Cyfra21-1PIK3R1PD-L1表達(dá)水平變化 與口腔癌患者預(yù)后的相關(guān)性分析

中圖分類號(hào)：R739.8 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1673-260X（2025）08-0025-05

盡管手術(shù)、放療及化療等綜合治療策略已部分提升口腔癌患者生存率，但由于該病早期癥狀隱匿，多數(shù)患者確診時(shí)已進(jìn)展至晚期，致使整體預(yù)后欠佳12]。在此背景下，提升早期診斷能力并探索可靠的預(yù)后評(píng)估指標(biāo)，對(duì)優(yōu)化臨床治療決策具有重要價(jià)值。近年來，腫瘤分子標(biāo)志物的研究為預(yù)后評(píng)估開辟了新視角。細(xì)胞角蛋白19片段（Cyfra21-1）在肺癌、食管癌4中已被證實(shí)與腫瘤負(fù)荷及轉(zhuǎn)移潛能相關(guān)，然而關(guān)于其在口腔癌中的表達(dá)特征及其預(yù)后價(jià)值的爭(zhēng)議仍未解決。關(guān)鍵調(diào)控因子磷脂酰肌醇3激酶調(diào)節(jié)亞基1（PIK3R1）作為PI3K/AKT/mTOR通路的關(guān)鍵調(diào)控因子，可通過抑制PI3K活性調(diào)控細(xì)胞增殖與存活。雖然在乳腺癌結(jié)直腸癌中其低表達(dá)被證實(shí)與腫瘤進(jìn)展及不良預(yù)后相關(guān)，但該分子在口腔癌中的調(diào)控機(jī)制及臨床意義尚未闡明。此外，免疫檢查點(diǎn)分子（PD-L1）在腫瘤免疫逃逸中的核心作用備受關(guān)注，其高表達(dá)既可反映T細(xì)胞功能耗竭狀態(tài)，也可能預(yù)示免疫治療響應(yīng)[8?；诖?，本研究擬通過回顧性隊(duì)列分析，檢測(cè)口腔癌組織中Cyfra21-1、PIK3R1和PD-L1的表達(dá)水平，揭示三者與預(yù)后的相關(guān)性。

1資料與方法

1.1一般資料

本研究共納入83例口腔癌患者（口腔癌組）作為觀察對(duì)象，病例選取時(shí)間為2019年1月—2024年1月。年齡51～72歲，平均 （62.31±8.54） 歲。該方案通過安徽省第二人民醫(yī)院倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）符合《口腔頜面部惡性腫瘤治療指南》中口腔癌的臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)；（2）未接受術(shù)前放療或化療；（3）臨床病理及生存隨訪資料完整，且患者自愿簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）合并其他原發(fā)性或繼發(fā)性惡性腫瘤；（2）合并活動(dòng)性嚴(yán)重感染或傳染性疾病；（3）合并自身免疫性疾病或免疫功能異常；（4）合并嚴(yán)重精神障礙或無法配合治療及隨訪。

1.2 研究方法

患者入院時(shí)系統(tǒng)采集其性別、年齡、腫瘤位置、TNM臨床分期、組織分化程度及其淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)等基線信息并建檔。同時(shí)，于術(shù)前規(guī)范采集患者晨起空腹靜脈血樣本 5mL ，經(jīng) 3000rpm 離心15min后分離血清，分裝凍存于 -20^°C 低溫環(huán)境備用。血清腫瘤標(biāo)志物 Cyfra21-1 及PD-L1表達(dá)水平采用ELISA技術(shù)檢測(cè)，配套試劑均采購(gòu)自美國(guó)Ramp;Dsystems公司。針對(duì)外周血PIK3R1基因表達(dá)分析，通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)（引物序列：正向 5^°- GAAGCGAGATGGCACTTTTC- ?3^? ，反向 5^° -AGC-CATAGCCAGTTGCTGTT-3'）進(jìn)行檢測(cè)，以GAPDH作為內(nèi)參基因（引物序列：正向 5^° -GGTTGTCTC-CTGCGACTTCA-3'，反向5'-TGGTCCAGGGTTTCTTACTCC-3'），采用 2^-ΔΔa 法計(jì)算目標(biāo)基因相對(duì)表達(dá)量，所有引物均由生工生物工程（上海）股份有限公司合成制備。

本研究對(duì)納入患者進(jìn)行5年的生存隨訪，隨訪工作通過電話回訪與定期復(fù)診相結(jié)合的模式開展，隨訪周期設(shè)定為6～12個(gè)月。重點(diǎn)監(jiān)測(cè)患者腫瘤轉(zhuǎn)移進(jìn)展及生存狀態(tài)，每次隨訪均詳細(xì)記錄病灶轉(zhuǎn)移情況及生存質(zhì)量評(píng)估數(shù)據(jù)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用Stata13.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料以百分率 （% 呈現(xiàn)，組間比較采用 χ² 檢驗(yàn)；計(jì)量資料以（均值 ?^± 標(biāo)準(zhǔn)差）表示，組間對(duì)比采用 χ_t 檢驗(yàn)。運(yùn)用Kaplan-Meier法計(jì)算累積生存率，并通過Log-rank法進(jìn)行比較。采用Cox比例風(fēng)險(xiǎn)回歸進(jìn)行單因素及多因素分析，并通過繪制受試者工作特征曲線（ROC），確定切點(diǎn)值。 Plt;0.05 視為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1不同病理特征口腔癌患者血清Cyfra21-1、 PIK3R1、PD-L1水平對(duì)比

不同分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM分期口腔癌患者的血清Cyfra21-1、PIK3R1水平比較，（ Plt; 0.05）；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和Ⅲ Π～N 期口腔癌患者的PD-L1水平高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和 I～I(xiàn) 期患者 （ Plt; 0.05）。年齡、性別及腫瘤部位對(duì)三者水平的影響均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均 Pgt;0.05. ），詳見表1。

表1不同病理特征口腔癌患者血清Cyfra21-1、PIK3R1、PD-L1水平比較

2.2Cyfra21-1、PIK3R1、PD-L1表達(dá)水平與口腔癌患者預(yù)后的關(guān)系

5年隨訪期間，共有14例患者死亡，死亡率為16.87% 。根據(jù)ROC曲線分析結(jié)果，血清 Cyfra21-1 、PIK3R1、PD-L1水平診斷口腔癌的AUC分別為0.845（0.753～0.936）、0.828（0.736～0.92）和0.784（0.678～0.889），截?cái)嘀捣謩e為 5.54μg/L，0.66 和40.01ng/L， 。根據(jù)以上血清指標(biāo)截?cái)嘀颠M(jìn)行分組，分為高表達(dá)組和低表達(dá)組，并進(jìn)行Cox比例風(fēng)險(xiǎn)回歸分析。結(jié)果顯示，Cyfra21-1、PIK3R1及PD-L1的表達(dá)水平與口腔癌患者預(yù)后顯著相關(guān)， Cyfra21-1 高表達(dá)組的5年存活率顯著低于低表達(dá)組，PIK3R1低表達(dá)患者的死亡風(fēng)險(xiǎn)顯著升高，PD-L1高表達(dá)組的生存率更低，見圖1與表2。

圖1血清Cyfra21-1、PIK3R1、PD-L1水平診斷口腔癌的ROC曲線圖

表2Cox比例風(fēng)險(xiǎn)回歸結(jié)果

2.3Cyfra21-1、PIK3R1、PD-L1水平與腫瘤分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的分層分析

分層分析結(jié)果顯示， Cyfra21-1 的高表達(dá)在晚期（Ⅱ～期）和存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者中風(fēng)險(xiǎn)顯著升高，PIK3R1的低表達(dá)則在早期（I～Ⅱ期）和轉(zhuǎn)移患者中表現(xiàn)出更高的風(fēng)險(xiǎn)；PD-L1的高表達(dá)在所有亞組（包括不同分期及轉(zhuǎn)移狀態(tài)）中均與不良預(yù)后強(qiáng)相關(guān) （Plt;0.05） 。見表3。

醫(yī)學(xué)

3討論

口腔癌是全球范圍內(nèi)常見的惡性腫瘤之一，每年新發(fā)病例約45萬，死亡病例約22.5萬，位居人類癌癥譜的第六位[0]。不同地區(qū)的人群，口腔癌的發(fā)病情況存在顯著差異，在印度，口腔癌長(zhǎng)期占據(jù)男性癌癥發(fā)病首位[1]，而我國(guó)臺(tái)灣地區(qū)因檳榔咀嚼習(xí)俗的流行，導(dǎo)致口腔癌發(fā)病率曾居全球之首[13]。目前，手術(shù)切除仍是口腔癌的主要治療手段，早期患者（如T1-2N0M0）通過根治性手術(shù)5年生存率超過 80% 。然而，高風(fēng)險(xiǎn)人群（如HPV陰性、低分化）及晚期患者的術(shù)后生存率仍不足 40%^[14] 。因此，尋找簡(jiǎn)便的診斷指標(biāo)以預(yù)測(cè)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及預(yù)后情況，并據(jù)此制定個(gè)體化治療方案，對(duì)于改善患者生存結(jié)局至關(guān)重要。

本研究發(fā)現(xiàn)口腔癌組血清Cyfra21-1水平顯著高于健康組，且其高表達(dá)與低分化、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及晚期分期密切相關(guān)。這與既往關(guān)于Cyfra21-1在肺癌食管癌中作為上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）標(biāo)志物的研究一致。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，Cyfra21-1的高表達(dá)在晚期（Ⅱ～N期）和轉(zhuǎn)移患者中風(fēng)險(xiǎn)顯著升高（ OR=1.61 和1.47）。其作用機(jī)制可能具有雙重性，一方面， Cyfra21-1 水平升高直接反映腫瘤負(fù)荷的增加，尤其在晚期患者中，其釋放量與腫瘤細(xì)胞壞死或凋亡導(dǎo)致的角蛋白碎片釋放密切相關(guān)。另一方面，Cyfra21-1可能通過激活整合素-β1/FAK信號(hào)通路促進(jìn)循環(huán)腫瘤細(xì)胞的黏附與外滲，從而驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)移微環(huán)境的形成。這些證據(jù)表明， Cyfra21-1 不僅是腫瘤侵襲性的生物標(biāo)志物，更是轉(zhuǎn)移級(jí)聯(lián)反應(yīng)的重要調(diào)控因子，動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)其表達(dá)水平對(duì)評(píng)估抗血管生成療效具有潛在指導(dǎo)意義。

PIK3R1作為一種腫瘤抑制因子，已被證實(shí)在胃腸道腫瘤中通過調(diào)控PI3K/AKT通路抑制惡性進(jìn)展。有研究指出[1，PIK3R1在癌癥患者中血清呈低表達(dá)，且其表達(dá)水平與TNM分期、組織分化等級(jí)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)等關(guān)鍵臨床病理參數(shù)及生存結(jié)局顯著相關(guān)，可作為評(píng)估口腔鱗癌疾病進(jìn)展和預(yù)后的聯(lián)合生物標(biāo)志物。本研究中，口腔癌組PIK3R1表達(dá)量顯著低于健康對(duì)照，且低表達(dá)患者死亡風(fēng)險(xiǎn)增加2.24倍（ （0R=2.24，95%CI：1.57～3.06） ，這與既往研究結(jié)論大致相符。PIK3R1作為PI3K調(diào)節(jié)亞基，其缺失可能導(dǎo)致 p85-p110 復(fù)合體穩(wěn)定性下降，進(jìn)而解除對(duì)PI3K催化亞基的抑制作用，激活A(yù)KT/mTOR信號(hào)軸。此外，本研究發(fā)現(xiàn)PIK3R1低表達(dá)在早期（I～Ⅱ期）表現(xiàn)出高風(fēng)險(xiǎn)（ OR=4.42 ，提示其在腫瘤起始階段具有驅(qū)動(dòng)作用。且轉(zhuǎn)移患者中PIK3R1低表達(dá)風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)一步升高 ?OR=5.24 ），這可能與PI3K/AKT通路促進(jìn)EMT及循環(huán)腫瘤細(xì)胞存活相關(guān)。

PD-L1作為免疫檢查點(diǎn)分子，廣泛表達(dá)于活化B細(xì)胞、T細(xì)胞及腫瘤細(xì)胞表面，PD-L1通過多種機(jī)制介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞逃避免疫監(jiān)視，促進(jìn)其在體內(nèi)的存活與增殖，進(jìn)而成為影響患者預(yù)后的關(guān)鍵因素。本研究中，口腔癌組PD-L1水平顯著高于健康對(duì)照，且其高表達(dá)在所有臨床亞組（包括不同分期及轉(zhuǎn)移狀態(tài)）中均與不良預(yù)后強(qiáng)相關(guān)，轉(zhuǎn)移患者風(fēng)險(xiǎn)比達(dá)3.19（ 95%CI：2.03～5.17? 。從機(jī)制層面進(jìn)行分析，PD-L1通過與T細(xì)胞表面PD-1結(jié)合，觸發(fā)免疫突觸內(nèi)SHP-2磷酸酶活化，導(dǎo)致TCR信號(hào)通路關(guān)鍵分子去磷酸化，最終誘導(dǎo) CD8+T 細(xì)胞功能衰退，影響機(jī)體免疫功能，不利于預(yù)后。

4結(jié)語(yǔ)

Cyfra21-1、PIK3R1PD-L1的表達(dá)水平與口腔癌的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后密切相關(guān)。這些標(biāo)志物不僅可以作為口腔癌早期診斷的輔助工具，還可以用于預(yù)后評(píng)估，為臨床治療決策提供重要依據(jù)

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