竹柏葉中揮發油ＧＣ－ＭＳ分析

摘 要：目的：對竹柏葉中揮發油的化學成分進行分析。方法：采用水蒸氣蒸餾法提取揮發油，得油率為0.05%，利用GC-MS聯用技術對其進行分離分析。結果：竹柏葉中揮發油共分離出18個峰，鑒定出了13個化合物，占總離子流圖色譜峰面積的94.11%。結論：竹柏揮發油的主要成分為萜烯類和醇類物質，主要有4-異亞丙烯基-1-乙烯基烯(53.82%)、α-畢澄茄油烯(10.04%)、β-欖香烯(9.577%)、(-)-α-欖香烯(7.102%)、(-)-α-蒎烯(5.591%)、石竹烯(2.235%)。該方法快速、簡便，可用于竹柏的質量分析和鑒別。

關鍵詞：竹柏；揮發油；氣質聯用法；GC-MS

中圖分類號：R284.1 文獻標識碼：A 文章編號：1673-2197(2008)05-051-02

竹柏Podocarpus nagi (Thun.) Zoll et Mor，為羅漢松科竹柏屬常綠喬木，別名糖雞子、羅漢柴、椰樹、山杉、鐵甲樹等，屬裸子植物類。廣泛分布于廣東、浙江、福建、廣西等地^[1]。竹柏在我國南方有大量栽培，但多作為觀賞的園庭、園林樹種，在醫藥上的研究應用并不多見。竹柏具有凈化空氣、驅蚊蟲、抗污染和治療腫瘤的功效，其主要成分有揮發油、萜類成分和黃酮類成分等^[1，2，3]，揮發油為竹柏葉發揮藥效作用的主要部位，但目前對其研究報道仍然較少。本實驗采用水蒸汽蒸餾法提取揮發油，利用氣質聯用技術對竹柏的揮發油進行了分析研究，發現其揮發油中所含主要成分與文獻報道^[3]存在差異，現報道如下。

1 儀器與材料

(1)儀器，試劑：氣相色譜-質譜聯用儀(Agilent 6890N-5793 N)，乙醚、無水硫酸鈉等試劑(AR)。

(2)材料：竹柏葉采集于廣東省廣州市，原植物經蔡岳文副主任中藥師鑒定為羅漢松科竹柏Podocarpus nagi (Thun.) Zoll et Mor。將其新鮮葉片切碎，水蒸氣蒸餾法提取并用無水硫酸鈉干燥獲得淡黃色揮發油，氣味清香，得油率為0.05%。

2 實驗和分析

(1)供試品溶液的制備：精密量取揮發油適量，加乙醚稀釋10倍，再加適量無水硫酸鈉進行脫水，濾過，備用。

(2)空白溶液的制備：不加樣品，按供試品溶液制備方法制成空白溶液，加適量無水硫酸鈉進行脫水，備用。

(3)GC-MS總離子流的建立。

HP-5MS Capilary 30.0m×250μm×0.25μm(Agilent)；進樣口溫度250℃，接口溫度280℃；載氣為氦氣，流速1.0mL/min；采用分流進樣，分流比30∶1，進樣量1.0μL；升溫程序：開始60℃保持2min，再以15℃min的速度升至150℃，再以6℃min的速度升至250℃，POST在280℃保持3min，可達到較好分離效果。峰面積歸一法計算各化合物的相對含量。

(4)MS-DS分析。

MS：EI源(70ev)，雙燈絲；掃描范圍40~400m/z，掃描間歇1.0second。標準譜庫為美國NIST譜庫。

3 結果與討論

用GC-MS聯用儀計算機對總離子流色譜圖進行分析和處理，根據相應的MS譜圖，用NIST譜庫系統檢索，并參考有關文獻和手冊^[4]，確定化學組分，并使用峰面積歸一法計算各組分的相對含量。共鑒定出13種化學成分。竹柏葉揮發油的總離子流圖見圖1，以面積歸一化法計算各組分的相對含量見表1。

各個化學組分在所選擇分析條件下有較好的分離效果，已鑒定化合物占總離子流出峰面積的94.11%。竹柏葉揮發油的主要成分為萜烯類成分，主要有(-)-α-蒎烯、β-欖香烯(、(-)-α-欖香烯、石竹烯、α-畢澄茄油烯、4-異亞丙烯基-1-乙烯基烯、順-2-己烯-1-醇、杜松-1(10)，4-二烯、杜松-1，4-二烯、3，7，7-三甲基二環^[4，1，0]庚-3-烯。其中β-欖香烯是抗腫瘤有效成分，具有很強殺滅腫瘤細胞及抑制腫瘤生長作用，其乳劑是臨床應用與治療腫瘤的二類新藥^[5]，還有(-)-α-欖香烯、石竹烯、(-)-α-蒎烯等都是具有較高藥用價值的天然產物。

圖1 竹柏葉揮發油的總離子流

由表1中成分相對面積含量可知，竹柏葉中所含主要成分由大到小依次為4-異亞丙烯基-1-乙烯基烯(53.82%)、α-畢澄茄油烯(10.04%)、β-欖香烯(9.577%)、(-)-α-欖香烯(7.102%)、(-)-α-蒎烯(5.591%)、石竹烯(2.235%)。有文獻^[3]報道主要含有ν-欖香烯(25.89%)、β-蓽澄茄烯(12.34%)β-古蕓香烯(9.67%)等存在明顯差異，而與文獻^[2]中報道的分析結果較為接近。

4 結論

用水蒸氣蒸餾法提取竹柏葉片中的揮發油，得油率為0.05%，采用GC-MS方法從該揮發油中分離鑒定出13個化合物，主要有4-異亞丙烯基-1-乙烯基烯(53.82%)、α-畢澄茄油烯(10.04%)、β-欖香烯(9.577%)、(-)-α-欖香烯(7.102%)、(-)-α-蒎烯(5.591%)、石竹烯(2.235%)。本研究通過對竹柏葉揮發油成分和含量的分析評價，可為其進一步合理開發與綜合利用提供研究基礎。

參考文獻：

[1] 孫同興，王雪英.竹柏屬植物的分類、地理分布及藥用價值[J].亞熱帶植物科學，2005，34(2)：53.

[2] 何道航，龐義，任三香.長葉竹柏揮發油的化學成分研究[J].林產化學與工業，2005，25(2)：119~121.

[3] 吳惠勤，王艇，蘇應娟，等.竹柏葉精油化學成分的研究[J].武漢植物學研究，1996，14(3)：287~288.

[4] 施鈞慧，汪聰慧.香料質譜圖集[M].北京：中國質譜學會，1992.

[5] 顧洪豐，瞿延暉.β-欖香烯抗腫瘤機理研究進展[J].湖南醫學院學報，2002，22(4)：64.

(責任編輯：萬賢賢)