群體感應調控基因對溶藻弧菌生物學表型影響的研究

中圖分類號：R979.1 文獻標識碼：A 文章編號：1001-8751（2025）04-0226-08

Study on the Effect of Quorum Sensing Regulatory Genes on the Biological Phenotype ofVibrio alginolyticus

（1 MOEKeyLaboratoryofi-ntellgentMaufacturing，cholofioenginering，DaliaUniversityofTcnlogyDalia604; 2 Departmentof Animal Husbandryand VeterinaryMedicine，Liaoning Agricultural Technical College，Yingkou）

Abstract： ObjectiveVibrio alginolyticus is a conditional pathogen widely distributed in the marine environment，and its high pathogenicity poses a serious threat to the aquaculture industry. The purpose of this study was to investigate the regulation of the quorum sensing （QS）system on the biological phenotype of Vibrio alginolyticus ZVA. MethodsThe QS regulatory gene mutants △hapR and △luxO were constructed by homologous recombination technology.The significance of the QS system inthe biologicalphenotypic regulation network of Vibrio alginolyticus wasclarifed by examining the traits ofcolonymorphology，growth curve，biofilm formation，motility and phage plaque production rate. ResultsUnder high bacterial density circumstances， the QS system significantly reduced Vibrioalginolyticus'sswimming and swarming motilityand variablycontrolled its phage sensitivitybut it had no discernible impact on the production of biofilms Conclusion The QS system profoundly affects the ecologicaladaptabilityandpotential pathogenicityof Vibrioalginolyticus byregulatingbacterial motilityand phage sensitivity.Theresults of thisstudy provide anew theoretical basis for the preventionand control strategiesof Vibrio alginolyticus.

Key Words： Vibrio alginolyticus; quorum sensing; hapR gene; luxO gene； bacteriophage

弧菌屬是水產養殖環境中廣泛存在的高致病性細菌類群，其中，溶藻弧菌（Vibrioalginolyticus）因分布廣泛、致病性高和定植能力強，在海洋類弧菌中占據重要地位。該菌常見于海洋和江河入海口水域，不僅會引發魚類、蝦類和貝類等海洋生物感染性疾病，造成水產養殖業的經濟損失[，還能通過食物鏈傳播，導致胃腸炎和敗血癥等食源性疾病，威脅人類健康。作為典型的條件致病菌，溶藻弧菌擁有外毒素、內毒素和胞外蛋白酶等多種毒力因子[2]，其產生受到多維度調控網絡的精密控制。群體感應（Quorumsensing，QS）作為核心調控機制，通過自誘導劑（Autoinducers，AIs）的濃度梯度變化，實現細菌群體行為的協同調控。這種依賴細菌密度的通訊機制，在細菌生物膜形成、毒力基因表達以及環境適應性進化中發揮關鍵作用[3]。

溶藻弧菌的群體感應系統與哈維氏弧菌群體感應系統極為相似，有三套平行的信號通路，涉及三種信號分子即AI-1、AI-2和CAI-1。這些信號分子分別由群體感應信號合成酶LuxM、LuxS和CqsA合成[4]。在溶藻弧菌中，存在三種同源的膜結合受體，分別為LuxN、LuxPQ和CqsS，它們各自特異性地與特定自誘導物（AI-1、AI-2和CAI-1）結合。這些受體一旦與相應自誘導物結合，便會啟動信號級聯反應，最終促使關鍵轉錄因子HapR的表達。HapR能夠以密度依賴的方式對群體感應基因進行調節。當細胞密度處于較低水平時，LuxO處于活性狀態并抑制hapR的表達；而當細胞密度升高，LuxO會通過去磷酸化作用而失活，進而解除對hapR表達的抑制，激活hapR的表達。此時，作為全局轉錄調節因子的HapR就能夠發揮作用，控制相關基因表達。值得注意的是，如果LuxO失活，HapR則在所有細胞密度下都會完全表達，從而導致鎖定的高細胞密度表型。反之，若HapR失活，它便會喪失調節群體感應相關表型的能力，進而導致鎖定的低細胞密度表型。

本研究以溶藻弧菌ZVA為研究對象，通過構建群體感應調控基因缺失株（△hapR和△luxO），分別模擬細菌處于低密度和高密度狀態，以此深入探討群體感應系統對溶藻弧菌生物學功能的影響。通過考察溶藻弧菌野生株ZVA及缺失株△hapR和△luxO的生長速率、運動性、生物被膜形成能力及噬菌體成斑率，旨在闡明群體感應調控基因對溶藻弧菌生物學功能的潛在調控機制，為海水養殖業中溶藻弧菌引起的病害防治提供理論依據。

1材料與方法

1.1菌株、質粒及噬菌體

溶藻弧菌ZVA（GenBank登錄號：GCA_030252615.1）[5]，與其裂解性噬菌體ΦBX-1、ΦL1和ΦH2均由本實驗室保存。質粒pDM4，感受態細胞S17-1以及噬菌體ΦKVP40由復旦大學上海市公共衛生臨床中心友情提供。

1.2主要試劑及培養基

蛋白陳、酵母提取物、瓊脂粉和哥倫比亞血瓊脂基礎均購自美國BD公司（Becton，DickinsonandCompany）；氯化鈉、硫代硫酸鈉五水、氯霉素溶液、 2× SanTaqPCRMix、 50× TAEbuffer、DNA分子量標準Marker、瓊脂糖和結晶紫均購自生工生物工程（上海）股份有限公司；乙醇購自上海阿拉丁生化科技股份有限公司；碘化鉀購自南通飛宇生物科技有限公司；蔗糖購自德國默克公司；PCR產物純化試劑盒和質粒小提試劑盒購自賽默飛公司。

LB液體培養基： 10g/L 氯化鈉、 10g/L 蛋白脈和5g/L 酵母粉；LB固體培養基： 10g/L 氯化鈉、 10g/ L蛋白脈、 5g/L 酵母粉和 10g/L 瓊脂粉；高鹽LB液體培養基： 20g/L 氯化鈉、 10g/L 蛋白脈和 5g/L 酵母粉；高鹽LB固體培養基： 20g/L 氯化鈉、 10g/L 蛋白陳、 5g/L 酵母粉和 10g/L 瓊脂粉； 10% 蔗糖固體培養基： 5g/L 蛋白陳、 5g/L 氯化鈉、 1g/L 酵母粉、 15g/Σ L瓊脂粉和 100g/L 蔗糖；Tci固體培養基： 5g/L 硫代硫酸鈉五水、 39g/L 哥倫比亞血瓊脂、 46g/L 碘化鉀和 15g/L 氯化鈉。

1.3溶藻弧菌ZVA的群體感應調控基因缺失株的構建

（1）引物設計：借助CLCMainWorkbench軟件以及http：//www.bioinformatics.org/網站，設計用于擴增基因hapR和luxO上下游同源區域（長度約 600bp 的引物，同時設計質粒pDM4線性化片段擴增引物，引物序列詳見表1。

（2）酶切與連接：采用限制性內切酶XbaI和XhoI對純化后的上下游同源臂片段和質粒pDM4進行雙酶切，獲得線性化載體。隨后利用T4DNA連接酶，將目的片段按正確方向與pDM4載體進行重組片段的連接。

表1缺失突變株構建用引物

（3）轉化與驗證：把連接產物轉化至大腸埃希菌感受態細胞S17-1中，將菌液涂布在含有 25ng/μL 氯霉素的LB平板上， 37°C 培養過夜。挑取過夜生長的單克隆菌落進行PCR驗證，將疑似陽性的單克隆PCR產物送往生工生物工程（上海）有限公司測序。

（4）細菌結合與篩選：成功構建的重組質粒與野生株ZVA進行細菌接合，在添加 5ng/μL 氯霉素的Tci平板上篩選缺失突變株。挑取純化后的單克隆搖菌，待菌液渾濁后在 10% 蔗糖板上劃線作反向篩選。室溫下培養 48h ，挑選若干單克隆，分別在含氯霉素的LB平板和普通LB平板上劃線篩選，最終挑選對氯霉素無抗性的單克隆進行PCR檢測，并將PCR產物送生工生物工程（上海）有限公司測序，最后成功獲得ZVA的△hapR和△luxO突變株。

1.4細菌菌落形態觀察

將野生株ZVA，△hapR和△luxO突變株分別接種至高鹽LB液體培養基， 37°220r/min 搖床過夜培養。次日按 1：1 000 比例稀釋至新鮮高鹽LB液體培養基，搖床培養至吸光度 （OD₆₀₀）=1.0 ，取 2μL 菌液接種于 1.5% 高鹽LB固體培養基表面， 37°C 培養12h后觀

察菌落形態。

1.5 細菌生長曲線測定

將野生株ZVA，△hapR和△luxO突變株分別接種至高鹽LB液體培養基，搖床過夜培養。次日將菌株按照1：1000比例稀釋至新鮮的高鹽LB液體培養基中，繼續在搖床中培養，每隔2h取樣一次，使用分光光度計測定 OD₆₀₀ ，共測定 8h ，繪制細菌的生長曲線。

1.6生物被膜形成能力檢測

將野生株ZVA，△hapR和△luxO突變株分別接種至高鹽LB液體培養基搖床過夜培養。次日按1：1000比例稀釋至新鮮高鹽LB液體培養基中，于 37° 培養箱中靜置培養 7d ，以促進生物被膜的形成。培養結束棄菌液上清，加入 4mL0.4% 結晶紫溶液染色15min，流水輕柔沖洗3次，再加入 4mL 75% 乙醇渦旋震蕩使結晶紫充分溶解，最后用分光光度計測定600nm波長處 OD₆₀₀ ，以檢測生物被膜形成能力。

1.7細菌運動性能力測定

溶藻弧菌的運動性表現為三種典型形式：游泳、群集及蹭行。本研究針對這三種運動模式，系統開展野生株ZVA，△hapR和△luxO突變株運動能力比較分析。實驗前采用分光光度計將各菌株菌液濃度統一調整至 OD₆₀₀=1.0 ，確保初始接種量的均一性。

游泳運動：使用滅菌牙簽沾取菌液，垂直接種于 0.5% 高鹽LB半固體培養基的中層區域（距培養皿底部約 2mm ）。接種后保持培養皿水平靜置，室溫培養24h 。通過觀察接種點周圍形成的渾濁擴散區，使用ImageJ圖像分析軟件測量擴散區域面積[。

群集運動：取 2μL 菌液接種于 0.5% 高鹽LB半固體培養基表面中心點，室溫培養 24h 。使用ImageJ圖像分析軟件測量擴散區域面積[7]。

蹭行運動：使用 10μL 槍頭垂直穿透 1.5% 高鹽LB固體培養基至培養皿底部，隨后將 2μL 菌液緩慢接種于穿透的孔中，待完全滲透后，將培養Ⅲ倒置，室溫培養 48h 。沿血壁小心剝離瓊脂層，加入 4mL 0.4% 結晶紫溶液染色 15min ，流水輕柔沖洗3次，使用ImageJ軟件測量染色區域面積[8]。

1.8噬菌體成斑率測定

為探究群體感應系統在噬菌體-細菌互作中的調控作用，本研究采用雙層平板法測定野生株ZVA，△hapR和△luxO突變株對4種裂解性噬菌體（ΦBX-1，ΦKVP40 ， ΦL1 ， ΦH2 的成斑率。將噬菌體裂解液用緩沖液梯度稀釋 （10⁰～10^-6） 后，與對數生長期 （OD₆₀₀ =1.0 的各菌液 （200μL） 混合于 4mL0.5% LB高鹽半固體培養基，傾注于 1.5% 高鹽LB固體平板。待凝固后點滴 2μL 噬菌體裂解液， 37°C 倒置培養過夜，通過噬菌斑計數計算噬菌體效價（PFU/mL）[9]。

1.9 統計學分析

本研究所有實驗均設置3次獨立生物學重復，實驗數據采用GraphPadPrism9.0軟件（https：//www.graphpad.com/）進行統計分析和圖表生成。所有數據均以均數 ± 標準差表示。兩組間比較采用Student'st檢驗，多組間比較采用單因素方差分析。統計顯著性水平定義為*： Plt;0.05 ， ^** ： Plt;0.01 ，***： P lt;0.001 ，****： Plt;0.0001 ；NS表示組間差異無統計學意義。

2結果

2.1溶藻弧菌ZVA群體感應調控基因缺失株△hapR 和△luxO的構建

本實驗采用同源重組技術構建了溶藻弧菌ZVA的群體感應調控基因缺失株△hapR和△luxO。為驗證突變株是否構建成功，在hapR和luxO基因的上下游區域（hapR基因上游： 500bp ，下游 512bp ；luxO基因上游： 595bp ，下游 529bp 設計特異性引物hapR驗證和luxO驗證，對突變株進行PCR擴增及電泳檢測。如圖1所示（瓊脂糖凝膠圖譜），成功獲得缺失hapR基因的突變株，PCR檢測片段大小為 1 012bp 野生株為1627bp（hapR序列長度為 615bp ；成功獲得缺失luxO基因的突變株，PCR檢測片段大小為1124bp ，野生株為2531bp（luxO序列長度為1407bp）。該電泳條帶與理論預期完全相符，初步驗證了突變株構建的正確性。為了進一步確證，符合理論條帶大小的PCR產物經生工生物工程（上海）有限公司測序，結果表明，hapR和luxO基因已成功從溶藻弧菌ZVA基因組中缺失。

2.2缺失株△hapR和△luxO生物學特性的鑒定

2.2.1 菌落形態

M：DNAMarkerDL2000；1：野生型菌株ZVA的hapR電泳條帶；2：4hapR基因缺失株的hapR電泳條帶；3：野生型菌株ZVA的luxO電泳條帶；4：4luxO基因缺失株的luxO電泳條帶。

圖1hapR和luxO基因的PCR條帶

圖2展示了溶藻弧菌ZVA及其群體感應調控基因缺失株△hapR和△luxO在 1.5% 高鹽LB固體培養基平板上菌落形態特征。觀察結果表明，野生株ZVA與及其缺失株△hapR和△luxO的菌落均呈淡黃色，形態為圓形凸起，表面光滑且不透明。然而，與野生株相比，缺失株△hapR的菌落周圍表現出明顯的散射狀特征，這一現象可能與hapR基因缺失導致的群體感應調控功能改變有關。該結果表明，群體感應調控基因可能影響菌落的形成與外觀，且以hapR基因的影響最為顯著。

2.2.2 生長曲線

溶藻弧菌ZVA及群體感應調控基因缺失株的生長曲線如圖3所示。實驗采用單因素方差分析進行統計學分析，野生株ZVA與△hapR和△luxO表現出相似的生長動力學特征，在8h的培養周期內，相較于野生株ZVA，△hapR和△luxO的生長速率在潛伏期、對數期以及平臺期并無顯著性差異 （Pgt;0.05 ，NS），這說明hapR和luxO介導的群體感應通路可能不構成溶藻弧菌基礎生長調控的必要因素。研究表明，luxO是群體感應系統中的關鍵調控基因，通常通過調控下游靶基因hapR的表達來影響細菌的群體行為。在野生型菌株中，luxO通過磷酸化級聯反應抑制hapR的表達，從而間接調控多種生物學過程。luxO基因缺失后，hapR的表達可能被解除抑制，導致與生長、代謝相關的基因表達發生變化，從而影響細菌的生長速率[10-1]。然而，缺失株△hapR和△luxO的生長曲線結果顯示，其生長速率未表現出顯著變化，因此推測LuxO-HapR信號通路可能主要參與溶藻弧菌特定生理過程的調控（如毒力因子產生和生物膜形成等），而非基礎生長代謝。

圖3溶藻弧菌ZVA及其QS調控基因缺失株（△hapR和△luxO）生長曲線

2.2.3生物被膜形成能力

生物被膜的形成是細菌適應環境的重要策略，通常受多種因素調控，包括群體感應系統、環境信號以及細菌自身的代謝狀態[12]。為探究群體感應對溶藻弧菌ZVA生物被膜形成能力的影響，本實驗采用結晶紫染色法測定溶藻弧菌ZVA及其群體感應調控基因缺失株（△hapR和△luxO）的生物被膜形成能力。本實驗采用t檢驗進行統計學分析。結果如圖4所示，通過對野生株ZVA與缺失株△hapR和△luxO的生物被膜形成量進行比較分析，發現△hapR和△luxO突變株形成的生物被膜量與野生株相比無顯著性差異 （Pgt;0.05 ，NS）。這一結果表明，hapR和luxO基因的缺失對溶藻弧菌ZVA的生物被膜形成能力未產生顯著影響，群體感應系統在溶藻弧菌ZVA的生物被膜形成過程中可能未發揮關鍵調控作用。

2.2.4運動能力

圖5展示了溶藻弧菌ZVA及其群體感應調控基因缺失株的細菌運動能力。本實驗采用t檢驗進行統計學分析。結果表明，與野生株ZVA相比，△hapR和△luxO突變株在游泳運動和群集運動能力方面存在顯著性差異。具體而言，luxO基因的缺失可能導致細菌的游泳運動和群集運動能力顯著減弱 （P=0.0002 Plt;0.001 ， ??? ），而hapR基因的缺失對游泳運動能力的影響較弱 _P=0.0137 ， Plt;0.05 ，*），對群集運動能力的影響則不顯著 （Pgt;0.05 ，NS）。此外，hapR或 luxO 的基因缺失，對蹭行運動能力均無顯著性差異 Pgt;0.05 ，NS）。這些結果提示，溶藻弧菌ZVA的群體感應系統顯著抑制了細菌的游泳和群集運動能力，但對蹭行運動能力未產生明顯影響。這一發現揭示了群體感應系統通過調控運動相關基因的表達，在溶藻弧菌ZVA運動行為中發揮關鍵作用。該結果為深入探究群體感應系統調控細菌運動性的分子機制提供了重要線索。

圖4溶藻弧菌ZVA及其QS調控基因缺失株的生物被膜形成能大

圖5溶藻弧菌ZVA及其QS調控基因缺失株（△hapR和△luxO）的運動性能力

注解：t檢驗；ns：不顯著。注解：t檢驗，*： Plt;0.05 ； ??? ： Plt;0.001 ；ns：不顯著。

2.2.5 噬菌體成斑率

噬菌體KVP40是以副溶血性弧菌為宿主，最初從日本海水中分離得到[13]；溶藻弧菌噬菌體ΦBX-1是由上海某超市篩選得到的一株裂解性噬菌體，經透射電鏡觀察，其為一株肌尾噬菌體[14]；兩株溶藻弧菌噬菌體ΦL1和ΦH2均從某水產品市場取得的污水和海水水樣中分離純化得到。其中， ΦL1 屬于長尾噬菌體， ΦH2 屬于肌尾噬菌體[15]。

如圖6所示，四株噬菌體（ΦBX-1、ΦKVP40、ΦL1和ΦH2）均能夠裂解溶藻弧菌ZVA。然而，與野生株相比，luxO基因的缺失（即模擬細菌高密度狀態）顯著改變了細菌對噬菌體的敏感性。具體而言，luxO基因缺失株對ΦBX-1的敏感性顯著增強，說明群體感應系統能夠促進ΦBX-1的裂解；而對ΦKVP40的敏感性顯著減弱，即群體感應對KVP40的裂解作用具有抑制作用。相比之下，ΦL1和ΦH2對野生株ZVA及其群體感應調控基因缺失株的裂解能力無顯著性差異。這些結果表明，群體感應系統可能通過調控細菌表面受體的表達或修飾，影響噬菌體的吸附和侵染效率，從而在噬菌體-細菌互作中發揮重要作用，這一發現也為進一步研究噬菌體-細菌相互作用的分子機制提供了新的視角。

圖6溶藻弧菌ZVA及其QS調控基因缺失株（△hapR和△luxO）對噬菌體敏感性能力測定

3討論

群體感應是溶藻弧菌中一種關鍵的信號轉導機制，通過調節環二鳥苷單磷酸c-di-GMP的合成與降解，以及抑制特定基因的表達來調控細菌的生理和病理過程。在調控蛋白中，LuxO被認為是低細胞密度的主要調控蛋白，是NtrC的同源物。NtrC是一種雙組分響應調節器，屬于一個不斷進化的蛋白質家族，它與備選sigma因子o54一起觸發基因轉錄[16]。而LuxO通常通過調節HapR功能，在低細胞密度下控制機體的生理和發病機制。

生物被膜是溶藻弧菌的關鍵毒力因子之一，能夠協助細菌抵抗環境脅迫，為獲取營養提供途徑[17]。生物被膜的形成是一個復雜的過程，需要協調多種調控網絡，包括群體感應、第二信使、sRNA和轉錄因子等[18]。其中，c-di-GMP是細菌的二級信使，控制著多種細菌行為，尤其在細菌的生物被膜形成和致病因子產生方面起到至關重要的調節作用。研究發現，在副溶血弧菌中，同源受體合成酶LuxM和LuxS均參與了細菌生長早期對環境條件的適應，并負責調控生物被膜的形成[19]。在霍亂弧菌中，群體感應通過調節細菌的c-di-GMP濃度，抑制生物被膜轉錄激活因子VpsT，進而控制生物被膜的形成[20]。此外，已發現了一種新的細菌胞外囊泡（Bacterialextracellularvesicles，BEV）相關蛋白ObfA，它可以調節中央細胞質轉錄調節因子HapR的活性，從而影響生物被膜的形成和定植適應性[21]。盡管群體感應會參與多種細菌生物被膜的形成，但本實驗結果表明，在溶藻弧菌ZVA中，hapR和luxO基因的缺失并未顯著改變其生物被膜的形成能力。這表明，溶藻弧菌ZVA的生物被膜形成可能依賴于其他調控機制，而非群體感應系統。作為一種廣泛分布于水生環境的病原菌，溶藻弧菌可能進化出多種獨立的調控途徑以適應復雜的環境壓力，這一發現也與溶藻弧菌ZVA的生物學特性相符。因此，群體感應可能在生物被膜形成中不是唯一的調控機制，其作用可能被其他調控機制所替代或補償。為進一步驗證這一結論，后續研究可結合轉錄組學或蛋白質組學技術，分析突變株△hapR和△luxO在生物被膜形成過程中相關基因的表達變化，以揭示潛在的替代調控途徑。

細菌運動性通常是致病菌的關鍵毒力因素之一。溶藻弧菌的運動性包括游泳運動、群集運動和蹭行運動等，盡管已知細菌運動的形式多種多樣，但鞭毛在其中起關鍵作用，尤其是極生鞭毛與游泳運動相關，可以推動副溶血弧菌在液體介質中運動；而側生鞭毛則與群集運動相關，可以使弧菌在固體介質中運動[22]。另外，大腸埃希菌、腸沙門氏菌和霍亂弧菌所具有的細胞外鞭毛的旋轉可以通過與液體的相互作用來推動細菌[23]。群體感應是調節細菌運動性的重要機制之一[24]。Lu等[25]發現，在高細胞密度下，副溶血性弧菌群體感應調節因子OpaR對細菌游泳運動的極性鞭毛基因Pof的轉錄具有負調控作用。此外，LuxO可能通過調節c-di-GMP水平來調節群集運動能力laf基因的表達[26]。Zhou等[27]發現，包含GGDEF結構域的蛋白VPA0198，受群體感應主調控因子AphA和OpaR以及全局調控因子AraC型蛋白QsvR的共同調控，可以促進細胞內c-di-GMP的合成和生物被膜的形成，同時抑制副溶血性弧菌的游泳運動和群集運動。本研究中，溶藻弧菌ZVA的群體感應系統抑制細菌的游泳和群集運動能力，但對蹭行運動能力無顯著影響。這一發現表明，群體感應系統在溶藻弧菌ZVA中可能通過調控與運動性相關基因的表達，發揮關鍵作用。luxO的缺失可能導致下游運動相關基因（如鞭毛合成或群集運動相關基因）的表達發生改變，從而削弱細菌的游泳和群集運動能力。然而，蹭行運動的獨立性可能暗示其受不同的調控機制控制，與群體感應系統的關聯較弱。后續研究可通過轉錄組學或基因功能分析，深入探討群體感應系統調控運動性相關基因的具體途徑及其生物學意義。

噬菌體是一種能夠裂解細菌的病毒，在細菌與噬菌體的長期進化中，群體感應發揮了重要的作用[28]。例如，細菌與噬菌體之間存在廣泛的水平基因轉移[29]，Hargreaves等[30]的研究發現，噬菌體phiCDHM1的基因組中包含與艱難梭菌（Clostridiumdifficile）相關的3段同源片段，這些片段編碼涉及群落感應系統的agr基因。這一發現表明，噬菌體能夠通過攜帶并整合群體感應基因，進而改變宿主細菌的生理特性或行為。Li等[31研究指出，在溶藻弧菌中，群體感應通過上調基因ugd的表達，促進了噬菌體受體莢膜多糖（Capsularpolysaccharide，CPS）的合成，從而提高了噬菌體的吸附和感染效率。在本研究中，溶藻弧菌ZVA對ΦBX-1和ΦKVP40噬菌體表現出一定的抵抗能力。后續將根據噬菌體的生命周期進行驗證，并通過全基因組分析，篩選溶藻弧菌ZVA中潛在抗噬菌體基因，進一步探究噬菌體與細菌的相互作用機制。

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