金黃色葡萄球菌如ATCC29213為檢定菌，此時替考拉寧的不同組分對檢定菌的敏感度相似，可有效消除上述偏差[52]。

濁度法利用在含抗生素的液體培養基中試驗菌生長導致的濁度值的變化表征抗生素的抗菌活性，其消除了不同抗生素組分在固體培養基中擴散行為不同對測定結果的影響。ChP從2005年版開始在硫酸慶大霉素各論項下同時收載了管碟法和濁度法，在進行樣品的仲裁時，濁度法結果更為準[53]；ChP 2010年版，幾乎所有需測定效價的抗生素品種均同時收載了管碟法和濁度法，伴隨著大量單組分抗生素采用HPLC法測定含量，比濁法漸成為多組分抗生素測定效價的主流[2]。

（2）化學方法替代傳統的效價法" " ChP中采用化學方法替代了傳統的效價測定法可概括為：①對結構明確的單組分抗生素，用活性成分的含量直接替代效價含量。ChP 2000年版已采用電位滴定法測定青霉素類抗生素的含量；ChP 2005年版中多種頭孢菌素、四環素和十四元大環內酯類抗生素等的含量均由效價法修訂為HPLC法。②根據抗生素效價與含量的關系研究，采用HPLC法測定抗生素的含量/效價。ChP 2005年版基于“每1毫克純去甲萬古霉素（C65H72Cl2N9O24）的效價（1025 u/mg）與其理論值（1000 u/mg）僅相差約2%”的結果[54]，對甲萬古霉素不再采用效價測定其含量，而直接采用HPLC含量替代傳統的效價值，首次實現了含量測定與效價測定的統一。ChP 2010年版采用HPLC法測定兩性霉素B（C47H73NO17）的含量，并按“每1 mg的C47H73NO17相當于1049兩性霉素B單位”[55]，計算兩性霉素的效價，使其更方便用于脂質體等制劑的效價測定。

化學方法替代傳統效價法的實質是在明確抗生素活性成分的前提下，確定含量-效價的定量關系，獲得其量效轉換系數，進而實現含量測定與效價測定的統一。目前利用HPLC法替代了傳統效價測定法的一般方法（圖7）已經基本成型。對多組分抗生素，不僅需要確定每一個活性組分含量-效價的定量關系，獲得其量效轉換系數，還需要確定哪些小組分需作為活性組分，哪些小組分應作為雜質進行控制。如對硫酸慶大霉素的研究顯示，以慶大霉素4個主要活性組分的含量計算得到的效價值均低于微生物檢定法測得總效價[56]，其原因在于慶大霉素中的小組分西索米星和小諾霉素均對總效價有貢獻。

4 總結

藥品質量標準服務于藥品監管。對藥品標準的認知伴隨著社會的發展、科學技術的進步而不斷深入。在社會發展的不同階段，受限于藥品監管理念和科學技術水平，使得藥品標準具有局限性，即帶有時代的烙印。藥品監管理念的進步促使對上市藥品的監管提出新要求，藥物分析新技術/方法的發展為解決這些新問題提供了有效的手段，因而，藥品標準需伴隨著時代的進步而不斷增修訂。目前通過精準的定性與定量分析，有效地表征/控制藥物的安全性與有效性，利用精準的化學分析替代傳統的生物學分析是當代抗生素質量標準的發展方向。

參 考 文 獻

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第一作者：胡昌勤，漢族，研究員，博士生導師，中國食品藥品檢定研究院化學藥品檢定前首席專家，抗生素室主任兼任微生物檢測室主任。現任第十二屆藥典委員會執行委員，微生物專業組主任委員。1998年獲吳階平醫學研究獎—保羅·楊森藥學研究獎抗生素專業三等獎；2010年獲衛生部中青年突出貢獻專家；2015年獲陸婉珍近紅外光譜科技獎；2019年獲頒“慶祝中華人民共和國成立70周年”紀念章。出版專著8部，發表論文500余篇，其中SCI論文90余篇。授權國家發明專利14項。指導博士、碩士研究生50余人。