棗木葡聚糖轉(zhuǎn)移酶基因的表達(dá)分析

摘 要：為研究木葡聚糖內(nèi)糖基轉(zhuǎn)移酶（XTH）與棗果實(shí)生長及成熟軟化的關(guān)系，采用普通PCR及3’ RACE擴(kuò)增技術(shù)，從鮮棗品種梨棗和沾化冬棗中均克隆到XTH基因的部分序列；同時(shí)，利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)，研究了2個(gè)鮮棗品種的不同生長期其采后常溫貯藏過程中XTH基因的相對表達(dá)量的變化。結(jié)果表明，從梨棗和沾化冬棗中克隆的XTH基因片段均為776 bp，包含636 bp的開放閱讀框，編碼212個(gè)氨基酸，分別命名為ZjXTH1和ZjXTH2（登錄號分別為：HQ896312和HQ896313）。通過Blastn和Blastp對序列同源性進(jìn)行比對分析，ZjXTH基因與已登錄的其他物種的XTH基因相似性在68%～78%。實(shí)時(shí)定量PCR表達(dá)分析表明，ZjXTH基因的表達(dá)從盛花后51 d開始積累，并且在棗果實(shí)成熟軟化過程中的表達(dá)量顯著高于果實(shí)的生長期。梨棗ZjXTH1基因在采后貯藏中呈現(xiàn)“上升-下降-上升”的變化規(guī)律，在果實(shí)轉(zhuǎn)為全紅以及后期迅速軟化時(shí)表達(dá)量均較高。沾化冬棗ZjXTH2基因在采后貯藏中呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢，在果實(shí)轉(zhuǎn)為全紅時(shí)表達(dá)量最高。研究結(jié)果說明，XTH基因在棗果實(shí)的成熟軟化中可能起著一定的促進(jìn)作用。

關(guān)鍵詞： 棗果實(shí)； XTH基因； 實(shí)時(shí)熒光定量PCR

中圖分類號：Ｓ６６5．1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：Ａ 文章編號：１００９－９９８０?穴２０11?雪０6－998－０7

Cloning and expression analysis of xyloglucan endotransglucosy- lase/hydrolase (XTH) gene in jujube fruit

LV Yan-rong，REN Xiao-lin*

（College of Horticulture， Northwest A F University， Yangling， Shaanxi 712100 China）

Abstract: In order to study the relationship of Xyloglucan endotransglucosylase/hydrolase (XTH) and fruit growth and softening in two jujube （Ziziphus jujuba M.） cultivars， Li jujube and Zhanhua Dong jujube， two partial XTH cDNA sequences were obtained by 3 RACE， and the expression of XTH genes during fruit growth and ripening at the room temperature was investigated by real-time quantitative PCR （RT-qPCR）approach. The results showed that， the two partial XTH cDNA sequences named ZJXTH1 (GenBank accession number: HQ896312) and ZJXTH2 (GenBank accession number: HQ896313) were 776bp， containing 636 bp ORF and coding 212 amino acids. The results of homologous analysis in GenBank demonstrated that the ZJXTH sequences were 68% to 78% identical with those of other plants on the nucleotide sequences and the deduced amino acid sequences. The expression of ZJXTH genes accumulated since 51 days after flowering in both jujube cultivars and was markedly higher during the fruit ripen and storage than the growth period. The ZJXTH1 expression displayed up-down-up trend during the storage， and the maximums appeared in the fruit turning red and rapidly softening period. The ZJXTH2 expression displayed up-down trend during the storage， and the maximum appeared in the fruit turning red period. All these results suggest that the XTH gene might play a promoting role in the jujube fruit ripeness and softening process.

Key words: Jujube fruit； XTH gene； Real-time PCR

果實(shí)的成熟衰老與細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)的變化密切相關(guān)，而開花植物的細(xì)胞壁主要由纖維素、半纖維素、果膠和一些結(jié)構(gòu)蛋白組成[1]。木葡聚糖是雙子葉植物初生壁中含量最豐富的半纖維素，這種長鏈的多糖能夠與纖維素微纖絲形成氫鍵，可以對相鄰的微纖絲分子進(jìn)行約束和支撐[2]。改變木葡聚糖的交叉連接結(jié)構(gòu)，可能直接或間接的對纖維素-木葡聚糖交聯(lián)網(wǎng)絡(luò)的松弛產(chǎn)生一定影響[3]，從而引起細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)的變化。20世紀(jì)70年代，Albersheim等[4]提出一種假說，在細(xì)胞伸長和膨脹時(shí)，存在一種糖基轉(zhuǎn)移酶，它可以使木葡聚糖的一部分與自身連接。Nishitani等[5]在研究豌豆（Pisum sativum）莖的伸長時(shí)發(fā)現(xiàn)并分離出這種酶。2001年第9 屆國際細(xì)胞壁研討會(huì)上，將這種糖基轉(zhuǎn)移酶定名為木葡聚糖內(nèi)糖基轉(zhuǎn)移酶/ 水解酶（xyloglucan endotransglucosylase/hydrolase， XTH）[6]。木葡聚糖內(nèi)糖基轉(zhuǎn)移酶/水解酶（XTH）屬于糖苷水解酶家族16的成員，它具有轉(zhuǎn)糖基酶（XET）和水解酶（XEH）的雙重作用，可以通過調(diào)控木葡聚糖代謝引起細(xì)胞壁的松弛[7-8]，從而促進(jìn)果實(shí)的衰老軟化。已有研究也表明，XTH與細(xì)胞的伸長[9-10]、細(xì)胞壁的延展性[11]有密切關(guān)系。目前，已經(jīng)在獼猴桃[12]、蘋果[13]、砂梨[14]、番茄[15]、荔枝[16]、草莓[17]、龍眼[18]等果實(shí)中克隆到XTH基因，這些研究還表明，XTH在果實(shí)的成熟及軟化過程中起到一定的作用。

棗（Ziziphus jujuba Mill.）是中國重要的特色果樹，以其果肉脆甜、營養(yǎng)價(jià)值高而深受消費(fèi)者的喜愛，但是貯存和運(yùn)輸過程中，鮮棗容易發(fā)生酒軟、霉變等，這一直是實(shí)際生產(chǎn)中的一大難題。梨棗和沾化冬棗是生產(chǎn)中較普遍的栽培品種，梨棗果實(shí)較大，但果肉質(zhì)地不如沾化冬棗細(xì)嫩，且采后沾化冬棗的果肉軟化的進(jìn)程較慢，耐儲(chǔ)性更好。我們梨棗和沾化冬棗果實(shí)為試材，克隆到XTH基因的部分序列并對果實(shí)生長及成熟衰老過程中該基因的表達(dá)規(guī)律進(jìn)行分析，從而為研究XTH基因在棗果實(shí)軟化過程中的作用及分子調(diào)控機(jī)理提供一定的理論依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)材料梨棗和沾化冬棗均取自陜西高陵一個(gè)管理良好的、有12 a樹齡的棗園，選取長勢良好的棗樹為試材，單株為1個(gè)重復(fù)，重復(fù)3次，分別在盛花期后的第30、37、51、65、79天采集生長期果實(shí)。2010年9月18日（盛花期后第95天）采集成熟果實(shí)，采后當(dāng)天運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室，挑選大小基本一致、無病蟲害、無機(jī)械損傷的果實(shí)為試材，用0.03 mm的PVC薄膜袋分裝，每袋0.5 kg，室溫（20±1）℃貯藏，定期隨機(jī)取樣。各時(shí)期樣品重復(fù)3次，每個(gè)重復(fù)取10個(gè)果實(shí)。各時(shí)期果實(shí)樣品均先切成小塊，液氮速凍后置于-70 ℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 棗果實(shí)總RNA的提取及cDNA的合成

參照宋蓓等[19]的改良CTAB-LiCl方法提取幼果期（盛花后37 d）果實(shí)的總RNA。cDNA第1鏈的合成按照寶生物公司的TaKaRa反轉(zhuǎn)錄試劑盒說明書進(jìn)行，反應(yīng)條件為：42 ℃ 15 min，85 ℃ 5 s，然后置于冰上急速冷卻，-20 ℃保存。

1.3 XTH基因的克隆、測序及生物信息學(xué)分析

參照砂梨果實(shí)[14]上的XTH簡并引物X1和X2[上游引物X1： 5’-GGNDATTCTGCTGG（A/C/G）AC （C/T）GT-3’；下游引物X2：5’-GT（A/G/T）GCCCA（A/G）TCNTCNGC（A/G）TTC-3’]進(jìn)行PCR擴(kuò)增，反應(yīng)條件為：94 ℃預(yù)變性 3 min；94 ℃變性 40 s，47.3 ℃退火 40 s，72 ℃延伸 1 min，35個(gè)循環(huán)；最后72 ℃ 延伸10 min獲得基因部分片段。根據(jù)測序結(jié)果和寶生物公司的TaKaRa 3’ Full RACE Core Set Ver. 2. 0試劑盒中特異引物設(shè)計(jì)要求，設(shè)計(jì)XTHl的特異引物GSP1和GSP2（GSP1:5’ -TGTCACTGCCTATTAT TT ACGCTC-3’; GSP2: 5’ -CACAAGGGAAAGGAGACAGAGAGC-3’），均由上海捷瑞生物工程有限公司合成。3’ RACE擴(kuò)增參照寶生物公司的TaKaRa 3’ Full RACE Core Set Ver. 2. 0試劑盒說明書進(jìn)行操作，采用50 μL的反應(yīng)體系。首先用GSP1和試劑盒中的Outer引物進(jìn)行第1輪PCR擴(kuò)增，反應(yīng)條件為：94 ℃ 預(yù)變性3 min；94 ℃變性40 s，57.5 ℃退火40 s，72 ℃延伸1 min，35個(gè)循環(huán)；最后72℃延伸10 min。取7 μL的反應(yīng)液進(jìn)行1%瓊脂糖凝膠電泳，對目的條帶則進(jìn)行回收。

目的基因片段的回收均采用天根公司的膠回收試劑盒，取5 μL DNA回收產(chǎn)物，連入pMD-19T載體，轉(zhuǎn)化Top10大腸桿菌菌株，藍(lán)白斑篩選后，挑白色單菌落進(jìn)行菌落PCR檢測，對含有目的基因的單菌落用液體LB（+Amp）進(jìn)行37 ℃搖菌，然后對菌液進(jìn)行測序。

將測序得到的3’ RACE結(jié)果與簡并引物得到的序列拼接，然后在NCBI中利用Blastn對核苷酸序列進(jìn)行比對分析，用Blastp及ExPASy在線分析軟件對推導(dǎo)的氨基酸序列進(jìn)行分析。

1.4 基因?qū)崟r(shí)熒光定量PCR分析

參照宋蓓等[19]的改良CTAB-LiCl方法提取各時(shí)期果實(shí)的總RNA。cDNA第1鏈的合成按照寶生物公司的TaKaRa反轉(zhuǎn)錄試劑盒說明書進(jìn)行。總RNA的純化首先用DnaseⅠ和RNase inhibitor參照宋蓓等[19]總RNA的純化方法進(jìn)行，采用50 μL酶解體系：20 μL總RNA、2 μL 5 U·μL-1的DNaseⅠ、5 μL 10×DNaseⅠBuffer、0.5 μL 40 U·μL-1的RNase Inhibitor，加入22.5 μL DEPC 水補(bǔ)足50 μL。純化后的總RNA根據(jù)測定OD值確定RNA的濃度和純度。第一步反轉(zhuǎn)錄時(shí)按照10 μL體系中包含500 ng的總RNA量進(jìn)行。對反轉(zhuǎn)錄的cDNA測定OD值，再次確定cDNA的濃度和純度，然后用滅菌的雙蒸水對cDNA進(jìn)行稀釋，達(dá)到約300 mg·L-1的終濃度。

以棗histone3（His3）基因?yàn)閮?nèi)參（登錄號為：EU916201），設(shè)計(jì)特異引物H1和H2（H1: 5’ -CCA GCTTGCTCGTAGAATTAGG-3’； H2: 5’-AACAGATAAACACGCAGATTGA-3’）。根據(jù)棗果實(shí)XTH基因測序結(jié)果，分別設(shè)計(jì)梨棗和冬棗實(shí)時(shí)定量特異引物P1和P2（P1: 5’ -TGTCACTGCCTATTATTTACGCT-3’； P2: 5’ -TTGTTGCTCTCTGTCTCCTTTCC-3’）、P3和P4（P3: 5’-GGAAAGGAGACAGAGAGC AACAA-3’；P4: 5’-GGAGTCCCATCAACATAGAAAAC-3’），對各對引物均進(jìn)行PCR擴(kuò)增（反應(yīng)條件中退火溫度分別為55.5、56.5、56 ℃，其他條件X1和X2的PCR擴(kuò)增程序），目的片段回收、測序，以確定目的片段序列正確。

實(shí)時(shí)熒光定量PCR用iCycler iQ5 實(shí)時(shí)定量PCR 儀器（Bio-Rad，美國）進(jìn)行。反應(yīng)體系為20 μL，其中包含：10.0 μL SYBR Premix Ex TaqTM II（TaKaRa），1.0 μL 稀釋后的cDNA，7.4 μL ddH2O，上下游引物各0.8 μL（引物濃度10 mol·L-1）。運(yùn)行程序?yàn)椋?5 ℃預(yù)變性2 min，95 ℃變性30 s，56 ℃退火30 s，72 ℃延伸30 s，35次循環(huán)。每個(gè)樣品3次重復(fù)。

根據(jù) Livak等[20]的2-△△CT 公式計(jì)算基因相對表達(dá)量，其中△△CT =（CT目標(biāo)基因-CT內(nèi)參基因）Time x-（CT目標(biāo)基因-CT內(nèi)參基因）Time 0。CT目標(biāo)基因和CT內(nèi)參基因分別是目標(biāo)基因和內(nèi)參基因的CT值；Time x指留樣不同時(shí)間點(diǎn)，Time 0指采收當(dāng)天，以采收當(dāng)天的樣品作為參照，將其目標(biāo)基因的表達(dá)量值轉(zhuǎn)化為1，其他各時(shí)期的目標(biāo)基因的表達(dá)量與其比較，從而獲得目標(biāo)基因在各采樣時(shí)期的相對表達(dá)量的差異。

2 結(jié)果與分析

2.1 XTH基因片段的獲得

本試驗(yàn)采用改良CTAB方法提取棗果實(shí)的總RNA，1%瓊脂糖凝膠電泳分析表明，28S與18S條帶清晰，無拖尾，且D260 nm/D280 nm為2.10左右，說明提取的總RNA結(jié)構(gòu)完整且純度較高，符合反轉(zhuǎn)錄的要求。通過簡并引物對梨棗和沾化冬棗的反轉(zhuǎn)錄cDNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，均得到了約350 bp的條帶（圖1）。將2個(gè)品種目的片段的測序結(jié)果通過Blastn比對，結(jié)果表明2者與蘋果XTH8基因（序列號：EU494967）的核苷酸序列相似性均為77%，與番茄XTH3基因（序列號：AY497476）相似性分別為77%和76%，從而認(rèn)為所獲得的片段為棗果實(shí)XTH基因的一部分。

2.2 XTH基因3’端的獲得

運(yùn)用設(shè)計(jì)的3’ RACE Outer引物以及TaKaRa試劑盒中包含的Outer引物，分別對梨棗和沾化冬棗進(jìn)行PCR擴(kuò)增，均得到了長約800 bp的目的條帶（圖2），將目的條帶連入pMD-19T載體進(jìn)行測序，結(jié)果表明，2條目的片段均為759 bp，且都包含明顯的Poly（A）結(jié)構(gòu)，從而表明，克隆到了XTH基因的3’末端。

將獲得的3’RACE所得序列與保守序列拼接后，刪除重疊區(qū)域，從而得到梨棗和沾化冬棗的XTH3’端均為776 bp的核苷酸序列，分別命名為ZJXTH1（登錄號：HQ896312）和ZJXTH2（登錄號：HQ896313）。這2個(gè)序列均包含636 bp的開放閱讀框和140 bp的3’端非編碼區(qū)，編碼212個(gè)氨基酸。

2.3 棗果實(shí)3’端XTH基因核苷酸序列與推導(dǎo)的氨基酸序列同源性分析

通過DNAMAN對獲得的ZJXTH1和ZJXTH2的核苷酸序列及推導(dǎo)的氨基酸序列進(jìn)行比對，結(jié)果表明2者的相似度均為99%。運(yùn)用GenBank中的Blastn對ZJXTH1和ZJXTH2的核苷酸序列與已有的其他物種進(jìn)行相似性分析，結(jié)果表明，2者與雜種月季RhXTH2（AB428379）的相似性分別為76%和75%，與蘋果XTH8（EU494967）和番茄XTH3（AY497476）的相似性均為75%，與長葉獼猴桃XTH9（EU494954）的相似性均為74%。通過Blastp對ZJXTH1和ZJXTH2推導(dǎo)的氨基酸序列分析，ZJXTH1與蘋果MdXTH2（AAN07898）、甜瓜XTH2（ABI94062）、長葉獼猴桃XTH9（ACD03219）、野芭蕉XET（ABL10090）和荔枝XET3（ABK30789）的相似度分別為 78%、75%、76%、71%和69%（圖3），ZJXTH2與上述5個(gè)物種的相似度分別為76%、74%、75%、71%和68%。

通過ExPASy在線分析表明，ZJXTH1和ZJXTH2推導(dǎo)的氨基酸序列屬于糖苷水解酶家族16的成員，均含有保守的序列模塊（GH16-XET）：E-[L I V]-D-[L I V F]-x（0，1）-E-x（2）-[G Q]-[K R N F]-x-[P S T A]（圖3），其中的2個(gè)谷氨酸（E）是活性位點(diǎn)。另外，通過Blastp分析還表明，得到的2個(gè)基因C端均含有XET-C模塊（圖3），由C端的將近60個(gè)堿基翻譯的氨基酸組成。

2.4 棗果實(shí)生長及采后常溫貯藏過程中硬度的變化

由圖4-A可知，在果實(shí)生長過程中，梨棗硬度呈先升高后下降的趨勢，在盛花后37 d硬度達(dá)到最大，隨著果實(shí)的生長，硬度逐漸下降；沾化冬棗硬度在盛花后30 d硬度最大，之后的7 d有明顯下降，隨著果實(shí)的生長，硬度基本穩(wěn)定。

由圖4-B可知，果實(shí)采收后，梨棗和沾化冬棗硬度總體均呈下降的趨勢，但后期梨棗硬度下降更迅速。前期貯藏過程中，梨棗硬度呈平緩的下降趨勢，第7天時(shí)果實(shí)已經(jīng)變?yōu)槿t，但此時(shí)硬度還沒有顯著變化。第10天時(shí)硬度顯著下降，且果實(shí)開始呈現(xiàn)酒軟的狀態(tài)，到采后第12天果實(shí)完全酒軟，硬度降至最低。沾化冬棗貯藏初期（至第6天）硬度略顯下降，隨后的2周硬度基本保持，第20天時(shí)果實(shí)基本達(dá)到全紅，果實(shí)硬度開始呈現(xiàn)下降趨勢，直到采后28 d多數(shù)果實(shí)呈現(xiàn)酒軟，硬度降至最低。

2.5 棗果實(shí)生長及采后常溫貯藏過程中XTH基因相對表達(dá)量的變化

由圖5可知，在梨棗果實(shí)生長過程中，XTH基因的表達(dá)從盛花后51 d開始積累，呈緩慢上升的趨勢，盛花后第79天達(dá)到高峰，且與采收當(dāng)天的表達(dá)量接近。采后常溫貯藏過程中，XTH基因的表達(dá)呈波動(dòng)性“上升-下降-上升”的變化趨勢，貯藏第6天表達(dá)量達(dá)到前期峰值，是采收當(dāng)天的11.3倍，之后表達(dá)量逐漸下降，在采后第10天時(shí)降至最低；隨著果實(shí)的逐步衰老，XTH基因的表達(dá)又呈現(xiàn)上升趨勢，到采后第12天時(shí)達(dá)到后期的表達(dá)高峰，是采收當(dāng)天的9.3倍。

從圖6可以看出，在沾化冬棗生長過程中，XTH基因的表達(dá)也從盛花后51 d開始積累，但整個(gè)生長期表達(dá)量均較低。隨著果實(shí)的成熟，該基因的表達(dá)才逐漸增加。采后常溫貯藏中，XTH基因的表達(dá)整體呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢。采后0～9天，XTH基因的表達(dá)緩慢上升，在采后15 d時(shí)，表達(dá)量顯著增加達(dá)到采收當(dāng)天的5.3倍，在后期的貯藏過程中，表達(dá)量逐漸降低，直到采后27 d降為采收當(dāng)天的1.7倍。

3 討 論

XTH屬于多基因家族，目前已有較多研究者對XTH基因不同家族成員在果實(shí)成熟軟化中的作用進(jìn)行探索。本試驗(yàn)從棗的2個(gè)鮮食品種中均克隆到了XTH基因的部分序列，2者編碼的氨基酸序列相似度達(dá)99%，與其他物種的相似度也達(dá)到了60%～78%，且2個(gè)XTH基因成員編碼的氨基酸序列的差異均未發(fā)生在保守區(qū)，它們都包含糖苷水解酶家族16的保守序列；同時(shí)，該保守序列也是木葡聚糖轉(zhuǎn)移酶（XET）的保守序列，具有轉(zhuǎn)糖基的作用，從而可以裂解細(xì)胞壁中的木葡聚糖多聚體[7]，因而可能對果實(shí)的軟化起一定的作用。

Goulao等[13]對蘋果的2個(gè)XTH基因（MdXTH1和MdXTH2）研究表明，2個(gè)XTH基因在成熟果實(shí)中均有表達(dá)，但表達(dá)模式有所差異。MdXTH1在葉片、花朵及果實(shí)中持續(xù)表達(dá)，但是在果實(shí)成熟時(shí)表達(dá)量較高；MdXTH2在膨大期果實(shí)中開始積累，果實(shí)成熟時(shí)達(dá)到最大值，隨著果實(shí)的衰老表達(dá)量逐漸降低，在其他組織中表達(dá)量很低。Atkinson等[21]對獼猴桃14個(gè)XTH基因成員的表達(dá)特性研究表明，Ad-XTH4、Ad-XTH5和Ad-XTH7在果實(shí)成熟軟化過程中的表達(dá)量較高，并且在果實(shí)成熟過程中Ad-XTH5和Ad-XTH7均呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢；另外Ah-XTH9在果實(shí)成熟過程中表達(dá)量較低，同時(shí)也呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢。本試驗(yàn)中棗果實(shí)的XTH基因序列與蘋果MdXTH2和獼猴桃Ah-XTH9相似度較高，但是與2者的表達(dá)規(guī)律有所不同。棗果實(shí)ZjXTH基因的表達(dá)從盛花后51 d開始積累，并且在果實(shí)成熟軟化過程中的表達(dá)量顯著高于果實(shí)的生長期，這與獼猴桃Ad-XTH4、Ad-XHT5和Ad-XTH7的表達(dá)模式相似。梨棗ZjXTH1基因的表達(dá)在采后貯藏初期呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢，其中在果實(shí)達(dá)到全紅時(shí)（采后6 d）時(shí)表達(dá)量最高，這與Ah-XTH9的表達(dá)規(guī)律有一定的相似性；貯藏后期，在果實(shí)迅速軟化階段ZjXTH1的表達(dá)量又呈現(xiàn)上升趨勢，這表明ZjXTH1基因可能對梨棗的軟化起到一定的促進(jìn)作用。沾化冬棗ZjXTH2基因的表達(dá)變化規(guī)律與獼猴桃Ad-XHT5和Ad-XTH7相似，在采后果實(shí)的成熟軟化過程中呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢。在采后第16天，ZjXTH2表達(dá)量最高，此時(shí)果實(shí)已有半數(shù)達(dá)到全紅，但果實(shí)硬度并沒有顯著的變化。從采后22 d開始，果實(shí)軟化迅速，ZjXTH2表達(dá)量也略有上升。這些結(jié)果表明，在冬棗軟化前期果實(shí)轉(zhuǎn)紅階段以及果實(shí)后期的迅速軟化階段，ZjXTH2基因均發(fā)揮作用。由上述結(jié)果推測，XTH基因在棗果實(shí)的成熟中對前期果實(shí)顏色的轉(zhuǎn)變和后期果實(shí)的迅速軟化均可能起著一定的促進(jìn)作用，而在果實(shí)的生長過程中的調(diào)控作用不明顯。

通過上述分析，推測XTH基因在棗果實(shí)的成熟軟化中可能起著一定的促進(jìn)作用，而在果實(shí)的生長過程中的調(diào)控作用不明顯。在梨棗和沾化冬棗中，克隆到得2個(gè)XTH基因整體的表達(dá)量變化趨勢相似，但是在果實(shí)軟化的后期也略有差異，這也表明，對于不同的物種抑或是同一物種的不同品種，XTH基因的不同成員的表達(dá)模式及調(diào)控作用也可能會(huì)有差異。由于XTH屬于多基因家族，推測在棗果實(shí)中也應(yīng)該還存在多個(gè)其他的XTH基因的家族成員，因而要全面了解XTH在棗果實(shí)生長及成熟軟化中的調(diào)控機(jī)制，還需其他的XTH家族成員的表達(dá)特性進(jìn)行深入研究。

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