流感病毒致病特點及抗流感病毒中藥活性成分與部位研究進展

摘 要：介紹了流感病毒結構及致病特點，綜述了近年來抗流感病毒中藥活性成分與部位研究，發現中藥抗流感病毒的有效成分或部位的研究較多，但機制研究不多見且不深入。然而隨著流感病毒致病機制研究的逐漸深入，結合中藥自身優勢，遵從中醫理論及按照“分子中藥學”和“方證組方”理論，在研制抗流感病毒藥物方面，中藥有效成分與部位將展現更廣泛的適應性和優越性，并具有廣闊的研究前景。

關鍵詞：中藥；流感病毒；有效部位；分子中藥學；方證組方

中圖分類號：R373.1+3；R284.1 文獻標識碼：A 文章編號：1673-2197(2008)05-015-03

流感病毒是引起急性病毒性呼吸道傳染病的主要病原體，具有傳染性高、傳播迅速、易發生流行等特點。由于病毒只能在活細胞生長、流感病毒的亞型變異速度快而疫苗研究和生產速度較慢，使得化學藥物和流感病毒疫苗難以發揮其最佳治療和預防效果，而且，目前又無法有效預測流感爆發的時間和周期，因此，抗流感病毒藥物研究受到廣泛重視。中藥具有抑制病毒復制、阻止病毒致細胞病變、調節免疫功能、改善肺循環、鎮痛抗炎等綜合功效，因此，中藥在防治流感方面具有獨特的優勢和廣闊的發展前景。

1 流感病毒的近況

1.1 流感病毒的結構

流感病毒為包膜的RNA病毒，屬于正粘科病毒科，依據其核蛋白(NP)抗原性的差異分成A、B、C三型，分別在基因組結構、多肽組成、感染性和致病性等方面存在差異；其包膜分內、外兩層，內膜由基質蛋白M1構成；外層包膜由一脂質雙層構成，其上面嵌有三種病毒蛋白，即具有血凝素活性的蛋白(HA)、神經氨酸酶活性蛋白質(NA)和基質蛋白(M2)。病原基因組由7個(C型病毒)或8個(A、B型)分片段的單股負鏈RNA構成，每個RNA節段的兩端都有相對保守的非編碼序列^[1]。流感病毒A型又分許多亞型，至今HA有15個亞型，NA有9個亞型。流感病毒的基因組分節段，易發生基因重配，即不同來源的流感病毒基因節段包被在一起形成新的毒粒。流感病毒的基因突變率很高，尤其HA、NA基因極易發生點突變，導致其編碼的蛋白質氨基酸序列的改變，從而逃避宿主的免疫系統的識別和清除。此外，HA蛋白分子上個別關鍵氨基酸位點的突變，尤其是受體結合部位的氨基酸發生替換，就有可能造成毒粒致病性和傳播能力的改變。流感病毒的宿主界限表現為不同宿主中流感病毒亞型的分布不同。在自然界中，流感病毒的宿主范圍相當廣，有鳥類及哺乳類。鳥類中存在所有的HA、NA亞型。豬中為H1N1和H3N2亞型及C型流感病毒，人群出現H1~H3，N1~N2的亞型組合，H5N1亞型和B型流感病毒^[2]。

1.2 流感病毒的致病機制

流感病毒大多在宿主細胞核中，其基因組通過質膜或細胞器膜芽形成成熟的病毒顆粒。流感病毒侵入宿主細胞依賴于HA的凝集素位點與宿主細胞表面的唾液酸的結合。HA介導病毒包膜與內體膜的結合，使病毒衣殼釋放進入胞質^[3]。當病毒脫殼，顆粒核蛋白體(vRNP)在ATP供能的條件下，很快通過宿主細胞核孔復合物(NPC)向核內轉運。vRNP向宿主細胞核內轉運的調控與NP和胞質因子NPI-1、核轉運受體等有關。只有當vRNA與核蛋白體(NP)同時存在時，vRNA才可轉運到細胞核內。流感病毒蛋白的合成，NP、RNA聚合酶亞基和NS1(RNA片段)在感染后最初數小時即生成，其它蛋白質如HA、NA合成較晚。對病毒蛋白合成時間的控制在病毒感染周期中具有重要作用，與病毒核衣殼的組裝、vRNP的成熟和釋放等相關。流感病毒在特定時間內合成的蛋白成分均要通過宿主細胞的介入進入核內完成vRNP的組裝。構成vRNP的主要蛋白成分是NP，為子代vRNP的合成所必需。在RNA復制的同時，子代vRNA與NP形成具有高級結構的子代vRNP，病毒vRNP合成后3小時，vRNP開始通過NPC由核內向胞質轉移，持續數小時。M1是vRNP向核外轉運的動力，只在細胞中合成M1，并且進入核后才發生vRNP的核外轉運^[4]。

1.3 流感病毒感染發病機制

流感病毒感染和病毒復制主要在上呼吸道上皮細胞。但常引起機體局部炎癥和全身性反應。機體反應主要與炎癥性細胞因子、趨化因子、誘導性一氧化氮合酶、粘附分子和微小纖溶酶表達與活化有關。Reye氏綜合征是世界性醫學難題，近年報道85%以上病例與病毒的感染有關，特別是流感病毒和水痘感染^[5~6]。

2 中藥抗流感病毒的有效成分與部位

該類藥物大多數為清熱解毒類中藥，所含成分復雜，主要為黃酮類，生物堿，多糖，氨基酸，揮發油等，其中黃酮或類黃酮類物質可以抑制流感病毒唾液酸酶的活性和抑制膜融合作用^[7]。

2.1 揮發油

2.1.1 連翹 張海燕^[8]報道了連翹種子揮發油對亞甲型流感病毒京科68-1株的效價為1：655，連翹揮發油在雞胚內能抑制流感病毒亞甲型、副流感仙臺株的增殖。

2.1.2 莪術 莪術油為姜科植物蓬莪術、廣西莪術或溫郁金的根莖經水蒸氣蒸餾而得到的揮發油，主要含有莪術醇、莪術二酮等。夏泉^[9]以流感病毒和小鼠感染RSV肺炎模型，觀察了莪術油體外和胃腸給藥的抗病毒作用。發現莪術油有抗流感病毒和呼吸道合胞病毒的作用，能明顯減輕感染病毒動物的肺部感染體征，對病毒感染小鼠的肺指數有明顯抑制作用。

2.1.3 石香薷 嚴銀芳^[10]通過硅膠柱層析法分離石香薷揮發油各組成成分，對抗病毒活性成分進行初步追蹤研究，用小鼠流感病毒性肺炎模型作進一步評估。結果顯示，石香薷揮發油、中性石香薷揮發油和硅膠柱層析分離后的洗脫液(C部分)均具有抗流感A3型病毒作用，以洗脫液C部分抗病毒活性最高。

2.1.4 獨活 俄羅斯學者^[11]對傘形科獨活屬的18種植物果實中揮發油的抗流感作用作了較深入研究，發現Heracieum lehmannianum，H.ponticum，H.stevenii 3種植物果實中的揮發油對A型流感病毒有效。

2.2 黃酮類

2.2.1 連翹 趙文華等^[12]對連翹抗流感病毒作用的物質基礎進行了研究，結果發現黃酮類、苯乙醇苷類及木脂素類成分是連翹抗流感病毒作用的主要物質基礎。

2.2.2 黃芩 黃芩及其有效成分黃芩苷、黃芩苷元、漢黃芩素和漢黃芩苷等黃酮類化合物都具有抗病毒作用。據報道^[13]，從黃芩的根和葉中提取黃酮類物質，并對其中5，7，4-三羥-8-甲氧黃酮和5，7，8，4-四氫黃酮兩種化合物進行體內外實驗，結果具有抑制流感病毒生長及抑制流感病毒唾液酸酶活性的能力，前者還具有抑制膜融合的作用。

2.2.3 北柴胡 從北柴胡莖葉中提取的總黃酮是主要有效部位，其主要有效成分為槲皮素(Quercetin)、異鼠李素(Isorhamnetin)等。實驗證明：北柴胡莖葉中的黃酮成分具有較強的抗流感病毒作用，其莖葉總黃酮高劑量組抗病毒作用優于已知的抗病毒西藥利巴韋林膠囊和抗病毒顆粒^[14]。

2.2.4 甘草 Utsunomiya等^[15]甘草皂苷可以提高流感病毒感染小鼠生存率，延長生存時間，降低肺病毒滴度；但體外實驗表明，甘草皂苷對于病毒生存和復制無影響。從甘草皂苷治療的病毒感染小鼠體內分離脾T細胞轉輸給病毒感染小鼠，可增加生存率；當甘草皂苷與抗IFN-γ單克隆抗體同用時，不顯示抗病毒作用。提示甘草皂苷保護小鼠流感病毒感染是通過刺激T細胞產生IFN-γ起作用的。

2.2.5 銀翹散 石鉞等^[16]對銀翹散(金銀花、連翹、桔梗、薄荷、淡竹葉、甘草、荊芥、淡豆豉、牛蒡予等9味藥)各單味藥相應部位有效成分進行測定，發現抗流感病毒有效部位群中的主要成分是木脂素類和黃酮類，且牛蒡子和甘草在9味藥中起著主要的作用。

2.3 生物堿類

2.3.1 苦參 樊宏偉等^[17]對苦參堿類生物堿的研究發現，這種廣泛存在于山豆根中的主要有效成分，對流感病毒也具有抑制作用，不僅可以直接抑制病毒，且可誘生干擾素，而后者則為抗病毒感染的重要因素。

2.3.2 十大功勞 據馮書曉等^[13]報道，從十大功勞中提取分離出幾十種生物堿，如尖刺堿、小檗堿、異漢防己堿等活性成分。粗提的異漢防己堿對小鼠有較好的預防、治療作用，直接從十大功勞根中提取分離出異漢防己堿，經雞胚試驗證明該組分在體外有強的抗流感病毒作用。

2.4 多糖類

2.4.1 人參 人參多糖的藥理作用很多，其中對免疫系統的作用是多方面的，既有調節細胞及細胞因子的功能，又表現眾多的免疫生物學效應，兩者密切相關。由于人參調節免疫功能強，故臨床上常用其治療感染性疾病和白細胞減少癥等^[18]。

2.4.2 黃芪 李麗婭^[19]通過黃芪多糖抗流感病毒的研究發現，黃芪多糖200g/L濃度組在體外細胞水平有廣譜抑制呼吸道病毒的作用，直接在鼻咽和口咽部給予抗病毒藥物，可以直接作用于感染靶位。認為黃芪抗流感病毒的作用機制可能為：膜穩定作用與通過誘導干擾素、NK細胞活性，從而殺滅部分病毒，減輕對心肌細胞的損害。

2.4.2 紫菜 肖美添^[20]的雞胚實驗表明紫菜多糖具有一定的抗甲1型流感病毒活性，低分子量的酸性多糖抗病毒活性要優于高分子量的酸性多糖，二者與金剛烷胺均表現出明顯的協同抗甲1型流感病毒作用。

2.4.3 香菇 據報道^[13]，香菇多糖經鼻給藥，能減少流感病毒感染小鼠肺病毒滴度；經靜脈給藥，能延長小鼠生存時間，增強肺泡灌洗液巨噬細胞釋放NO等活性。

2.5 結合氨基酸類

胡興昌等^[21]用丙酮脫脂提取板藍根生藥的凝集素對流感病毒進行的體外抑制試驗，結果表明，板藍根凝集素對流感病毒具有顯著的直接殺滅作用和預防作用及較好的治療作用，并且抑制流感病毒的效果與板藍根凝集索血凝活性的高低相關。張大志等^[22]采用雞胚體外培養法對不同濃度的板藍根提取成分進行抗流感病毒的效能測定，結果表明，板藍根提取液可有效抑制流感病毒。劉思貞等^[23]利用系統溶劑分離法和陽離子樹脂吸附交換法分離得到的板藍根各化學成分，進行雞胚羊膜腔半體內法抗流感病毒活性試驗，發現活性部位是親水性的、被陽離子吸附的結合氨基酸部分。

3 結語

目前，中藥抗流感病毒的有效成分與部位的研究較多，但抗病毒的機制研究并不多見、更不深入。隨著流感病毒致病機制研究的逐漸深入，結合中藥藥源豐富、價格低廉且作用靶點多樣等優勢，遵從中醫辨證施治原則，按照“分子中藥學”和“方證組方”理論，以抗流感病毒為主攻方向，兼顧扶正固本治則，合理組方，在研制高效低毒的抗流感病毒和防治流行性感冒藥物中，中藥及其有效成分與部位將展現更廣泛的適應性和優越性，并具有廣闊的研究前景。

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(責任編輯：王尚勇)