陰道超聲對人早孕胚胎絨毛超微結構的影響及其可復性的研究

摘 要 目的:探討陰道超聲對人早孕胚胎超微結構的影響及其可復性。方法:取符合條件的擬行人工流產的患者30例，隨機分為3組，A組(對照組)6例經腹部超聲輻射1分鐘后24～32小時行人流術取標本，B組12例與C組12例經陰道超聲輻射10分鐘后分別于24～32小時和7天行人流術取標本。所有標本均經2.5%戊二醛前固定、鋨酸后固定、鉛染色后在透射電鏡下觀察絨毛超微結構的改變。結果:A組12例標本均未見絨毛超微結構病理改變;B組其中11例出現絨毛超微結構病理改變，1例基本正常;C組其中4例出現絨毛超微結構病理改變，8例基本正常。A組與B組、B組與C組比較差異均有統計學意義(P<0.05);A組與C組比較差異無統計學意義(P>0.05)。結論:陰道超聲持續輻射可對人早孕胚胎絨毛超微結構產生影響，該影響具有可復性。

關鍵詞 陰道超聲 絨毛組織 微結構

doi:10.3969/j.issn.1007-614x.2010.12.077

資料與方法

2008年8月～2009年6月收治要求人工流產的患者30例。將患者隨機分為3組，經頻率為7.5MHz陰道超聲持續輻射孕囊后采用常規負壓吸引術終止妊娠收集絨毛標本。A組(6例)經腹部超聲照射1分鐘后24～32小時行人流術取標本，B組(12例)經腹部超聲照射10分鐘后24～32小時行人流術取標本，C組(12例):經腹部超聲照射10分鐘后7天行人流術取標本。

方法:人流術后立即將絨毛用生理鹽水沖洗干凈，要求動作輕柔，并在1分鐘內迅速放入2.5%戊二醛前固定液中固定，放4℃冰箱中恒溫保存。隨后送廣州中山大學醫學院經鋨酸后固定、鉛染色后利用hlips CM10 透射電子顯微鏡觀察胚胎絨毛超微結構的改變。

統計學方法:百分率比較采用四格表的Fisher確切概率法，檢驗水準α=0.05。

結 果

A組(對照組)6例合體滋養層、細胞滋養層、間充質結構清晰，表面微絨毛排列整齊，分布均勻，粗細基本一致;胞質內見大量的分布均勻的粗面內質網，內質網腔正常，溶酶體大小、數量基本一致;線粒體發達、分布均勻一致;細胞核正常。B組11例出現微絨毛排列紊亂，部分微絨毛斷裂、丟失，合體滋養層細胞核腫脹，空泡現象嚴重，胞漿空泡化，粗面內質網擴張，線粒體腫脹，界限不清，部分出現細胞膜破裂，細胞滋養層細胞腫脹，胞漿空泡化，細胞器擴張，糖原增多，個別間充質細胞粗面內質網腫脹，細胞膜破裂，胞漿外溢，細胞器外露;1例微絨毛結構基本正常。C組12例中4例合體滋養層細胞膜破裂、細胞器腫脹、細胞核裸露、微絨毛脫落消失;其余8例微絨毛結構基本正常。結果見表1、圖1。

圖1 各組患者絨毛細胞

經四格表確切概率法檢驗，A組與B組比較，有顯著統計學差異(P<0.05)，說明陰道超聲持續輻射10分鐘可引起人類早孕胚胎絨毛超微結構的改變，對其有影響;A組與C組比較，無顯著統計學差異(P>0.05)，說明陰道超聲持續輻射10分鐘后7天人類早孕胚胎絨毛超微結構與正常相類似，無明顯改變;B組與C組比較，有顯著統計學差異(P<0.05)，說明陰道超聲持續輻射10分鐘對人類早孕胚胎絨毛超微結構的影響7天后大多可以自行修復。

討 論

超聲可激活哺乳動物細胞內空化核產生空化反應^[1]，在局部產生大量自由基。正常情況下，體內的抗氧化酶系統中的主要成員超氧化物歧化酶(SOD)可清除體內自由基，對機體起保護作用^[2]。由于理化因素影響使自由基產生過多，SOD活性下降^[3]，清除自由基能力降低，大量堆積的自由基可使細胞膜上的多不飽和脂肪酸發生脂質過氧化反應，脂質過氧化可使細胞膜通透性增強，線粒體膨脹，酶失活等，導致細胞的多發性損傷。早孕胚胎絨毛來源于滋養層，是受精卵有絲分裂而形成的衍生物，具有與胚胎及胎兒同樣的遺傳信息，是維持早孕胚胎發育的重要組織，一旦絨毛出現損傷，則將對胎兒有近期或遠期影響^[4]。本研究選用經陰道超聲輻照人早孕胚胎后于不同時間行人流術后獲取絨毛標本，通過透射電鏡觀察絨毛超微結構，結果表明，經陰道超聲輻射經陰道超聲照射10分鐘后24～32小時所取的標本出現細胞超微結構的改變，如出現微絨毛排列紊亂，部分微絨毛斷裂、丟失;合體滋養層細胞核腫脹、空泡現象嚴重、胞漿空泡化，粗面內質網擴張、線粒體腫脹、界限不清，部分出現細胞膜破裂;細胞滋養層細胞腫脹，胞漿空泡化，細胞器擴張，糖原增多;個別間充質細胞粗面內質網腫脹，細胞膜破裂，胞漿外溢，細胞器外露。說明早期妊娠接受一定超聲劑量時，就會引起組織、細胞的損傷。這可能是因為受一定超聲劑量的影響，絨毛組織內自由基產生過多，SOD活性下降，清除氧自由基的能力降低、脂質過氧化增強，代謝產物增多，導致細胞改變，線粒體是細胞內生物氧化的主要場所，自由基增多破壞線粒體嵴導致線粒體腫脹等一些列變化。我們選擇經陰道超聲照射10分鐘后于7天取標本，并與24～32小時標本和對照組比較。結果顯示，7天后這種絨毛組織超微結構的損傷性改變已明顯恢復，表明這種損傷隨著時間的推移，在很大程度上是可逆的。這可能與機體內SOD將脂質過氧化逐漸修復有關。

此外，曾有報道經陰道超聲照射后早孕絨毛組織在生化功能、DNA、細胞凋亡等方面發生改變。迄今為止的研究表明，經陰道超聲對早孕絨毛超微結構的影響是存在的，其影響是否完全可復尚需進一步研究。我們認為陰道超聲應用仍應采取謹慎態度，同時應盡量縮短檢查時間來獲取最準確的診斷信息，從而將可能由陰道超聲輻照引起的不良反應降到最低。

參考文獻

1 Lee CS，Frizzel LA.Exposoure levels for ultrasounic cavitation in the mouse neonate.Ultrasound Med Biol，1988，14:735.

2 高怡，高云華，楊浩，等.超聲波對早孕絨毛膜超微結構的影響.中華婦產科雜志，1996，31:1561.

3 鞏巖，張蘊，王景，等.診斷劑量超聲波對宮內胚胎安全性的研究.中國超聲醫學雜志，1989，5:1001.

4 王敦禮，紀旭東，鄭郯，等.常規診斷用B超對早孕絨毛組織影響的研究.中國超聲醫學雜志，1985，11:9281.