甲狀腺微小乳頭狀癌中MC和TPO的表達及意義

羅巧明 張建

甲狀腺微小乳頭狀癌中MC和TPO的表達及意義

羅巧明 張建

目的 探討甲狀腺微小乳頭狀癌中MC及TPO的表達及意義。方法 采用免疫組化EnVision法檢測21例甲狀腺微小乳頭狀癌中MC和TPO的表達水平。結果 MC在甲狀腺微小乳頭狀癌中呈中至重度陽性表達，只有1例呈弱陽性，而在甲狀腺良性病變中呈陰性或弱陽性表達。甲狀腺微小乳頭狀癌中有18例TPO呈陰性表達，3例呈弱陽性，21例良性病變均呈中至強陽性表達。結論 MC及TPO聯合檢測將進一步提高甲狀腺微小乳頭狀癌診斷的準確性。

甲狀腺腫瘤；微小乳頭狀癌；MC；TPO

甲狀腺微小乳頭狀癌（papillary thyroid microcarcinoma，PTM）是指直徑≤1cm的甲狀腺乳頭狀癌，是甲狀腺乳頭狀癌(papillary thyroid carcinoma，PTC）中常見的亞型之一，由于其體積小，發病隱匿，大體檢查時容易忽略；在組織學中，一些病例中不典型細胞核的改變常導致診斷上的困難。本文通過免疫組織化學染色檢測間皮細胞 (Mesothelial Cell,MC)和甲狀腺過氧化物酶 (Thyroid Peroxidase,TPO)在PTM中的表達水平并探討其在鑒別診斷中的意義。

1 材料與方法

1.1 材料 選擇肇慶市端州區人民醫院病理科2006年10月～2010年10月診斷為PTM的手術切除標本病例21例，男性7例，女性14例；年齡33～69歲，中位年齡50歲。腫瘤組織直徑從0.2～1cm。

1.2 方法 所有標本均經10%中性福爾馬林液固定，常規組織處理，石蠟包埋，連續切片（切片厚4μm），常規HE染色。免疫組織化學采用EnVision二步法進行MC、TPO染色，DAB顯色，蘇木素復染。用診斷明確的甲狀腺乳頭狀癌作為陽性對照，以PBS液代替一抗作為陰性對照。MC（鼠抗單克隆抗體）購自福州邁新公司，TPO（鼠抗單克隆抗體）購自上海太陽生物技術有限公司。

1.3 結果判斷 MC陽性信號定位于細胞膜，TPO陽性信號定位于細胞質內，棕黃色細胞顆粒為陽性。著色根據Beesley[1]分級方法，按陽性細胞所占百分比并參考著色強度確定分級：無明顯陽性細胞或著淺黃色為（-）；陽性細胞數＜25%，顆粒棕黃色為（+）；陽性細胞數25%～50%，顆粒棕黃色為（++）；陽性細胞數＞50%，顆粒深棕色為（+++）。

1.4 統計學處理 應用x2檢驗，并按照《臨床流行病學》[2]介紹的診斷試驗評價計算MC及TPO的敏感度（Sen）、特異度（Spe）、準確度(Acc)。

2 結果

2.1 形態學特征 在21例PTM中，結節性甲狀腺腫（結甲）合并PTM 6例，毒性甲狀腺腫（甲亢）合并PTM 8例，橋本甲狀腺炎合并PTM 3例，甲狀腺腺瘤合并PTM 4例。腫瘤細胞以乳頭狀排列為主12例，以濾泡狀排列為主9例；瘤細胞核呈毛玻璃樣核改變15例， 占71.4%（圖1）；間質明顯膠原化的14例，可見砂粒體的3例。

2.2 MC及TPO的表達 MC在PTM中的陽性表達以中到重度為主，而在良性病變（包括結甲、甲亢、橋本及腺瘤）僅2例陽性，均為弱陽性；TPO在PTM的陽性表達只有3例，均為弱陽性，而在良性病變中均為陽性。MC及TPO在PTM的陽性表達率分別為100%、14.3%，而在良性病變的陽性表達率分別9.5%、100%，兩組比較差異有統計學意義（P＜0.01，表1）。MC及TPO的陽性表達見圖2-4。合應用。

圖1 經典型PTM的毛玻璃樣核(HE, ×)

圖2 MC在PTM瘤細胞胞膜陽性表達（EnVision法, × )

圖3 TPO在PTM中缺表達（EnVision法, × )

圖4 TPO在甲狀腺乳頭狀增生陽性表達（EnVision法, × )

TPO是一種糖基化血紅素蛋白，存在于甲狀腺濾泡細胞游離面，是一種與甲狀腺激素合成相關的酶，在T3T4合成中起重要的催化作用。有學者曾用RT-PCR方法檢測甲狀腺組織中TPOmRNA的表達情況，發現大部分甲狀腺乳頭狀癌、濾泡癌TPOmRNA呈陰性表達，而大部分結節性甲狀腺腫、橋本病和腺瘤TPOmRNA呈陽性表達[7]。由于TPOmRNA方法儀器設備要求高，試劑價格昂貴，操作復雜，不能做組織定位及回顧性分析，在我國基層醫院難以擴廣，因此在甲狀腺癌的診斷與鑒別診斷中的作用不理想。何春年等[8]應用免疫組織化學方法檢測甲狀腺乳頭狀癌、甲狀腺濾泡狀腺瘤及良性乳頭狀病變中TPO的表達情況，其陽性表達率分別為：15.6%、88.9%、100.0%，其敏感度、特異度和準確度分別為：84.4%、94.1%、90.8%。本研究用EnVison法測定PTM及甲狀腺良性病變中TPO的表達，陽性率分別為：14.3%、100.0%，敏感度、特異度和準確度分別為85.7%、100.0%、92.9%，

表1 MC和TPO在PTM與良性病變中的表達情況

2.3 MC與TPO的敏感度、特異度和準確度比較 結果見表2。

表2 MC與TPO的敏感度、特異度和準確度比較（%）

3 討論

PTM通常是由于其他原因切除甲狀腺或尸檢中的偶然發現。本文研究的21例手術病例中，是因為甲亢（8例，占38.1%）、結甲（6例，占28.6%）、腺瘤（4例，占19.0%）及橋本甲狀腺炎（3例，占14.3%）切除甲狀腺而發現PTM的。WHO分類標準[3]，指出PTC細胞核典型特征是：毛玻璃樣核、核重疊、核溝及核內假包涵體。但并非所有PTC都具有上述特征，本文病例中具有毛玻璃樣核特征的15例（71.4%）。在一些良性病變中常見到乳頭狀增生病變，雖然細胞核沒有上述的典型特征，當出現核增大、淡染等不典型性改變；或乳頭狀結構不明顯，細胞核呈空泡狀、出現核溝，就難與乳頭狀癌鑒別。Asioli等[4]分析12例橋本甲狀腺炎中出現的實性細胞巢，細胞核均見核溝，其中10例可見空泡狀核，與PTM很難鑒別。當組織學難以鑒別時，可通過免疫組織化學標記幫助鑒別。

MC是間皮表面微絨毛的抗原成分，主要用于惡性間皮瘤的診斷，近年來應用于甲狀腺腫瘤的鑒別診斷。據文獻報道，MC在PTC中的陽性表達率為100.0%[5]。王儀等[6]研究顯示MC在PTC中的陽性率100.0%，而在甲狀腺濾泡癌的陽性率為87.5%，在PTC中的敏感度更高。本研究中MC的敏感度、特異度及準確度分別為：100.0%、90.5%、95.2%，與文獻報道一致，可見MC在PTM的診斷中敏感度最高，而特異度較差，最好結合其他標記聯與文獻報道相符。

所有抗體均會出現假陽性或假陰性，單項指標應存在局限性。本研究MC在PTM的診斷中敏感度高，特異度不高，而TPO相反，其敏感度不高，特異度高；而且MC和TPO在甲狀腺組織中為反向表達，在實際工作中可將兩種指標聯合應用，可起到相互補充的作用，結合臨床及組織學將進一步提高PTM診斷的準確性。

[1] Beesley MF， Mclaren KM. Cytokeratin19 and galectin-3 inmunohistochemistry in the differential diagnosis of solitary thyroid nodules[J].Histopathology，2002,41(2):236-243.

[2] 王家良.臨床流行病學[M].2版，北京：人民衛生出版社，2004：155-156.

[3] Delellis RA，Lloyd RV， Heitz PU，et al. World Health Organization classification of tumours: pathology and genetics， tumours of endocrine organs[M]. Lyon: IARC Press， 2004: 51-91.

[4] Asioli S， Erickson LA， Lloyd RV. Solid cell nests in Hashimotos thyroiditis sharing features with papillary thyroid microcarcinoma[J]. Endocr Pathol， 2009，20(4):197-203.

[5] Ito Y，Yoshida H， Tomoda C， et al. HBME-1 expression in follicular tumor of the thyroid: an investigation of whether it can be used as a marker to diagnose follicular carcinoma[J]. Anticancer Res， 2005，25(1A):179-82.

[6] 王儀，魏霖，陳昕.Galectin-3，CK19和MC在甲狀腺良、惡性腫瘤中的表達及意義[J].海峽藥學，2007，19：108-110.

[7] 陳云，朱明華，周曉軍，等.甲狀腺濾泡細胞源性腫瘤及病變中鈉碘轉運體mRNA和甲狀腺過氧化物酶mRNA的表達[J].中華醫藥雜志，2003，83（2）：146-147.

[8] 何春年，陳士超，趙煥芬，等.甲狀腺乳頭狀癌診斷與鑒別的可靠標記物[J].臨床與實驗病理學雜志,2007，23（6）：694-698.

Objective To explore the expression and signifi cance of MC and TPO in papillary thyroid microcarcinoma. Methods The expression of MC and TPO was detected by EnVision immunohistochemical method in 21 cases of papillary thyroid microcarcinoma. Results The moderate to strong staining for MC was observed in papillary thyroid microcarcinoma and only one case was mild staining ,but negative to mild in benign thyroid lesions. 18 cases of papillary thyroid microcarcinoma showed negative for TPO and weakly positive in 3 cases, all cases of benign lesions showed medium to stong positive for TPO. Conclusion The combined detection with MC and TPO will further improve the accuracy of papillary thyoid microcarcinoma.

Thyroid tumor ; Papillary microcarcinoma; MC; TPO

10.3969/j.issn.1009-4393.2011.23.006

526060 廣東省肇慶市第二人民醫院（羅巧明 張建）