兔尾草化學成分的研究

楊小良， 思秀玲， 曲 磊， 嚴紫成， 許學健， 韋 松

(廣西中醫學院，廣西南寧530001)

兔尾草Uraria lagopodioides(Linn.)Desv.exDC.，又名貍尾草，大葉兔尾草，狐貍尾等，系豆科貍尾豆屬植物［1-2］。該屬植物約20種，我國有9種，分布于熱帶、亞熱帶地區，華南、西南和臺灣省等地均出產，多數在北緯25°以南地區。廣西民間將其全草用于小兒疳積、咳血、產后少乳、頸淋巴結核、毒蛇咬傷、痔瘡等。藥理實驗結果證明，地上部分水煎液對大鼠子宮有收縮作用，抗著床作用;對毒蛇咬傷有一定治療作用;University of Benin Niggeria的研究人員對大葉兔尾草的藥理研究證明，該植物的總提物或部位提取物具有較好的殺螨活性［3］。化學成分研究 India的研究人員［4］運用氣相色譜分析儀從大葉兔尾草根的醇提物中分離出16碳和28碳的脂肪酸;曾有報道分離出6個黃酮化合物，但均未確定其結構［5］。同屬植物的氣相分析中發現正十六碳酸和正廿八碳酸。陳艷［6］得到8個化合物分別鑒定為硬脂酸(Ⅰ)，正二十四烷酸(Ⅱ)，β-谷甾醇(Ⅲ)，正三十烷醇(Ⅳ)，水楊酸(Ⅴ)，β-谷甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅵ)，當藥黃酮(Swertisin，Ⅶ)，當藥黃酮-2″-O-α-L-鼠李糖苷(Ⅷ)。筆者在對兔尾草進行化學成分的研究，從全草的乙醇浸出物中又分離出6個化合物，經理化性質和波譜數據分析，確定其中3個化合物的化學結構，分別是皂草黃酮(Saponaretin，Ⅴ)，野漆樹苷 (Rhoifolin，Ⅵ)，3β，16β，22α-三羥基齊墩果-12-烯(Ⅰ)。

1 儀器和材料

核磁共振譜用瑞士布魯克公司AV400超導核磁共振儀測定;EI-MS用VG Autospec 3000有機磁質譜儀測定，IR用EQUINOX 55型傅里葉變換紅外光譜儀(分辨率:優于0.2 cm-1;波數范圍;7500～370 cm-1)，德國Bruker公司;UV用Agilent 8453紫外可見分光光度計(波長范圍:190～800 nm，分辨率:0.1 nm)，美國安捷倫公司;熔點測定儀用XT4-100A型顯微熔點測定儀(溫度計未校正)，北京科儀電光儀器廠。

兔尾草采自廣西天等、馬山縣，經本院藥用植物教研室劉壽養教授鑒定為豆科植物大葉兔尾草［Uraria Legopodioides(L.)Desv.ex DC］。

2 提取和分離

大葉兔尾草干燥全草10 kg，粉碎，用70%乙醇提取。減壓回收乙醇，得到約20 000 mL濃縮液，后加水稀釋至澄清，趁熱抽濾，濾液趁熱上大孔樹脂，用水洗至無色后依次用20%乙醇，70%乙醇和95%乙醇洗脫。其中得到20%乙醇部分約110 g，70%乙醇部分250 g。

將70%乙醇洗脫部分190 g，用氯仿:甲醇:水進行梯度洗脫，每個流份收集250 mL，TLC點樣相同組分合并。9～48流份經反復柱層析，得到化合物(Ⅴ)15 mg和(Ⅵ)20 mg。

另取大葉兔尾草干燥全草14 kg，粉碎，用70%乙醇提取。減壓回收乙醇，得到濃縮液，分別用石油醚(60～90℃)，乙酸乙酯，正丁醇進行液-液萃取，得到石油醚部位浸膏160 g，乙酸乙酯部位浸膏110 g，正丁醇部位浸膏500 g。取正丁醇部位浸膏240 g，與280 g聚酰胺拌樣，用10%乙醇，30%乙醇和95%乙醇進行梯度洗脫，將30%乙醇洗脫部分70 g反復柱層析，得到化合物(Ⅰ)26 mg。

3 結構鑒定

化合物Ⅴ:黃色粉末，mp 227～228℃，鹽酸-鎂粉反應顯紅色，Molish反應陰性，但酸水解未能檢出糖，鋯鹽-枸櫞酸反應，黃色減退，在通過Gibb's反應陽性，Emerson反應陽性，示其8位未取代。Ⅴ在甲醇中測得UV光譜，最大吸收峰270 nm(帶Ⅱ)和333 nm(帶Ⅰ)，為典型黃酮類化合物的紫外吸收光譜。IRcm-1∶1 658(C=O)，1 499，1 450，1 138，1 076，835。FAB-MS(-，m/z):431［M-H］-，311。1H-NMR(DMSO-d6，400 MHz)δ ∶13.13(1H，S，5-OH);6.92(2H，d，J=8.5，H-3′，H-5′);7.96(2H，d，J=8.5，H-2′，H-6′);6.26(1H，S，3-H);6.78(1H，S，8-H)，10.86(1H，S，7-OH)，10.37(1H，S，4′-OH);13C-NMR(DMSO-d6)δ ∶163.99(C-2)，102.47(C-3)，182.13(C-4)，160.42(C-5)，108.90(C-6)，162.59(C-7)，93.60(C-8)，156.03(C-9)，104.63(C-10)，121.64(C-1')，128.99(C-2'，C-6')，115.84(C-3'，C-5')，161.16(C-4')。糖上碳核:73.40(C-1'')，70.88(C-2'')，78.69(C-3'').70.58(C-4'')，81.86(C-5'')，61.33(C-6'')。以上數據與文獻［7-8］記載的 Saponare tin 相符，顧鑒定化合物Ⅴ為:5，7，4′-三羥基-黃酮-6-C-葡萄糖苷，即皂草黃酮(Saponaretin)。

化合物Ⅵ:黃色粉末，mp 234～236℃，鹽酸-鎂粉反應顯紅色，示其為黃酮類化合物，鋯鹽-枸櫞酸反應，黃色減退，示5-OH存在;通過Gibb's反應陽性，Emerson反應陽性，示其8位未取代。Ⅴ在甲醇中測得UV光譜，最大吸收峰270 nm(帶Ⅱ)和333 nm(帶Ⅰ)，為典型黃酮類化合物的紫外吸收光譜。IRcm-1:3 404(OH)，1 658(C=O)，1 606，1 503，1 448，1 127，1 080，835。FAB-MS m/z:577 ［M-H］-，1HNMR(CD3OD，400 MHz)δ ∶6.85(2H，d，J=6 Hz，H-3′，H-5′);7.77(2H，d，J=6Hz，H-2′，H-6′)，6.55(1H，S，3-H)，6.32(1H，S，6-H)，6.66(1H，S，8-H);3.45-3.94(m，糖基氫)，5.13(1H，d，J=7.8Hz ，C1″-H);3.68(1H，t，J=9.0 Hz，C2″-H);3.63(1H，d，J=9.0 Hz，C3″-H);3.38(1H，d，J=9.0 Hz，C4″-H);3.52(1H，t，J=6.0，9.0Hz ，C5″-H);3.71(1H，d，J=6.0 Hz，C6″-H1)，3.91(1H，br，C6″-H2);5.27(1H，br，C1?-H);3.61(1H，d，J=9.0 Hz，C2?-H);3.94(1H，br，C3?-H);3.40(1H，d，J=9.0 Hz，C4?-H);3.93(1H，br，C5?-H);1.31(3H，d，J=3.0 Hz，C6?-H)。13C-NMR(CD3OD，δ)∶167.06(C-2)，104.56(C-3)，184.39(C-4)，163.30(C-5)，101.42(C-6)，164.77(C-7)，96.34(C-8)，159.30(C-9)，107.44(C-10)，123.37(C-1′)，130.13(C-2′，C-6′)，117.50(C-3′，C-5′)，163.36(C-4′)，糖上碳核:100.18(C-1″)，79.49(C-2″)，78.48(C-3″)，71.87(C-4″)，78.76(C-5″)，62.92(C-6″)，103.01(C-1?)，72.69(C-2?，C-3?)，74.48(C-4?)，70.48(C-5?)，18.79(C-6?)。以上數據與文獻［9-10］記載的 Rhoifolin一致，故鑒定Ⅵ為:芹菜素-7-O-新橙皮糖苷，即野漆樹苷(Rhoifolin)。

化合物Ⅰ灰色粉末mp 293～296℃，溶于甲醇，吡啶，二甲亞砜，Ⅰ在甲醇中測得UV光譜，最大吸收峰205 nm，13CNMR(C5D5N，600 MHz)δ ∶38.81(C-1)，26.45(C-2)，78.21(C-3)，39.50(C-4)，55.79(C-5)，18.47(C-6)，33.08(C-7)，39.98(C-8)，47.87(C-9)，36.76(C-10)，23.82(C-11)，122.50(C-12)，144.84(C-13)，42.33(C-14)，33.08(C-15)，77.77(C-16)，46.61(C-17)，41.86(C-18)，46.77(C-19)，30.90(C-20)，42.28(C-21)，75.55(C-22)，28.19(C-23)，15.76(C-24)，16.85(C-25)，17.13(C-26)，23.82(C-27)，28.66(C-28)，33.32(C-29)，21.21(C-30)。δ122.50(C12)，δ 144.83(C13)為典型的齊墩果酸型骨架構型。根據以上數據［11］確定化合物Ⅰ的結構是 3β，16β，22α-三羥基齊墩果-12-烯。

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