乙肝標(biāo)志物檢測(cè)標(biāo)本存放時(shí)間的對(duì)比分析

doi:10.3969/j.issn.1007-614x.2010.15.157

資料與方法

一般資料:所有標(biāo)本來自本院門診及住院患者清晨空腹血，采用密閉真空管采血，3000轉(zhuǎn)/分離心分離血清，選用無(wú)脂血，無(wú)溶血標(biāo)本，年齡10～55歲，男252例，女230例。根據(jù)患者初次檢測(cè)S/CO值的高低分為4組。A組為弱陽(yáng)性組，HBsAg，抗HBs、HBeAg的S/CO值為1～3。抗HBe、抗HBc的S/CO值0.35～1，共125例。B組為強(qiáng)陽(yáng)性組，HBsAg、抗HBs，HBeAg S/CO值均>3，抗HBe、抗HBc的S/CO值<0.35，共130例。C組患者與A組一致，共132例。D組為強(qiáng)陽(yáng)性和弱陽(yáng)性混合組共95例。A、B兩組室溫保存，C組2～6℃冰箱保存，D組-20℃冰凍保存。

實(shí)驗(yàn)方法:檢測(cè)儀器為酶標(biāo)分析儀。HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe、抗HBc檢測(cè)試劑盒。ELISA法，操作步驟按試劑盒說明書進(jìn)行。A組血清標(biāo)本分別在采血當(dāng)天，室溫存放至第5天、第9天各檢測(cè)一次。B組血清分別在采血當(dāng)天、第7天、第14各檢測(cè)1次。C組血清標(biāo)本分別在采血當(dāng)天，4～8℃冰箱保存至第7天，第14天各檢測(cè)1次。D組血清標(biāo)本在-20℃冰箱冰凍保存3個(gè)月后，各檢測(cè)1次。檢測(cè)結(jié)果用S/CO值表示，S為樣品的A值，CO為切點(diǎn)值，HBsAg、抗HBs、HBeAg以S/CO≥1為陽(yáng)性，抗HBe、抗HBc以S/CO<1為陽(yáng)性。

結(jié) 果

A組血清標(biāo)本室溫保存結(jié)果:5天時(shí)，抗HBs S/CO值開始下降有2例弱陽(yáng)性標(biāo)本變?yōu)殛幮?S/C0值<1)，HBsAg、HBeAg第5天開始不同程度下降，部分S/CO值下降明顯，抗HBe、抗HBc值第7天開始上升，隨存放時(shí)間HBV標(biāo)志物陽(yáng)性變化情況，見表1。

B組血清標(biāo)本室溫保存結(jié)果:保存1周時(shí)各項(xiàng)標(biāo)志物陽(yáng)性數(shù)無(wú)變化;第2周時(shí)有1例抗HBs變?yōu)殛幮裕渌?yáng)性例數(shù)無(wú)變化，但HBsAg、抗HBs、HBeAg S/CO值開始下降，抗HBe抗HBc S/CO值開始上升。

C組血清標(biāo)本2～6℃保存結(jié)果:冰箱貯存7天時(shí)，抗HBs、S/CO值開始下降，有2例弱陽(yáng)性標(biāo)本已變?yōu)殛幮裕琀BsAg、HBeAg、S/CO值貯存14天開始下降，抗HBe、抗HBc值貯存14天開始上升，其HBV標(biāo)志物陽(yáng)性變化，見表2。

D組血清標(biāo)本在-20℃冰凍保存3個(gè)月后，各項(xiàng)目S/CO值變化很小，陽(yáng)性例數(shù)無(wú)變化。

討 論

從結(jié)果來看，通常在不知道血清HBV各標(biāo)志物含量高低的情況下，室溫放置只能保存3天。5天時(shí)弱陽(yáng)性的抗HBs已經(jīng)轉(zhuǎn)陰。2～6℃冰箱保存的標(biāo)本只能放置5天，7天時(shí)其弱陽(yáng)性標(biāo)本S/CO值會(huì)下降，尤其是抗HBs出現(xiàn)假陰性結(jié)果引起漏檢。所以根據(jù)工作實(shí)際，在當(dāng)日對(duì)HBV標(biāo)志物不能檢測(cè)者，應(yīng)將標(biāo)本在2～6℃的冰箱內(nèi)保存，最長(zhǎng)不得超過5天，即應(yīng)于5天之內(nèi)完成檢測(cè)。另外，由于標(biāo)本在冰箱保存時(shí)間過長(zhǎng)易導(dǎo)致血清IgG聚合，使ELISA間接法在顯色時(shí)本底加深。故對(duì)于一些需要長(zhǎng)時(shí)間保存的標(biāo)本或有可疑結(jié)果，需要在以后較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)重新復(fù)檢的標(biāo)本，都應(yīng)于-20℃冰凍保存，以盡可能做到與新鮮檢測(cè)標(biāo)本結(jié)果一致。

參考文獻(xiàn)

1 葉應(yīng)嫵，王毓三.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程.第3版.南京:東南大學(xué)出版社，2006:10.

2 孫榮武，王鴻利.臨床實(shí)驗(yàn)室診斷學(xué).上海:上海科學(xué)技術(shù)出版社，2001:4.