關鍵詞 細辛 道地藥材 方法論 GAP
道地藥材系統研究的方法學探討
本草考證與現狀調查:通過本草考證,確定所研究藥材的主流品種和產地、藥用部位以及用量的歷史沿革;通過文獻檢索,掌握該種藥材多學科研究的現狀;通過市場調查與追蹤,掌握該種藥材的商品主流品種、非主流品種、代用品及偽品概況;通過實地調查、文獻及標本的查閱,掌握藥材原植物資源及藥材栽培生產狀況。
全方位、多層次的遺傳學研究所謂全方位,是指對主流品種與非主流品種、正品與非正品、道地產地與非道地產地所產藥材原植物均進行遺傳學分析;所謂多層次,是指運用細胞學、酶化學以及DNA指紋圖譜技術等不同層次的手段進行研究。
建立道地藥材的鑒別與質量評價體系:即通過對道地藥材和非道地藥材的多學科比較研究,建立量化和系統化的多元鑒別與質量評價體系;并找出該藥材的最佳品種和產地或不同品種的特點。
影響藥材質量的多因子綜合分析即運用相關與回歸、模糊集合論等現代科學觀,借助計算機等現代科技手段,對影響藥材質量的遺傳因子、生態、地理因子與人文因子進行綜合分析,力求找出該道地藥材的形成模式及最優品種、生境和采收加工方法。
細辛道地藥材的系統研究與細辛藥材的GAP生產 :在上述道地藥材系統研究方法的指導下,在多年實地調查的基礎上,我們采用本草學、植物學、孢粉學、細胞學、中藥化學、分析化學、酶化學、藥效學、微生態學及DNA指紋圖譜技術等學科的方法對細辛道地藥材進行了較為系統的研究,得出了如下與細辛藥材GAP生產有關的結論。
細辛道地藥材的形成模式:甄別道地藥材的形成模式,尋找主導因子是進一步弘揚道地藥材優勢,發展道地藥材生產的前提和關鍵。肖氏認為,道地藥材的形成模式有生境主導型、種質主導型、技術主導型、傳媒主導型以及多因子關聯決定型。我們經過大量的實驗分析發現,細辛道地藥材的形成與種質、生態-地理條件、合理的田間管理和采收加工等多種因子有關,其中種質是主導因子。即細辛道地藥材的形成模式是以種質為主導的多因子關聯決定型。
細辛道地藥材GAP生產基地所用優良種質和地點的優選:既然種質是決定細辛道地藥材質量的主導因子,則優良種質的篩選就是搞好細辛GAP栽培、發展細辛道地藥材生產最關鍵的因素。經過系統的實驗研究和產地考查,我們認為,將細辛道地藥材的生產基地建在東北地區,主要栽培用種選用遼細辛比較合適。原因如下:①從主要有效成分揮發油的含量來看,遼細辛的揮發油含量較華細辛高;揮發油中有致癌活性的黃樟醚含量,遼細辛較華細辛低;急性毒性遼細辛較華細辛小。從安全性和有效性來看,遼細辛優于華細辛;②遼細辛的野生資源保護較好,可以保證生產的可持續發展;③遼細辛的植株較華細辛粗壯、產量高、抗逆性強;④東北地區自70年代末即開始大規模栽培細辛,藥農栽培細辛的經驗豐富;⑤遼細辛的栽培技術研究較多,現已有較成熟的栽培加工技術;⑥東北地區氣候較寒冷,病蟲害較少,可以少施或不施用農藥,藥材中的農藥殘留問題就比較易于解決;東北地區土壤較肥沃,可以少施或不施用化肥;從而可以減少生產成本,提高經濟效益;⑦東北地區是細辛的傳統道地產區之一,遼細辛是傳統細辛道地藥材品種之一,歷史依據充分;⑧東北地區土地資源相對豐富,在一些地區尚能找到大片未開墾的土地,東北地區的大型農場也較多,便于集中種植、集中管理,藥材的質量和生產的經濟效益較有保障。
需要注意的是,東北地區多將北細辛和漢城細辛混栽;也就是說遼細辛是北細辛和漢城細辛的混合物,且兩者的比例不一。這樣細辛藥材的質量穩定性就易受到影響。為此,我們對東北地區不同產地的北細辛和漢城細辛藥材進行了比較研究,從中篩選出了較為優良而純正的種質,以用于細辛藥材的GAP基地。
影響細辛道地藥材質量的生態環境因子優選:特定的生態環境條件是道地藥材形成的最重要的外在因素。我們認為,生態環境對藥材質量的影響主要通過兩個途徑來實現,一是藥用植物因其適應性特點而產生獲得性遺傳的種內變異;二是直接影響藥用植物體內的生理生化反應,從而影響到植物化學成分的種類和含量。道地藥材得天獨厚的自然條件和地理環境,往往使藥用植物特別適宜于某些活性成分和微量元素的形成和積累,從而直接影響到藥材質量。
為研究各環境因子對細辛道地藥材質量的影響,我們搜集了各細辛道地產地的生態-地理因子數據;并計算了各環境因子的變異系數(變異系數=各環境指標的最高值與最低值之差/該環境指標的最高值。某環境因子的變異系數愈小,說明細辛道地藥材對該環境條件的要求愈苛刻,該環境條件的細小變化對細辛道地藥材的質量影響也就愈大。細辛道地產地各環境因子的平均變異系數由低到高的順序是:土壤類型<年平均日照時數<土壤pH<年均無霜期<海拔<年均降水<年均氣溫;故各環境因子對細辛道地藥材形成的重要性順序應該是:土壤類型>年平均日照時數>土壤pH>年均無霜期>海拔>年均降水>年均氣溫。說明在各環境因子中,合適的土壤和光照條件對細辛道地藥材的形成最重要。 郁閉度對細辛類藥材的揮發油含量、揮發油的化學成分種類及含量的影響已有研究證實。我們對細辛道地藥材與生境土壤中的微量元素含量做過相關分析,結果發現,在所研究的31種元素中,17種元素呈正相關,其中7種元素有較顯著的相關性(P<0.05,土壤對細辛道地藥材質量的影響是顯而易見的。總之,特定的生態環境條件是細辛道地藥材形成的最重要的外在因素:在各種環境因子中,光照和土壤對細辛道地藥材的形成是最重要的。在對藥材質量和產地生境資料進行分析比較的基礎上,我們優選出了適于細辛藥材生產的最優生態因子指數。
優良種質的鑒別:我們運用薄層層析、細胞學、酶化學和DNA指紋圖譜技術為細辛道地藥材的優良種質建立了多元鑒別體系。