鐮刀菌FusariumoxysporumLHS-P1-3次級代謝產(chǎn)物的分離鑒定及腫瘤細(xì)胞毒活性研究

Isolation， identification and tumor cytotoxic activity study of secondary metabolites from Fusarium oxysporum LHS-P1-3

ShuTing，Sun Jian，WuRongxiang，Wei Caixia，TianJingyuan，WangPei，KongFandong，Wang Cong，and ZhouLiman （KeyLaboratoryofChemistryandEngineeringoforestProducts，StateEthnicAfrsCommision，GuangxiKeyLaboatoyof ChemistryandEngineringofForestProducts，GuangxiCollaborativeInovationCenterforChemistryandEngineringofForest Products， Guangxi Minzu University，Nanning 530006）

AbstractObjective To investigate the secondary metabolites of the endophytic fungus Fusarium oxysporum LHS-P1-3 isolated from ground peanut.MethodsThe fungal secondary metabolites were isolated，purified by normal-phase silica gel column chromatography and high-performance liquid chromatography，etc.The structures were identified by ESI-MS，NMR，and other methods，and the tumor cytotoxicity was evaluated using the CCK8 method.ResultsNine compounds were isolated from the endophytic fungus Fusarium oxysporum LHS-P1-3， including one new compound （stackylineE methyl ester，1）.The activityresults showed that compound 3（eiatin J₁） had strong tumor cytotoxic activity against HepG2 cells， with an IC₅₀ value of 8.35±0.66 μmol/L ， stronger than the positive control drugs doxorubicin and sunitinib，and moderate cytotoxicity against LO2 normal kidney cells. IC₅₀ value of （35.36±2.46 ） μmol/L . ConclusionCompound 1 is a new derivative of the para-substituted benzene， and compound 3 has cytotoxic activity against a variety of tumor cells.

Key wordsFusarium oxysporum LHS-P1-3; Secondary metabolites; Tuomr cytotoxic activity

鐮刀菌屬，隸屬于子囊菌門，其首次記載可追溯至1840年[1]。該菌屬真菌展現(xiàn)出極強(qiáng)的環(huán)境適應(yīng)性，能在包括沙漠與極地等極端條件下生長[2]。盡管眾多鐮刀菌會產(chǎn)生有害毒素，但其次級代謝產(chǎn)物富含多樣且具生物活性的新化合物[3]，比如聚酮類、生物堿類、萜類、類固醇和環(huán)脫肽類化合物[4]，它們具有抗病毒[5]、抗菌[]、抗腫瘤[7]、抗氧化[8和抗炎[9]等多種生物活性，因此鐮刀菌次級代謝物是藥物研發(fā)領(lǐng)域的重要資源。

本研究使用的菌株FusariumoxysporumLHS-P1-3是從位于廣西民族大學(xué)（地理位置：北緯N22^°50^′20\" ， E108^°11\"29\" 區(qū)域的落花生樣本中分離獲得。前期研究已從該菌株的提取物中成功分離并鑒定了1種新型環(huán)肽化合物以及5種已知的環(huán)肽化合物[10]。為了深入探索F.oxysporumLHS-P1-3的次級代謝產(chǎn)物庫，本研究進(jìn)一步實(shí)施了分離工作，成功獲得了9個單體化合物，其結(jié)構(gòu)如圖1所示，其中化合物1為新化合物。采用CCK-8法分別評估了化合物1＼～6的腫瘤細(xì)胞毒活性，結(jié)果顯示化合物3對3種腫瘤細(xì)胞（HepG2、Hela和HCT-116）以及1種正常細(xì)胞（L02）具有抑制活性（化合物7＼～9結(jié)構(gòu)較為簡單，且其中化合物7量不足，化合物8和9已有相關(guān)文獻(xiàn)報道其無腫瘤細(xì)胞毒活性[11-12]，因此并未檢測化合物7＼～9的腫瘤細(xì)胞毒活性）。

1材料與方法

1.1儀器和試劑

KQ-500DB數(shù)控超聲波清洗器（昆山超聲儀器有限公司）；HCB-1300V超凈工作臺（青島海爾特種電器公司）；YXQ-LS-75SII高壓滅菌鍋（上海博迅設(shè)備廠）；N-1300旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、SB-1300水浴鍋（上海愛朗公司）；SHZ-III循環(huán)水式真空泵（鞏義予華公司）;Bruker（400HZ）核磁共振波譜儀（德國BrukerBiospin公司）；MarinerAPI-TOF型質(zhì)譜儀（美國ThermoFisher公司）；SPD-10A高效液相色譜儀（日本Shimadzu公司）；ProStar210半制備高效液相（美國Varian公司）；200＼～300目正相硅膠（青島海洋化工集團(tuán)公司）；乙酸乙酯、甲醇工業(yè)級、甲醇色譜級、乙腈工業(yè)級、乙腈色譜級（成都市科隆化學(xué)品有限公司）。

1.2方法

1.2.1 菌株的發(fā)酵

F ：oxysorupmLHS-P1-3分離自廣西民族大學(xué)落花生樣品 （N22^°50^′20^′ ， E108^°11\"29\"） ，將真菌 F. oxysporumLHS-P1-3接種于PDA培養(yǎng)基中，置于28^°C 培養(yǎng)箱中培養(yǎng) ，挑取菌株于大米培養(yǎng)基（大米80g，自來水 120mL 中，室溫培養(yǎng) 30d ，發(fā)酵規(guī)模為100瓶（ 1000mL 錐形瓶）。

1.2.2 化合物的提取與分離

發(fā)酵產(chǎn)物用乙酸乙酯萃取3次并合并，將乙酸乙酯萃取液進(jìn)行減壓濃縮，共得到粗提物 77.43g 。使用 90% 甲醇-水和石油醚對粗提物進(jìn)行萃取，得到90% 甲醇-水萃取物 43.85g 。將甲醇餾分進(jìn)行正相硅膠柱色譜，以石油醚-乙酸乙酯（10：1＼～1：2）為梯度進(jìn)行洗脫，共得到21個組分Fr.1＼～Fr.21。Fr.6 （763.3mg） 通過 80% 乙腈-水在HPLC制備，得到化合物2（ 5.3mg） 和化合物7 （1.5mg） ，通過 40% 甲醇-水在HPLC制備，得到化合物8 （9.4mg） 和化合物9 4.5mg 。Fr.14（1.915g）通過 75% 乙腈-水在HPLC制備，得到化合物3 （2.6mg） 和化合物4 （8.2mg） 。 Fr.19（1.33g） 通過 ?c₁₈ 柱在高流速制備液相用甲醇-水 （10%～100%） 梯度洗脫，得到4個亞組分（Fr.19-1＼～Fr.19-4）。Fr.19-3 78.6mg） 通過 25% 乙腈-水在HPLC制備，得到化合物1 （6.5mg） ）。 Fr.20（1.09g） （2通過 C₁₈ 柱在高流速制備液相用甲醇-水 （10%～100% 梯度洗脫，得到5個亞組分（Fr.20-1＼～Fr.20-5）。Fr.20-5（68mg） 通過HPLC制備獲得化合物5 （2.6mg） 和 6（1.5mg） 。

1.2.3 腫瘤細(xì)胞毒活性測試

將腫瘤細(xì)胞在對數(shù)生長期稀釋成細(xì)胞懸液，在96孔板每孔接種 100μL 懸液（每孔 9×10³ 個細(xì)胞）。細(xì)胞在二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 24h ，去除原培養(yǎng)基。將待測樣品添加到96孔板中，在培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 48h 0將 10% 的CCK-8試劑加入96孔板中，反應(yīng) 3.5h 后在450nm 處用酶標(biāo)儀檢測。在實(shí)驗(yàn)過程中，為每個測量的濃度設(shè)置了3個平行。最后計算化合物對3種腫瘤細(xì)胞（HepG2、Hela和HCT-116）以及1種正常細(xì)胞（L02）的抑制率，抑制率 （A陰性對照-A待測樣品）/A性對照×100% 。將抑制率高于 50% 的化合物，進(jìn)行 IC₅₀ 測試。 IC₅₀ 實(shí)驗(yàn)根據(jù)半對數(shù)稀釋法，將實(shí)驗(yàn)方案濃度配置為0、0.625、1.25、2.5、5、10、20、30、40和 ，實(shí)驗(yàn)步驟與初篩一致，使用IBMSPSSStatistics軟件根據(jù)其各濃度抑制率計算得IC值。

2 結(jié)果與分析

2.1 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：棕色油狀物，不飽和度為5，比旋光度 ， CD₃OD） ，正離子高分辨質(zhì)譜HR-ESI-MS在 m/z 291.1201（計算值291.1203）給出準(zhǔn)分子離子峰 [M+Na]⁺ ，提示分子式為 C₁₄H₂₀O₅ 13CNMR和HSQC數(shù)據(jù)顯示共存在14個碳信號（表1），包括1個基碳信號 （δ_c174.4） ，3個季碳信號包括2個苯環(huán)碳信號 （δ_c127.7，159.60） ，1個季碳信號 （δ_c/H 77.6/3.72） ，4個亞甲基碳信號包括2個對稱的苯環(huán)碳原子 （δ_c/H131.36/7.17，115.7/6.90） ，1個與氧基團(tuán)相連的亞甲基信號 （δ_C/H70.5/4.22 和3.89），3個甲基碳信號包括1個含氧甲基碳信號 （δ_C/H52.4/3.66） 。通過上述數(shù)據(jù)分析，初步確定了該化合物是對取代苯的衍生物。將化合物1與已知化合物stachylineE比較[13]，發(fā)現(xiàn)二者除存在1個甲氧基信號差異外，具有高度的相似性。結(jié)合化合物1的HMBC和 ¹H-¹H COSY譜（圖2），進(jìn)一步確定其平面結(jié)構(gòu)，并推測出甲氧基與8號位羰基碳相連。檢索并確定為新化合物，因其旋光與stachylineE旋光一致，故確定構(gòu)型為S型，命名為stackylineEmethylester。

化合物2：黃色油狀；ESI-MSm/z696.5 [M+H]⁺ ，分子式 C₃₇H₆₅N₃O₉ . ¹H NMR （400MHz. CD₃OD） ： δ_H 5.45 （1H， d， J=6.5Hz ，H-8）， 5.34 （1H， d， J=5.5Hz ，H-8），5.21 （2H，d， J=6.6Hz ，H-8，H-14），4.93 （1H，d， J=9.9Hz H-2），4.73（1H，d， J=9.9Hz ，H-2），3.19 （6H， s， 6-NCH₃×2 ），3.14（3H， s，19-NCH），2.22-2.31 （2H， m， H-3×2 ），1.93（4H，overlap， _H-9×3 ，H-15a），1.68 （1H，m，H-15b），1.44-1.49 （4H，overlap，H-10a×3，H-16）， 1.27（3H，overlap，H-10b ×3 ），1.08 （6H，t， J=6.3Hz H-4×2 ），0.91-1.01（30H，overlap， _H-5×2 ，H-17，H-18， H-11×3 H-12×3 ）； ¹³C NMR （ 100MHz ， CD₃OD ） δ_c 172.7 （ C=O. C-1），172.7（ C=O C-1），172.3 （C，C-7）， 172.2 （C，C-7），172.1 （C，C-7），171.7 （ C=O ，C-13）， 75.5 （CH，C-8），75.3 （CH，C-8），75.0 （CH，C-8），63.7 （CH， C-2）， 62.9 （CH， C-2）， 56.2 （CH， C-14）， 38.2 （ CH₂， C-15）， 38.1 （CH， C-9）， 37.8 （CH， C-9）， 37.4 （CH， C-9）， 32.6 （NCH，， C-6）， 32.3 （NCH，， C-6）， 32.0 （NCH， C-19），29.4 （CH，C-3），29.4 （CH，C-3），26.5（ CH₂ ， C-10×3 ），26.3 （CH，C-16），23.6 （ CH₃ ，C-17），21.2（ CH₃ ，C-18），20.7 （ CH₃. C-4）， 20.5 （ CH₃ ，C-4）， 20.4 （ CH₃ ，C-5）， 20.2（CH，C-5），15. （ CH₃， C-12），15.2 （ CH₃ ，C-12），14.9（ CH₃ ，C-12），11.8（ CH₃ ，C-11），11.8（ CH₃ C-11×2 。該化合物的數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[14]報道的一致，故化合物2鑒定為enniatin Q。

化合物3：無色油狀物；ESI-MSm/z634.3 [M+Na]⁺ ，分子式 C₃₁H₅₃N₃O₉ ： ¹H NMR （400MHz CD₃OD） ： δ_H 5.34 （1H， d， J=8.2Hz ，H-6）， 5.08 （2H， d， J=8.3Hz 0 _H-6×2 ，4.95 （1H，d， J=10.0Hz ，H-11）， 4.78 （1H， d， J=7.4Hz ，H-2），4.72（1H，d， J=11.0Hz ，H-11）， 3.25 （3H，s，15-NCH），3.20 （3H，s，15-NCH），3.18（3H， s， 4-NCH₃， ），2.13-2.28（5H，overlap， H-7×3 。 H-12×2 ） 1.46 （3H， d， J=7.7Hz ，H-3）， 0.94-1.09 （30H， overlap， H-8×3 0 _H-9×3 ，H-13 ×2 ，H-14×2）； ¹³C NMR （100 MHz， CDOD）： δ172.8 （ C=0 ，C-1）， 172.3 （ （=0 ，C-5）， 172.2 （C=O，C-5），172.1（ C=O ，C-5），171.8（ C=O ，C-10）， 171.8 （ C=O. C-10），77.4 （CH，C-6），76.7 （CH，C-6）， 76.4 （CH，C-6）， 63.5 （CH，C-11），62.7 （CH，C-11）， 54.8 （CH， C-2）， 32.9 （ NCH₃， C-4）， 32.6 （ NCH₃ C-15）， 32.5 （NCH₃ ，C-15）， 31.9 （CH，C-7），31.3 （CH，C-7），31.2 （CH，C-7），29.7 （CH， C-12）， 29.0 （CH，C-12），20.6（ CH₃， C-13）， 20.5 （ CH₃ ，C-13），20.4 （ CH₃ ，C-14），19.1 （ CH₃ C-14）， 18.7 （ CH₃ ，C-8，C-9），18.6 （ CH₃， C-8， C-9）， 18.5 （ CH₃. C-8，C-9），14.7 （ CH₃. C-3）。該化合物的數(shù)據(jù)與文 獻(xiàn)報道的一致[15]，故化合物3鑒定為enniatin J₁ 。

化合物4：白色無定型固體；ESI-MSm/z676.4 [M+Na]⁺ ，分子式 C₃₄H₅₉N₃O₉ ： ¹H NMR （400MHz CD₃OD） 二 δ_H5.22 （2H， m， _H-9×2 ），5.15 （1H，d， J=8.7Hz， H-2）， 5.05 （1H， d， J=8.2Hz ，H-9），4.98 （1H，d， J=9.6 Hz， H-14）， 4.74 （1H， d， J=9.7Hz ，H-14），3.25 （3H， s， 18-NCH）， 3.23 （3H， s， 18-NCH₃ ），3.17 （3H， s，7-NCH）， 2.12-2.34 （5H， m，H-10×3，H- 15×2 ），1.90 （1H，m，H-3a）， 1.69 （1H， m， H-3b）， 1.51 （1H， m， H-4）， 0.91-1.10 （30H， overlap，H-5，H-6，H-11×3，H-12×3，H-17×2，H-16×2）; ¹³C NMR （100 MHz， CD，OD）： δ_c 172.6 （C=O， C-10）， 172.5 （ C=O ，C-1），172.1 （C=O，C-10），172.0 （C=O，

C-8），172.0（C=O，C-8），171.6（ C=O. C-8），77.0 （CH， C-9）， 76.7 （CH， C-9）， 76.6 （CH， C-9）， 63.5 （CH，C-14）， 62.6 （CH，C-14）， 56.0 （CH，C-2）， 38.5 （ CH₂， C-3）， 33.0 （NCH，C-18），32.7 （NCH，C-18），32.3（ NCH₃ ，C-7）， 31.8 （CH， C-10）， 31.3 （CH，C-10）， 31.2 （CH， C-10）， 29.6 （CH， C-15），29.6 （CH， C-15）， 26.4 （CH， C-4）， 23.6 （ CH₃ ，C-5），21.2（ CH₃ ，C-6），20.7 （ CH₃ ，C-17）， 20.6 0 CH₃ ，C-17）， 20.5 （ CH₃ ，C-16），20.3 CH₃ ，C-16），19.3 （ CH₃， C-11），19.2（ CH₃ ，C-11），18.7 （ CH₃ ， C-11）， 18.7 0 CH₃， C-12），18.5 （ CH₃. C-12），18.3 （ CH₃ ，C-12）。該化 合物的數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道的一致[16]，故化合物4鑒定為 enniatin B₄ 。

化合物5：黃色油狀物；ESI-MSm/z314.1 [M+Na]⁺ ，分子式 C₁₆H₂₁NO₄ . ¹H NMR （400MHz CD₃OD = δ_H 7.20 （2H， d， _J=8.7Hz ，H-6，H-10），6.86 （2H， d， J=8.7Hz ，H-7，H-9），5.45（1H，t， J=6.6Hz H-12）， 4.51 （2H， d， J=6.7Hz ，H-11），3.93 （2H，s，H-2）， 3.71 （3H， s，H-1），3.50 （2H， s，H-4）， 1.78 （3H， s，H-14）， 1.74 （3H， s， H-15）； ¹³C NMR （ 100MHz CD₃OD） ） δ_c 175.1 （C，C-3），171.8（C，C-1），159.3 （C，C-8），138.5 （C，C-13），131.2 （CH，C-6，C-10），128.4 （C，C-5），121.3 （CH，C-12），115.9 （C，C-7，C-9），65.8（ CH₂， C-11）， 52.6 （ CH₃ ，C-1），42.6 （ CH₂ C-4），42.0 （ CH₂ C-2），25.9 0 CH₃ C-14），18.2（ CH₃ ，C-15）。該化合物的數(shù)據(jù)與文 獻(xiàn)報道的一致[17]，故化合物5鑒定為methylN-（{4-[（3- methylbut-2-en-1-yl）oxylphenyl}acetyl）glycinate。

化合物6：黃色油狀物；ESI-MS m/z 328.2 [M +Na]⁺ ，分子式 C₁₇H₂₃NO₄ ： ¹H NMR（ 400MHz CD₃OD ） δ_H7.09 （2H， d， J=8.7Hz ，H-4，H-4'），6.83 （2H， d， J=8.5Hz ，H-5，H-5'），5.44（1H，t， J=6.6Hz， H-8）， 5.20 （1H， s，H-1）， 4.49 （2H， d， J=6.3Hz ，H-7），3.68 （3H， s， 12-OMe）， 3.06 （1H， dd， J=14.0Hz ，5.0Hz，H-2a），2.88 （1H， dd， J=14.0Hz ， 6.0Hz H-2b），1.91 （3H， s，H-14）， 1.78 （3H， s，H-10），1.74 （3H， s， H-11）； ¹³C NMR（100 MHz， CD3OD）： δ_c 173.7 （C， C-12， C-13）， 159.3 （C， C-6）， 138.5（C，C-9），131.1 （CH，C-4，C-4），130.0 （C，C-3）， 121.3（CH， C-8），115.7 （CH，C-5，C-5），65.8（ CH₂， C-2）， 55.6 （CH， C-7）， 52.6 （CH，12-OMe）， 37.7 （ CH₂ C-1），

25.9 （ CH₃ ，C-10），22.2（ CH₃ ，C-14），18.2（ CH₃. C-11）。該化合物的數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道的一致[18]，故化合物6鑒定為N-Acetyl-O-（3-methyl-2-buten-1-yl）-L-tyrosinemethyl ester。

化合物7：無色油狀；ESI-MS m/z 214.1 [M+Na]⁺ ，分子式 C₁₁H₁₃NO₂ ¹H NMR （400MHz CD₃OD） 1 δ_H 8.51 （1H， d， J=2.1Hz ，H-6）， 8.06 （1H， d， J=8.0Hz ，H-3）， 7.85 （1H， dd， J=8.0Hz ， 2.2Hz ，H-4）， 5.84（1H，m，H-9），4.97-5.04 （2H，overlap，H-10），3.96 （3H， s，11-OMe），2.85（2H， t， J=7.4Hz ，H-7），2.43（2H， dd， J=14.8Hz 6.6Hz H-8）； ¹³C NMR （100MHz CD₃OD） 二 δ_c 166.6 （C， C-11）， 150.9 （CH， C-6）， 146.4 （C， C-2），143.5 （C， C-5），139.0 （CH，C-4）， 138.1 （CH， C-9）， 126.1 （CH，C-3），116.4（ CH₂. C-10），53.1 （ CH₃， 11- OMe）， 35.8 （ CH₂ C-8），33.2（ CH₂， C-7）。該化合物的 數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道的一致[19]，故化合物7鑒定為5-（3-丁 烯基）-2-吡啶甲酸甲酯。

化合物8：無色粉末；ESI-MS m/z 186.1 [M+Na]⁺ ，分子式 C₁₀H₁₃NO ： ¹H NMR （400MHz ， CD₃OD） 二 δ_H7.17-7.29 （5H， overlap，H-2，H-3，H-4，H-5， H-6），3.38 （2H，t， J=7.2Hz ，H-7），2.78（2H，t， J=7.5 Hz，H-8），1.90 （3H， s，H-10）； ¹³C NMR （100MHz CD₃OD） ： δ_c 173.3 （C， C-9），140.5 （C， C-1），129.8 （CH， C-3，C-5），129.5（CH，C-2，C-6），127.3 （CH，C-4），42.1 0 CH₂ ，C-7），36.5 （ CH₂， C-8），22.5（ CH₃ ，C-10）。該化 合物的數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道的一致[20]，故化合物8鑒定為 N. （2-Phenylethyl）acetamide。

化合物9：黃色油狀；ESI-MS m/z 225.1 [M+Na]⁺ ，分子式 C₁₂H₁₄N₂O ： ¹H NMR 400MHz 0 CD3OD）： δ_H 7.55 （1H， d， J=8.0Hz ，H-4）， 7.32 （1H，d， J=8.1Hz ，H-7），7.07 （2H，overlap，H-6，H-5），6.99（1H， overlap，H-2），3.46（2H，t， J=7.3Hz ，H-11），2.93（2H， t， J=7.3Hz ，H-10），1.91 （3H，s，H-14）； ¹³C NMR（100 MHz， CD₃OD; ） δ_c 173.3 （C， C-13）， 138.2 （C，C-8）， 128.8 （C，C-9），123.4 （C，C-7），122.3（CH，C-2），119.6 （CH，C-5）， 119.2 （CH， C-4），113.3 （C， C-3），112.2 （CH， C-7）， 41.6 （ CH₂， C-11）， 26.2 （ CH₂ C-10），22.6 CH₃， C-14）。該化合物的數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道的一致[21]，故化 合物9鑒定為 |N_b -acetyltryptamine。

2.1 腫瘤細(xì)胞毒活性測試結(jié)果

采用CCK-8法對化合物1＼～6進(jìn)行人肝癌細(xì)胞HepG2、人宮頸癌細(xì)胞Hela、人結(jié)腸癌細(xì)胞系HCT-116和人腎細(xì)胞L02體外細(xì)胞毒性試驗(yàn)（表2）。本試驗(yàn)以阿霉素和蘇尼替尼為陽性對照。化合物3對HepG2、Hela和HCT-116細(xì)胞都具有細(xì)胞毒活性，IC₅₀ 濃度值分別為8.35、11.63和 9.74μmol/L 。

3討論

真菌次級代謝產(chǎn)物作為天然藥物的重要來源，是新藥研發(fā)的重要途徑。鐮刀菌屬真菌分布廣泛，其次級代謝產(chǎn)物中存在大量結(jié)構(gòu)新穎且活性顯著的化合物。這些代謝產(chǎn)物不僅在抗腫瘤、抗菌和抗炎等多種疾病的治療中展現(xiàn)出巨大潛力[22-23]，還為藥物的結(jié)構(gòu)改進(jìn)和生物合成路徑研究提供了寶貴的天然模型和創(chuàng)新思路。

本研究對從落花生中分離的鐮刀菌F.oxysporumLHS-P1-3的大米發(fā)酵產(chǎn)物進(jìn)行分離，共獲得9個化合物，其中化合物1（stackylineEmethylester）為新化合物，化合物2＼～9為已知化合物。細(xì)胞毒活性結(jié)果顯示，化合物3（enniatin J₁） 對HepG2人肝癌細(xì)胞表現(xiàn)出顯著的細(xì)胞毒性作用， IC₅₀ 濃度值為 L，體外抑制活性優(yōu)于陽性對照阿霉素和蘇尼替尼（IC50濃度值分別為11.18和 16.66μmol/L ），且enniatinJ對人腎細(xì)胞L02的 IC₅₀ 濃度值為 35.36μmol/L ，其抑制較陽性對照阿霉素和蘇尼替尼 （IC₅₀ 濃度值分別為12.87和

17.34μmol/L 更加緩和，這表明enniatin J₁ 具有開發(fā)為抗腫瘤藥物的潛力。由此可見，鐮刀菌屬真菌的次級代謝產(chǎn)物在藥物開發(fā)中具有一定的潛力，它們不僅提供了具有新穎結(jié)構(gòu)的藥物先導(dǎo)分子，還為新藥研發(fā)提供了豐富的候選資源庫。

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