(1.河南科技學(xué)院植物保護系,河南 新鄉(xiāng)453003;2.西北農(nóng)林科技大學(xué)植物保護學(xué)院,陜西 楊凌712100)
摘要:采用生長速率法,測定了花椒不同器官的提取液對蘋果炭疽病菌#65380;葡萄白腐病菌#65380;番茄早疫病菌和稻瘟病菌的抑菌作用#65377;結(jié)果表明,當(dāng)質(zhì)量濃度為0.1 g·mL-1時,花椒不同器官的提取液對4種病原菌菌絲生長都有一定的抑制作用,但不同器官的抑菌活性不同,其中花椒根和枝提取液的抑菌活性較低,抑制率均低于50%,果皮和葉提取液的抑菌活性較高,抑制率均高于50%#65377;
關(guān)鍵詞:花椒;提取液;抑菌活性;測定
中圖分類號:S482.2+92文獻標(biāo)識碼:B文章編號:0439-8114(2008)06-0666-02
植物是生物活性化合物的天然寶庫,其產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物超過40萬種,其中大多數(shù)化學(xué)物質(zhì)如萜烯類#65380;生物堿#65380;類黃酮#65380;甾體#65380;酚類#65380;獨特的氨基酸和多糖等均具有殺蟲或抗菌活性[1]#65377;從植物體內(nèi)的次生物質(zhì)中尋找能抑制有害生物的有效成分,人工直接提取應(yīng)用或明確有效成分結(jié)構(gòu)后人工合成農(nóng)藥,已成為無公害農(nóng)藥的開發(fā)熱點之一[2]#65377;
花椒(Zanthoxylum bungeanum Msxim),又名蜀椒,有溫?zé)嶂兄雇?65380;殺菌中止癢的功效#65377;花椒中的苯并菲啶類生物堿具有抗菌活性,對大腸桿菌#65380;炭疽桿菌等有抑制作用[3]#65377;有關(guān)花椒的抑菌活性未見詳細#65380;深入的報道,本文對花椒的抑菌作用進行了初步研究#65377;
1材料與方法
1.1植物樣品的制備
將花椒的根#65380;果皮#65380;葉#65380;枝和果實洗凈,自然陰干,分別用粉碎機粉碎,各稱20 g,分別加入100 mL丙酮溶劑,置于250 mL三角瓶中冷浸提取3次,時間各為48 h,合并濾液,濃縮為1 g·mL-1,移裝于25 mL三角燒瓶,密封,于冰箱(4~8℃)冷藏備用[4]#65377;
1.2供試菌種
供試菌種為蘋果炭疽病菌(Glomerella cigulate)#65380;葡萄白腐病菌(Coniothyrium diplodiella)#65380;番茄早疫病菌(Alternaria solani soraner)和稻瘟病菌(Magnapothe grisea),由河南科技學(xué)院植物保護系植物病理教研室提供#65377;
1.3抑菌活性的測定
采用生長速率法[5,6]進行抑菌生物活性測定#65377;在無菌條件下,分別取各器官提取液5 mL置于50 mL 38℃的PDA滅菌培養(yǎng)基中,以加入等量溶劑為對照,搖勻,倒入直徑6 cm的滅菌培養(yǎng)皿中制成平板#65377;冷卻凝固后接入生長一致#65380;直徑為4 mm菌餅,每皿接一個菌餅,重復(fù)3次,然后放入25℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4 d,測菌落直徑,計算抑菌率#65377;
2結(jié)果與分析
2.1花椒根提取液對病原菌菌絲生長的抑制作用
試驗結(jié)果表明,花椒根提取液對4種植物病原菌菌絲生長有一定的抑制作用,抑制率均低于40%,其中對稻瘟病菌菌絲生長的抑制作用較強,抑制率為36.8%,對葡萄白腐病菌菌絲生長的抑制作用最弱,抑制率僅為17.4%#65377;

2.2花椒果皮提取液對病原菌菌絲生長的抑制作用
試驗結(jié)果表明,花椒果皮提取液對4種植物病原菌菌絲生長有較強的抑制作用,抑制率均高于50%,其中對稻瘟病菌菌絲生長的抑制作用最強,抑制率高達80.8%,對葡萄白腐病菌菌絲生長的抑制作用較弱,抑制率為58.1%#65377;

2.3花椒葉提取液對病原菌菌絲生長的抑制作用
試驗結(jié)果表明,花椒葉提取液對4種植物病原菌菌絲生長有較強的抑制作用,抑制率均高于50%,其中對稻瘟病菌菌絲生長的抑制作用最強,抑制率高達78.0%,對葡萄白腐病菌菌絲生長的抑制作用較弱,抑制率為53.4%#65377;

2.4花椒枝提取液對病原菌菌絲生長的抑制作用
試驗結(jié)果表明,花椒枝提取液對4種植物病原菌菌絲生長有一定的抑制作用,抑制率均低于50%,其中對稻瘟病菌菌絲生長的抑制作用最強,抑制率為47.0%,對葡萄白腐病菌菌絲生長的抑制作用最弱,抑制率僅為22.6%#65377;

2.5花椒果實提取液對病原菌菌絲生長的抑制作用
試驗結(jié)果表明,花椒果實提取液對4種植物病原菌菌絲生長有一定的抑制作用,對不同病原菌菌絲生長的抑制作用強弱不同,其中對稻瘟病菌菌絲生長的抑制作用最強,抑制率為66.2%,對蘋果炭疽病菌和番茄早疫病菌菌絲生長的抑制作用次之,抑制率低于50%,對葡萄白腐病菌菌絲生長的抑制作用最弱,抑制率僅為31.9%#65377;

3討論
1)花椒不同器官提取液對4種植物病原菌菌絲生長均有一定的抑制作用,但對不同病原菌菌絲生長的抑制作用強弱不同,其中對稻瘟病菌菌絲生長的抑制作用較強,對蘋果炭疽病菌和番茄早疫病菌菌絲生長的抑制作用次之,對葡萄白腐病菌菌絲生長的抑制作用較弱#65377;
2)花椒不同器官提取物對4種植物病原菌菌絲生長的抑制作用不同,其中根的提取液的抑菌活性最低,抑制率均低于40%,枝提取液對4種植物病原菌菌絲生長的抑制率均低于50%,葉和果皮提取液對4種植物病原菌菌絲生長有較強的抑制作用,抑制率均高于50%#65377;
3)試驗中采用花椒粗提液進行室內(nèi)生測,某些含量較少但有抑菌活性的物質(zhì)有可能難以表現(xiàn)出活性,應(yīng)該采用活性追蹤的方法對粗提液進行進一步的分離#65380;純化,以尋找或確定其主要或有效抑菌活性成分#65377;對殺菌劑而言,離體條件下無效的提取液有可能會在活體上表現(xiàn)活性,如乙膦鋁#65380;三環(huán)唑等只在活體上表現(xiàn)活性,因此有必要對花椒提取液進行活體抑菌測驗,以便于進一步研究#65377;花椒提取液的殺菌譜#65380;作用方式#65380;作用機理有待于進一步研究#65377;
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