nCD64指數對兒童社區獲得性肺炎病原學診斷的價值

［摘要］目的探討中性粒細胞CD64（nCD64）指數對兒童社區獲得性肺炎（community acquired pneumonia，CAP）病原學診斷的價值。方法選擇2018年11月—2019年7月于我院住院的CAP患兒108例，依據病原學檢測結果分為細菌組（57例）、病毒組（31例）和支原體組（20例）。收集并比較各組患兒入院24 h內的nCD64指數、全血白細胞（WBC）計數、全血紅細胞沉降率（ESR）及全血C反應蛋白（CRP）、血漿D-二聚體（D-D）、血漿降鈣素原（PCT）水平等炎癥指標；繪制nCD64指數及其他炎癥指標診斷細菌性CAP的受試者工作特征（ROC）曲線，并計算曲線下面積（AUC）、截斷值以及診斷的靈敏度、特異度及準確度。結果三組患兒nCD64指數及其他炎癥指標比較均有顯著性差異（F=6.489～74.681，Plt;0.05）；與其他兩組相比，細菌性肺炎組患兒的nCD64指數、全血WBC計數、全血ESR、全血CRP水平及血漿D-D、PCT水平均明顯升高（t=15.139～58.371，Plt;0.05）。ROC曲線顯示nCD64指數單獨診斷細菌性CAP的靈敏度94.7%，特異度92.2%，準確度93.5%。nCD64指數+全血CRP水平+血漿PCT水平聯合診斷細菌性CAP的靈敏度為96.5%，特異度為100%，準確度為98.1%。結論nCD64指數診斷兒童細菌性CAP的靈敏度、特異度和準確度較高，在CAP的病原學診斷中具有較高的價值。

［關鍵詞］中性白細胞；社區獲得性感染；肺炎，細菌性；靈敏性與特異性；兒童

［中圖分類號］R725.631［文獻標志碼］A

Value of neutrophil CD64 index in the etiological diagnosis of community-acquired pneumonia in childrenXU Lei， LIU Xiaomeng， SUN Caihong， ZHANG Mengxue， QU Zhenghai（Children’s Medical Center， The Affiliated Hospital of Qingdao University， Qingdao 266003， China）

［ABSTRACT］ObjectiveTo investigate the value of neutrophil CD64 （nCD64） index in the etiological diagnosis of community acquired pneumonia （CAP） in children. MethodsA total of 108 children with CAP who were hospitalized in our hospital from November 2018 to July 2019 were enrolled， and according to etiology detection results， they were divided into bacterial group with 57 children， viral group with 31 children， and mycoplasma group with 20 children. Related inflammatory markers were collected and compared between groups， including nCD64 index， whole blood white blood cell count （WBC）， whole blood erythrocyte sedimentation rate （ESR）， whole blood C-reactive protein （CRP）， plasma D-dimer （D-D）， and plasma procalcitonin （PCT） within 24 h after admission. The receiver operating characteristic （ROC） curve was plotted for nCD64 index and other inflammatory mar-kers in the diagnosis of bacterial CAP， and the area under the ROC curve （AUC）， cut-off value， and the sensitivity， specificity， and accuracy of diagnosis were calculated. ResultsThere were significant differences in nCD64 index and other inflammatory markers between the three groups （F=6.489-74.681，Plt;0.05）， and compared with the viral group and the mycoplasma group， the bacterial group had significant increases in nCD64 index， whole blood WBC， whole blood ESR， whole blood CRP， plasma D-D， and plasma PCT （t=15.139-58.371，Plt;0.05）. The ROC curve analysis showed that nCD64 index alone had a sensitivity of 94.7%， a specificity of 92.2%， and an accuracy of 93.5% in the diagnosis of bacterial CAP， and the combination of nCD64 index， whole blood CRP， and plasma PCT had a sensitivity of 96.5%， a specificity of 100%， and an accuracy of 98.1% in the diagnosis of bacterial CAP. ConclusionThe nCD64 index has relatively high sensitivity， specificity， and accuracy in the diagnosis of bacte-rial CAP in children， and therefore， it has a high value in the etiological diagnosis of CAP.

［KEY WORDS］Neutrophils; Community-acquired infections; Pneumonia， bacterial; Sensitivity and specificity; Child

兒童社區獲得性肺炎（community acquired pneumonia，CAP）是小兒內科住院患兒中常見的呼吸道疾病[1]。2018年全球疾病負擔分析表明，兒童CAP為5歲以下嬰幼兒因疾病死亡原因之首，其中貧窮落后地區的小兒占90%以上[2-3]。臨床早期病原學診斷和合理用藥是CAP治療成功以及預防其嚴重并發癥的關鍵，患兒的臨床表現、傳統炎癥指標和胸部CT結果是經驗性診斷的重要依據[4]。臨床常用的炎癥指標，例如WBC計數、紅細胞沉降率（ESR）、C-反應蛋白（CRP）、PCT和D-二聚體等，均可為兒童CAP的病原學診斷提供一定參考依據[5]，但目前臨床仍不能單憑任何一種的指標異常對兒童CAP進行明確病原學診斷[6]。CD64是免疫球蛋白G（IgG）Fc段受體，具有高親和力的特點[7]，細菌感染時血漿中中性粒細胞指數（nCD64）呈現高水平表達[8]。nCD64指數是通過測量血漿中性粒細胞和淋巴細胞表面CD64的免疫平均熒光強度（MFI）比值確定的，研究表明該指數可作為評估細菌感染的有效生物標志物，在膿毒血癥和感染性疾病的診斷中具有良好應用前景[9]。本研究旨在分析nCD64指數在兒童CAP病原學診斷中的應用價值。

1資料與方法

1.1一般資料

選擇2018年11月—2019年7月于青島大學附屬醫院兒科住院的CAP患兒共108例，患兒均符合《兒童社區獲得性肺炎診療規范（2019年版）》[10]中CAP診斷標準。排除標準：①合并有兒童支氣管哮喘、肺結核、支氣管擴張等其他肺部疾病者，存在胸廓畸形或氣管、支氣管、肺發育異常者；②有免疫系統、血液系統疾病病史者，或近6周內有糖皮質激素及免疫抑制劑治療史者；③精神、智力或思維異常無法配合治療者；④伴有心血管功能或凝血功能異常疾病，或長期使用抗凝藥物者；⑤已在外院或門診規范使用抗生素治療者；⑥同時感染兩種或者兩種以上病原體的混合感染患兒。依據上述診斷標準中兒童CAP病原學診斷標準[10]，將108例患兒按照病原學檢測結果分為細菌組（57例）、病毒組（31例）和支原體組（20例）。

1.2指標收集

收集所有患兒入院之后第一天的炎癥指標（包括全血WBC計數、全血ESR、全血CRP水平、血漿PCT水平及血漿D-D水平）、病原學抗體檢測結果（包括肺炎支原體抗體滴度和呼吸道病毒抗原檢測結果）及靜脈血培養和深部痰培養結果。

1.3nCD64指數測定

患兒入院后第一天采集肘靜脈血，留取抗凝血樣本50 μL，使用流式細胞儀（FACSCantoⅡ，美國BD公司）測定中性粒細胞以及淋巴細胞表面CD64的免疫MFI，并以此計算nCD64指數。nCD64指數=MFI中性粒細胞CD64/MFI淋巴細胞CD64。

1.4統計學方法

使用SPSS 24.0統計軟件進行統計學分析。符合正態分布的計量資料以±s表示，多組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用t檢驗。繪制受試者工作特征（ROC）曲線，并且計算曲線下面積（AUC）、截斷值以及診斷的靈敏度、特異度和準確度，分析nCD64指數對細菌性CAP的診斷效能。以Plt;0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1各組患兒nCD64指數及其他炎癥指標比較

本研究納入108例患兒中男62例，女46例；年齡1～14歲，中位年齡6歲。方差分析結果顯示，三組患兒的nCD64指數及其他炎癥指標比較均有顯著差異（F=6.489～74.681，Plt;0.05）；細菌組患兒nCD64指數、全血WBC計數、全血ESR、全血CRP水平及血漿D-D、PCT水平均明顯高于病毒組、支原體組（t=15.139～58.371，Plt;0.05）。見表1。

2.2臨床炎癥指標在診斷細菌性CAP的效能

繪制臨床炎癥指標診斷細菌性CAP的ROC曲線（聯合診斷采用數學模型），根據AUC結果確定最佳截斷值，即以nCD64指數≥2.14、全血WBC計數≥9.49×109/L、全血ESR水平≥16.60 mm/1 h、全血CRP水平≥6.51 mg/L、血漿D-D水平≥391.00 mg/L及血漿PCT水平≥0.55 mg/L為陽性，計算得出各炎癥指標診斷的靈敏度、特異度及準確度。ROC曲線顯示，nCD64指數單獨診斷細菌性CAP的靈敏度為94.7%，特異度為92.2%，準確度為93.5%。見表2、3。

3討論

兒童CAP是小兒內科住院患兒常見的呼吸道疾病，該病如不及時診斷及合理治療，往往會引起呼吸及心力衰竭等嚴重并發癥，進而影響兒童健康發育，長此以往可能會遺留肺功能下降、慢性咳嗽等相關并發癥。兒童CAP的感染病原菌在不同年齡階段、月份、區域分布等方面具有較大差別，致使臨床診斷及治療上存在誤診及治療延誤的可能性，因此在臨床上應早期識別其相關致病病原菌。病原菌檢查細菌培養是兒童細菌性CAP檢測的金標準，但是細菌培養所需時間較長[11]，由此導致的患兒治療不及時或者產生的并發癥，可使本病發展成為重癥肺炎[12]。因此臨床上要做到及時診斷，應盡早明確致病病原體，這對CAP治療意義重大。

近年來，臨床上常用流式細胞術檢測CAP患兒外周血中nCD64分子的表達水平，該方法對明確患兒的病原學診斷具有一定作用。CD64屬于免疫球蛋白家族一員，是IgG Fc段受體，具有高親和力的特點[13]。其與IgG Fc段受體結合后，在細胞免疫方面發揮促進作用[14]，在人體健康生理情況下于中性粒細胞表面少量表達，且表達量無男女差別[15]。細菌感染時，在LPS、IL-12等炎性因子的刺激下，血漿中nCD64被迅速激活，致使在短短4～6 h內表達量迅速上升，20 h左右達到最高點。當細菌感染控制48 h后，nCD64表達量迅速下降，大約7 d恢復到正常水平[16]。本研究中，與病毒組、支原體組相比，細菌組患兒的nCD64指數、全血WBC計數、全血ESR、全血CRP水平及血漿D-D、PCT水平均明顯升高。雖然目前臨床多采用WBC計數、CRP和PCT等傳統炎癥指標預測病原學診斷及評估病情，但其預測的靈敏度、特異度均不高[17-18]。經臨床研究發現，全血WBC計數、全血CRP水平及血漿PCT水平的高低與炎癥的嚴重程度存在一定關聯，高于正常范圍的炎癥指標提示可能存在臨床上的細菌感染[19]。但在某些特殊情況下，如劇烈運動、妊娠或急性外傷等時，上述指標也可能出現不同程度的升高。研究發現當CAP患兒血漿PCT水平大于20 mg/L時，臨床多診斷為細菌性肺炎[20]，其診斷的特異度雖然為100%，但靈敏度僅為21%，準確度為58.3%，仍有漏診及誤診的風險[21]。

nCD64指數是一項早期診斷全身感染性疾病的標志物，在兒童及成年人細菌感染診斷中的靈敏度達90%以上，特異度為90%～100%[22]。國外有研究對膿毒癥住院患者的nCD64指數、全血WBC計數、全血CRP水平及血漿PCT水平進行檢測，結果表明nCD64指數診斷膿毒癥的靈敏度及特異度優于全血WBC計數、全血CRP水平及血漿PCT水平[23]。國內研究顯示nCD64指數在CAP病原學鑒別診斷中具有重要臨床意義[24]，該研究顯示血漿nCD64指數、全血WBC計數及CRP水平對細菌感染診斷的靈敏度分別為87.8%、75.6%、70.7%，特異度分別為89.7%、74.1%以及81.0%；并且血漿nCD64指數較全血WBC計數及CRP水平均明顯增高。一項有關新生兒敗血癥的研究發現，nCD64指數與細菌感染敗血癥病情危重程度有一定關聯，并與危重新生兒感染死亡率呈正相關性[25]。

為進一步研究nCD64指數在CAP病原菌診斷中的作用，本研究根據ROC曲線確定單項或多項炎癥指標診斷細菌性CAP的最佳截斷值、靈敏度、特異度及準確度。本研究發現nCD64指數在細菌性CAP診斷中靈敏度、特異度及準確度較高（均＞90%），好于單一炎癥指標的診斷效能；而nCD64指數+全血CRP水平+血漿PCT水平聯合診斷細菌性CAP的靈敏度、特異度以及準確度更高（均＞95%）。

綜上所述，nCD64指數診斷兒童細菌性CAP的靈敏度、特異度和準確度較高，在CAP的病原學診斷中具有較高的價值。同時，多項炎癥指標聯合檢測有助于提高CAP患兒病原學診斷的準確性。倫理批準和知情同意：本研究涉及的所有試驗均已通過青島大學附屬醫院醫學倫理委員會的審核批準（文件號QYFYWZLL27697）。所有試驗過程均遵照《人體醫學研究的倫理準則》的條例進行。受試對象或其親屬已經簽署知情同意書。

作者聲明：曲政海、徐雷參與了研究設計；徐雷、劉曉萌、孫彩虹、張夢雪、曲政海參與了論文的寫作和修改。所有作者均閱讀并同意發表該論文，且均聲明不存在利益沖突。

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（本文編輯范睿心厲建強）