標(biāo)本涂片革蘭染色在臨床微生物檢驗(yàn)中的作用

革蘭染色法是丹麥細(xì)菌學(xué)家christian gram在1884年創(chuàng)建的細(xì)菌鑒別染色法(differential staining)，是鑒定細(xì)菌最基本的方法#65377;標(biāo)本直接或沉渣涂片革蘭染色(簡(jiǎn)稱涂片染色，下同)是臨床微生物檢驗(yàn)的日常檢查方法，也是衛(wèi)生部《全國(guó)檢驗(yàn)操作規(guī)程》所規(guī)定的必檢內(nèi)容#65377;革蘭染色，一百多年來(lái)沿用至今，仍具有重要的使用價(jià)值#65377;本文重點(diǎn)闡述涂片染色在臨床微生物檢驗(yàn)工作中的具體作用，表現(xiàn)在以下幾個(gè)方面#65377;

有助于正確鑒別標(biāo)本來(lái)源和性質(zhì)，排除污染，確定感染

正確留取標(biāo)本，對(duì)報(bào)告結(jié)果至關(guān)重要#65377;如下呼吸道感染患者送檢的標(biāo)本是來(lái)源于呼吸道還是口腔#65377;除肉眼觀察外，更可靠的方法是涂片染色鏡檢#65377;呼吸道標(biāo)本以膿細(xì)胞#65380;黏液絲#65380;柱狀上皮細(xì)胞為主;口腔唾液以鱗狀上皮細(xì)胞為主#65377;涂片染色可直接反映標(biāo)本留取是否合格#65377;

涂片染色鏡檢是鑒別炎性標(biāo)本與非炎性標(biāo)本的可靠方法，膿細(xì)胞的數(shù)量直接反映感染存在的可能性及感染的程度;另一方面，涂片染色與培養(yǎng)結(jié)果符合與否，可以幫我們排除污染，確定感染#65377;

有助于判斷機(jī)體某些系統(tǒng)微生態(tài)是否平衡

由于細(xì)菌培養(yǎng)受培養(yǎng)基#65380;環(huán)境因素#65380;培養(yǎng)條件以及細(xì)菌本身生長(zhǎng)速度等多種客觀因素的影響，培養(yǎng)生長(zhǎng)的微生物種類及數(shù)量不一定能客觀反映某些系統(tǒng)為生態(tài)情況;而標(biāo)本涂片革蘭染色不受這些因素的影響，能夠真實(shí)客觀地反映微生物包括某些厭氧菌的生態(tài)平衡情況#65377;涂片染色對(duì)上呼吸道#65380;口腔#65380;下腸道#65380;泌尿生殖道等有菌部位標(biāo)本尤其重要#65377;

有助于對(duì)感染菌的判斷

正常情況下，人體與常居菌形成一種穩(wěn)定的微生態(tài)平衡#65377;由于某些原因，一旦機(jī)體的這種微生態(tài)平衡遭到破壞，某種非優(yōu)勢(shì)菌取得優(yōu)勢(shì)的時(shí)候即可引起機(jī)體的免疫反應(yīng)，進(jìn)而可引起感染#65377;膿細(xì)胞參與對(duì)感染菌的吞噬作用#65377;因此，膿細(xì)胞所大量吞噬的細(xì)菌即是引起感染的病原菌#65377;

有助于提高標(biāo)本陽(yáng)性檢出率

標(biāo)本涂片染色鏡檢見(jiàn)較多膿細(xì)胞，而找不到病原菌時(shí)，就要考慮結(jié)核桿菌#65380;軍團(tuán)菌#65380;病毒等感染的可能，并進(jìn)一步有針對(duì)地做相應(yīng)的特殊培養(yǎng)#65377;如果標(biāo)本涂片中膿細(xì)胞伴隨細(xì)菌出現(xiàn)，而普通培養(yǎng)沒(méi)有相應(yīng)細(xì)菌生長(zhǎng)，應(yīng)考慮厭氧#65380;某些需氧菌#65380;生長(zhǎng)緩慢的細(xì)菌，對(duì)所用抗生素敏感細(xì)菌的感染以及培養(yǎng)失控的可能性，進(jìn)一步作厭氧培養(yǎng)或其他特殊培養(yǎng)#65377;由于各種先進(jìn)技術(shù)在微生物領(lǐng)域的應(yīng)用，新病原菌不斷發(fā)現(xiàn)，且都需要特殊培養(yǎng)才能生長(zhǎng)，有的甚至不能體外培養(yǎng)#65377;因此，為了盡可能減少漏檢，標(biāo)本涂片革蘭染色具有特別重要的價(jià)值#65377;

有利于臨床早診斷#65380;早治療

目前，細(xì)菌培養(yǎng)太慢，不能適應(yīng)臨床需要的狀況在各級(jí)醫(yī)院都不同程度存在，嚴(yán)重阻礙了臨床微生物檢驗(yàn)的發(fā)展#65377;假如我們從標(biāo)本涂片染色入手，認(rèn)真貫徹1995年10月在上海召開(kāi)的中華醫(yī)學(xué)會(huì)微生物和免疫學(xué)會(huì)第三屆臨床微生物會(huì)議精神，采取臨床細(xì)菌培養(yǎng)“三級(jí)報(bào)告”方式#65377;首先，把涂片結(jié)果，特別是急重病人的標(biāo)本涂片染色結(jié)果，有感染診斷價(jià)值的涂片染色結(jié)果及時(shí)報(bào)告給臨床醫(yī)生，無(wú)疑可能緩解細(xì)菌培養(yǎng)慢這一現(xiàn)狀#65377;同時(shí)根據(jù)涂片結(jié)果，由單一優(yōu)勢(shì)菌引起的明顯感染標(biāo)本，采取用標(biāo)本直接做藥敏試驗(yàn)，盡早發(fā)出初步藥敏報(bào)告，為臨床早診斷提供參考依據(jù)，指導(dǎo)臨床醫(yī)生合理使用抗生素，減少醫(yī)院內(nèi)感染#65377;

總之，涂片染色是一種快速#65380;簡(jiǎn)便有效的微生物檢驗(yàn)手段，能多方面指導(dǎo)我們開(kāi)拓思路，幫助我們解決細(xì)菌培養(yǎng)過(guò)程中多方面的困惑，提高微生物檢驗(yàn)速度和準(zhǔn)確性，使微生物檢驗(yàn)更好地服務(wù)于臨床#65377;