塔拉豆粉的食用安全性評(píng)價(jià)研究

　　摘要：目的：評(píng)價(jià)云南引進(jìn)的珍貴樹種——塔拉豆粉的食用安全性，為新資源食品開發(fā)提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。方法：按GBl5193—1994《食品安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)程序和方法》進(jìn)行，包括：急性毒性試驗(yàn)、Ames試驗(yàn)、小鼠骨髓微核試驗(yàn)、小鼠精子畸形試驗(yàn)、30d喂養(yǎng)試驗(yàn)和傳統(tǒng)致畸試驗(yàn)。結(jié)果：雌雄大、小鼠急性經(jīng)口LD>10g/kg.bw，屬無毒級(jí)。Ames試驗(yàn)、小鼠骨髓微核試驗(yàn)和精子畸形三項(xiàng)遺傳毒性試驗(yàn)結(jié)果均為陰性，30d喂養(yǎng)試驗(yàn)未顯示明顯毒性，傳統(tǒng)致畸結(jié)果陰性。結(jié)論：塔拉豆粉經(jīng)食品毒理學(xué)安全性評(píng)價(jià)認(rèn)為是安全的，可將其運(yùn)用于保健食品的開發(fā)研究中。
　　關(guān)鍵詞：塔拉豆粉；安全性；毒理學(xué)
　　中圖分類號(hào)：R965.3
　　文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A
　　文章編號(hào)：1007—2349(2008)05—0047—03
　　
　　塔拉主要生長(zhǎng)于南美洲西北部，盛產(chǎn)于秘魯，當(dāng)?shù)胤Q塔拉(Tara)。塔拉又名刺云實(shí)(Caesalp inia sp inosa Kunt ie)是我國(guó)首次從南美洲引進(jìn)并栽培成功的珍貴經(jīng)濟(jì)樹種，現(xiàn)引種栽培地點(diǎn)分布在云南省，栽培面積已達(dá)266余hm。引種塔拉的干燥莢果的果皮(莢殼)，除可制取沒食子酸，具有較高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值外，還可供藥用，其功效成分包括：清熱解毒、抗菌消炎、清肺止咳、祛痰平喘，可用于治療急慢性咽炎、扁桃體炎、上呼吸道感染引起的咳喘等，療效確切，有很好的開發(fā)利用價(jià)值。為了進(jìn)一步探索將其開發(fā)利用于保健食品，本項(xiàng)目對(duì)塔拉豆粉的安全性進(jìn)行了系統(tǒng)毒理學(xué)評(píng)價(jià)。
　　
　　1、材料與方法
　　
　　1.1材料　塔拉豆粉，淡黃色的粉末，由昆明醫(yī)學(xué)院重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室提供。中國(guó)科學(xué)院昆明動(dòng)物研究所實(shí)驗(yàn)動(dòng)物開發(fā)中心提供昆明系健康成年小白鼠，批準(zhǔn)號(hào)：云動(dòng)管字N00000797，SD大鼠來源于云南省天然藥物藥理重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，動(dòng)物質(zhì)量合格證號(hào)：N00001120；菌株：選用組氨酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型鼠傷寒沙門菌，共4株，即TA97a、TA98、TA100、TA102，經(jīng)生物學(xué)鑒定合格；實(shí)驗(yàn)儀器：電子天平，全自動(dòng)血液分析儀，全自動(dòng)生化分析儀，顯微鏡，恒溫水浴箱。
　　
　　1.2方法
　　1.2.1急性毒性試驗(yàn)　昆明種小白鼠及SD大鼠各20只，隨機(jī)分成2組，雌雄各半，取樣品配成最高劑量10g/kg·bw，采用1次最大劑量灌胃法，經(jīng)口灌胃。
　　1.2.2骨髓微核試驗(yàn)　昆明種小白鼠50只，隨機(jī)分成5組，每組10只，雌雄各半，設(shè)陰性對(duì)照組、陽性對(duì)照組(環(huán)磷酰胺35mg/kg·bw腹腔注射)及3個(gè)劑量組，受試劑量分別為1.87g，3.75g，7.50g/kg·BW，間隔24h灌胃2次，末次給藥后24h頸椎脫位處死，取出股骨，常規(guī)制骨髓涂片，用Giemsa染色鏡檢。
　　1.2.3精子畸形試驗(yàn)　試驗(yàn)動(dòng)物分為5組；陰性對(duì)照組，環(huán)磷酰胺陽性對(duì)照組。塔拉豆粉低，中，高劑量組，每組有效動(dòng)物不低于5只。劑量為1.25g，2.50g，5.00g/kg·bW，每天CU+jO6PRhE5B2IX5YmJiHIz5hzlLBM4D7D6zD1puyhQ=清晨空腹灌胃，連續(xù)灌胃5d，于首次給受試物起，喂養(yǎng)35d。喂養(yǎng)結(jié)束后頸椎脫臼處死小鼠，取雙側(cè)副睪中精子涂片，染色后鏡檢精子細(xì)胞數(shù)，計(jì)數(shù)畸形細(xì)胞數(shù)并分類，結(jié)果用γ²檢驗(yàn)進(jìn)行比較。
　　1.2.4 Ames試驗(yàn)　設(shè)5000、1000、200、40μg/皿4個(gè)劑量組，采用摻入法，加S或不加S進(jìn)行試驗(yàn)。
　　1.2.5 30d喂養(yǎng)試驗(yàn)　SD斷乳大鼠80只，隨機(jī)分成4組，每組20只，雌雄各半，設(shè)1個(gè)陰性對(duì)照組及3個(gè)試驗(yàn)劑量組(2.5、5.0、10.0g/kg)，連續(xù)喂養(yǎng)30d。所有動(dòng)物每7d稱重1次。試驗(yàn)結(jié)束，取血檢測(cè)各項(xiàng)生化指標(biāo)，取肝、腎、睪丸組織作病理學(xué)檢查。
　　1.2.6傳統(tǒng)致畸試驗(yàn)　SD純系健康成年大鼠120只。未交配過的雌性大鼠80只，雄性40只。大鼠按1：1同籠后，于次日晨陰道涂片，確定受孕大鼠及受孕日期，隨機(jī)分配至4個(gè)受試組。于受孕后第7～16d，自由進(jìn)食各組配方粉狀飼料，定期稱體重。第20d乙醚麻醉處死，剖腹取出子宮稱重，檢查胚胎著床數(shù)、吸收胎、早死胎、遲死胎及活胎數(shù)，對(duì)存活胎鼠進(jìn)行外觀畸形，性別檢查。測(cè)量每只活胎鼠的體重，身長(zhǎng)及胎盤重，并將每窩活胎鼠1/2制作骨骼標(biāo)本及骨骼檢查，另1/2固定后進(jìn)行內(nèi)臟檢查。
　　1.2.7數(shù)據(jù)分析與處理　試驗(yàn)結(jié)果均采用SPSS軟件進(jìn)行檢驗(yàn)。
　　
　　2、結(jié)果
　　
　　2.1急性毒性試驗(yàn)　大、小鼠動(dòng)物試驗(yàn)期間無死亡，LD⁵⁰>10g/kg·bw。按急性毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)評(píng)價(jià)，屬無毒級(jí)。
　　
　　2.2骨髓微核試驗(yàn)陽性對(duì)照組與陰性對(duì)照組比較，差異有高度顯著性(P<0.01)，說明本試驗(yàn)方法是可靠的。各試驗(yàn)組與陰性對(duì)照組比較差異無顯著性(P>0.05)，試驗(yàn)結(jié)果為陰性，即在所測(cè)試水平，樣品對(duì)昆明種小鼠沒有精子致畸作用。見表1。
　　
　　
價(jià)值外，有必要對(duì)其進(jìn)行深入的藥物及食物的開發(fā)研究。本項(xiàng)目的研究首次報(bào)道塔拉豆粉的安全性。按GBl5193—94《食品安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)程序和方法》對(duì)塔拉豆粉進(jìn)行急性毒性試驗(yàn)、小鼠骨髓細(xì)胞微核試驗(yàn)、Ames試驗(yàn)、小鼠精子畸形試驗(yàn)、大鼠30d喂養(yǎng)試驗(yàn)及傳統(tǒng)致畸試驗(yàn)。結(jié)果表明，急性毒性實(shí)驗(yàn)中動(dòng)物均無明顯中毒反應(yīng)，無死亡，塔拉豆粉對(duì)雌雄大、小鼠經(jīng)口LD均大于10．0g/kg體重，根據(jù)毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，屬無毒級(jí)。大鼠30d喂養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)果表明，塔拉豆粉對(duì)動(dòng)物不產(chǎn)生明顯毒性作用，對(duì)大鼠體重、進(jìn)食量、食物利用率、血象、血生化均無明顯影響，大體解剖及組織學(xué)觀察也未見異常病理改變。大鼠傳統(tǒng)致畸試驗(yàn)結(jié)果表明，對(duì)孕鼠平均活胎數(shù)、窩重、身長(zhǎng)、體重和胎盤、胎鼠骨骼發(fā)育及胎鼠內(nèi)臟檢查均未見異常。
　　綜合以上分析結(jié)果可以看出，該產(chǎn)品無毒且具有較高的食用安全