宮頸陰道分泌液中ＭＭＰ－９、銅、鈣、鋅含量與胎膜早破關系的研究

【摘要】 目的 研究胎膜早破（PROM）孕婦宮頸陰道分泌液中基質(zhì)金屬蛋白酶9（MMP-9）、微量元素（銅、鈣、鋅）的含量與PROM的關系。方法 選擇臨產(chǎn)前足月剖宮產(chǎn)分娩的胎膜早破者50例（PROM組）和正常未破膜者50例（對照組），分別用雙抗體夾心ELISA法和溶出電極法測定血漿、陰道分泌液中MMP-9、銅、鈣、鋅的含量。結(jié)果 PROM組血漿與陰道分泌液中MMP-9水平分別為3187.74±2107.60 μg/L、301.61±182.42 μg/L均明顯高于對照組（1163.02±1131.41 μg/L，177.11±106.90 μg/L），差異有顯著性（P＜0.01）；PROM組陰道分泌液中銅、鈣、鋅的含量分別為2.04±1.82 μg/L、40.24±18.21 μg/L、0.32±0.22 μg/L，均明顯低于對照組（3.66±2.10 μg/L、49.30±12.78 μg/L、0.69±0.41 μg/L），差異有顯著性（P＜0.01）。結(jié)論 胎膜早破孕婦陰道分泌液中MMP-9含量明顯升高，而銅、鈣、鋅含量明顯降低，對胎膜早破的早期診斷有一定幫助。

【關鍵詞】胎膜早破；基質(zhì)金屬蛋白酶；微量元素

文章編號：1003-1383(2008)01-0005-03中圖分類號：R714.433文獻標識碼：A

Study on the Relationship Between MMP-9 and Microelementsof Vaginal fluid in Premature Rupture of Membranes

SU Dan， CHEN Xiuzhen

(Maternity and Childcare Hospital's of Beihai，Beihai Guangxi 536000，China)

【Abstract】 Objective To study the content of matrix metalloproteinase9(MMP-9) and its microelements（Cu、Ca、Zn） of vaginal fluid in premature rupture of membranes (PROM).

Methods 50 pregnant women with PROM at term (PROM Group) and 50 normal pregnant women with intact membranes at term (Control Group) were enrolled. The level of MMP-9 and microelements in vaginal fluid and plasma were determined by enzyme link immunosorbent assay (ELISA) and electrode respectively.Results The MMP-9 level ofplasma and vaginal fluid in PROM group was 3187.74±2107.60 μg/L and 301.61±182.42 μg/L respectively， which was significantly higher than Control group (1163.02±1131.41 μg/L， 177.11±106.90 μg/L，（P＜0.01).The microelements（Cu、Ca、Zn）level of vaginal fluid in PROM group was 2.04±1.82 μg/L， 40.24±18.21 μg/L，0.32±0.22 μg/L respectively， which was significantly lower than Control group （3.66±2.10 μg/L， 49.30±12.78 μg/L， 0.69±0.41 μg/L，（P＜0.01）.

Conclusion The content of MMP-9 in vaginal fluid ofPROM members increase obviously， while the contents of microelements（Cu、Ca、Zn）decrease obviously ，which is helpful to theclinical diagnose ofPROMin early days.

【Key words】 Premature rupture of membranes；Matrix metalloproteinase；Microelements

胎膜早破(PROM)是指臨產(chǎn)前的胎膜破裂，其發(fā)生率國外5％～15％，國內(nèi)2.7％～17％［1］，是威脅母兒健康的一種妊娠中、晚期并發(fā)癥，目前其病因尚未完全明了，因此缺乏可靠的預防措施。近年來研究表明外周靜脈血清中MMP-9及銅、鈣、鋅等微量元素在胎膜早破的發(fā)生中起著重要作用。本研究通過檢測PROM孕婦血漿和陰道分泌液中MMP-9水平及銅、鈣、鋅三種微量元素的含量，探討PROM的原因和發(fā)病機制，為防治胎膜早破的發(fā)生尋找一條新的途徑。

資料和方法

1.資料來源 隨機選取2005年3月至12月在本院分娩的足月初產(chǎn)胎膜早破孕婦50例，孕周38.4±1.7周，平均年齡27.7±2.6歲。選取同期住院因社會因素行剖宮產(chǎn)的正常妊娠婦女50例為對照組，孕周39.1±1.3周，平均年齡27.5±2.8歲。以上兩組病例均為初產(chǎn)婦，單胎頭位，無產(chǎn)兆，無宮頸擴張，無內(nèi)、外科合并癥。同時兩組的孕周、年齡比較差異均無顯著性意義（P＞0.05）。

2.胎膜早破診斷標準［2］ ①臨床表現(xiàn)：孕婦自覺陰道有較多液體排出；②陰道分泌液的二硝基苯基偶氮萘酚二磺酸鈉試紙試驗，檢測pH≥7；③取陰道穹隆液池內(nèi)的液體置玻璃片，干燥后顯微鏡下觀察有羊水結(jié)晶。上述試驗均為陽性，其診斷胎膜早破的準確率為93.1％。

3.標本采集 ①陰道分泌液的采集：所有孕婦外陰常規(guī)消毒，窺器擴張陰道，用2 ml無菌蒸餾水沖洗陰道，再用注射器抽取陰道穹隆液池3 ml沖洗液，常溫下離心10 min，置－20°C待測。②血漿標本的采集：所有孕婦均產(chǎn)前抽取靜脈

4.血漿、陰道分泌液中MMP-9水平及銅、鈣、鋅含量的測定 MMP-9測定采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA），試劑盒為深圳晶美公司提供的美國原裝進口ELISA試劑盒。實驗操作按試劑盒說明書進行。試劑盒靈敏度＜0.157 ng/ml，批內(nèi)變異系數(shù)＜3%，批間變異系數(shù)＜7%。銅、鈣、鋅含量的測定采用溶出電極法測定微量元素含量，所用溶出電極儀由山東電訊器廠生產(chǎn)，型號為MCP3T，按操作規(guī)程對樣本進行測定。

5.統(tǒng)計學方法 計量資料用-±s表示，采用SPSS11.0軟件包進行兩組間均數(shù)t檢驗。

結(jié)果

1.兩組血漿、陰道分泌液MMP-9水平檢測 結(jié)果顯示PROM組血漿及陰道分泌液中MMP-9含量明顯高于對照組（P＜0.01）。見表1。

2.兩組血漿、陰道分泌液銅、鈣、鋅含量檢測 結(jié)果顯示，PROM組銅、鈣、鋅明顯降低，與對照組比，有顯著性差異（P＜0.01）。見表2。

討論

1.MMP-9的特性及臨床應用 MMP-9是結(jié)構(gòu)中含有鋅的蛋白水解酶，主要降解明膠、IV、V、VII、X型膠原等，是降

解胎膜中ECM（細胞外基質(zhì)）的主要酶類，以無活性的酶原形式分泌。主要來源羊膜上皮細胞、滋養(yǎng)層細胞、平滑絨毛膜、蛻膜細胞及中性粒細胞等［3］。一般情況下MMP-9在體內(nèi)受到嚴格的控制，當MMP-9/TIMP1（金屬蛋白酶組織抑制劑1）失衡，MMP-9的含量升高，活性增加，促使胎膜細胞外基質(zhì)的過程降解，胎膜結(jié)構(gòu)紊亂，從而使胎膜抵抗力、張力下降，最終導致胎膜早破。

人的胎膜是由羊膜、絨毛膜和蛻膜組成，而膠原是其細胞外基質(zhì)的主要成分。有研究顯示［4］，胎膜破裂與胎膜組織中膠原被分解，使其彈性和物理強度下降有關。在婦女的體內(nèi)，正常情況下就存在一定量的MMP-9［5］。在妊娠婦女的羊水中從孕中期至孕末期MMP-9一直處于相對穩(wěn)定的較低水平。

本研究表明，在胎膜早破孕婦血漿及宮頸陰道分泌液中的MMP-9水平明顯高于對照組，且差異有顯著意義（P＜0.01）。血漿中MMP-9水平與國內(nèi)外的報道相一致。宮頸陰道分泌液中MMP-9水平國內(nèi)外未見報道。我們應用宮頸陰道分泌液成分，避免母血中炎性細胞釋放MMP-9對實驗結(jié)果的影響［6］，且無創(chuàng)性，可多次重復應用。胎膜完整性的保持依賴宮腔內(nèi)壓與胎膜強度的平衡。由于細胞外基質(zhì)各成分的比例決定著胎膜的伸展性和強度，因此從研究結(jié)果中可以得出MMP-9的增加促進了膠原的分解，使胎膜的脆性增加，從而增加了胎膜破裂的機會。宮頸陰道分泌液中MMPs可能來源于子宮下段和宮頸，其含量與宮頸擴張程度有關［7］。當宮頸陰道分泌液中MMP-9以240 μg/L為分界時，其預測胎膜早破的敏感度為78％，特異度為90%，陽性預測值為95%，陰性預測值為67%，假陰性率為23%，假陽性率為7%［8］。MMP-9在宮頸陰道分泌液中預測胎膜早破有較高的特異度。

2.微量元素在胎膜早破中的作用 胎膜中纖維母細胞層決定了羊膜的彈性、脆性。銅是人體必需的微量元素，以銅藍蛋白的形式存在，同時賴氨酸酰氧化酶的金屬轉(zhuǎn)化酶，可催化彈性蛋白中的賴氨酸殘基和膠原中的肽基賴氨酸殘基的形成［9］。銅低時該酶的活性受到影響，從而膠原纖維及彈性蛋白合成障礙，絨毛羊膜變薄，彈性和韌性降低，易發(fā)生胎膜破裂。

胎兒在發(fā)育過程中不斷地從母體中吸收所需鋅，致使母體鋅水平降低，而缺鋅后能干擾母體多種含鋅酶的代謝。本組資料表明，胎膜早破孕婦血漿及宮頸陰道分泌液中的鋅水平明顯低于對照組，兩組之間具有顯著性差異（P＜0.01）。鋅離子是孕期胎兒發(fā)育不可缺少的另一微量元素，隨著孕周的增加，需鋅量也增加。已知體內(nèi)有多種酶與鋅有關，它參與核酸，蛋白質(zhì)代謝及纖維細胞增殖和膠原纖維合成。缺鋅或含量不足導致了膠原纖維合成困難，使胎膜變脆，變薄而易發(fā)生胎膜早破。因此，缺鋅也可能是胎膜早破的另一因素。

總之，PROM的發(fā)生與許多外源和內(nèi)源性因素相關，確切原因未明，研究結(jié)果不盡相同，研究推測MMP-9在感染引起PROM中起著關鍵作用。胎膜結(jié)構(gòu)及羊水中MMPs活性的異常升高、MMPsTIMPs失衡、微量元素含量改變等多種因素是誘發(fā)PROM的共同環(huán)節(jié)。

參考文獻

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(收稿日期：2007-11-11 修回日期：2008-01-15)

(編輯：潘明志 英文審校：鐘京梓)

注：本文中所涉及到的圖表、注解、公式等內(nèi)容請以PDF格式閱讀原文。