動脈粥樣硬化性腦梗死患者血漿脂蛋白相關磷脂酶A 2水平及相關性研究

王 磊 章 瑩 費世早 龐洪波 陳觀保 儲照虎

脂蛋白相關磷脂酶A 2(Lp-PLA 2)作為一種新型炎癥標志物,參與了粥樣硬化斑塊形成的起始、發展和穩定性喪失及最終破裂各個階段,可能是缺血性腦卒中新型獨立危險因素。人循環 Lp-PLA 2以與脂蛋白顆粒結合的形式存在,其中2/3與低密度脂蛋白(LDL)結合,1/3與高密度脂蛋白(HDL)和脂蛋白(a)[Lp(a)]結合。Lp-PLA 2可水解sn-2位含有多不飽和脂肪酰基的氧化磷脂,生成溶血卵磷脂和氧化型游離脂肪酸,后兩者為炎癥介質,可導致內皮細胞功能和穩定性喪失,從而促進動脈粥樣硬化斑塊的形成。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選取2008年12月～2009年8月皖南醫學院附屬弋磯山醫院神經內科住院的急性ACI患者(168例,其中男100例,女 68例)為 ACI組,平均年齡(64.69±9.80)歲。對照組為體檢中心體檢健康者(72例,其中男36例,女 36例),平均年齡(61.67±6.44)歲。

1.2 ACI組納入標準 發病后24 h內入院,所有病例均符合1995年全國第4屆腦血管病學術會議修訂的腦梗死診斷標準;同時參考CISS分型標準進行病因分型;均經詳細的神經系統檢查及頭顱核磁共振、頸部血管彩超、心臟彩超、心電圖等檢查確診。排除以下情況：(1)出血性腦卒中,梗死后腦出血;(2)腔隙性腦梗死、無癥狀性腦梗死、動脈炎性腦梗死;(3)有明確栓子來源的腦栓塞;先天發育異常所致的腦梗死;(4)各種凝血機制異常、血液系統疾病及高粘血癥所致的腦梗死;(5)合并有冠心病、周圍血管疾病的腦梗死。

1.3 對照組納入標準 年齡、性別與ACI組相匹配(P＞0.05),經病史詢問既往無腦血管病病史,且經頭顱核磁共振證實無腦卒中。

1.4 ACI組分組 腦梗死面積分組：按照Adam s分類法,分為大面積梗死組(96例)(面積大于3 cm2累及2個以上腦解剖部位)和小面積梗死組(72例)(面積1.5～3 cm2累及1個腦解剖部位)。神經功能缺損程度分組：按美國國立衛生研究院卒中量表(NIHSS)進行神經功能缺損程度評估,分為輕型梗死組(32例)(＜4分)、中型梗死組(116例)(≤4～15分)、重型梗死組(20例)(≥15分)。

1.5 標本采集 ACI組、對照組分別空腹采集靜脈血2m l,用EDTA作為抗凝劑,混合10～20 min后離心20 min左右(2 000～3 000 r/m in),仔細收集上清液,將標本放于-80℃冰箱統一保存。為減少批間誤差和測量誤差,全部標本采集完成后1次性檢測。

1.6 Lp-PLA 2水平 應用雙抗體夾心法測定標本中人脂蛋白磷脂酶A 2(Lp-PLA 2)水平,操作流程按試劑盒說明書進行。其余常規生化檢測指標由皖南醫學院附屬弋磯山醫院檢驗科完成。

2 結 果

2.1 ACI組與對照組一般資料比較 ACI組與對照組年齡、性別、吸煙史、飲酒史發生率差異無統計學意義(P＞0.05);ACI組高血壓病、糖尿病發生率均高于對照組(P＜0.05)(表1)。

2.2 ACI組與對照組常見臨床生化指標比較ACI組與對照組 LDLC、TC、TG 、Fib水平差異無統計學意義(P＞0.05);ACI組HDLC水平明顯低于對照組(P＜0.01)(表2)。

表2 ACI組與對照組常見臨床指標比較(±s)

組別LDLC(mmol/L)HDLC(mmol/L)TC(mmol/L)TG(mmol/L)Fib(g/L)ACI組 2.528±0.564 1.071±0.324 4.341±0.748 1.798±1.144 3.807±2.346對照組 2.547±0.646 1.259±0.306 4.098±1.459 1.471±0.839 3.207±1.267 t-0.147 -2.952 0.948 1.539 1.444 P 0.884 0.004 0.349 0.126 0.151

2.3 ACI組與對照組血漿 Lp-PLA 2水平 ACI組血漿Lp-PLA 2水平明顯高于對照組(P＜0.01)(表3)。

表3 ACI組與對照組 Lp-PLA2 水平(±s,μg/L)

表3 ACI組與對照組 Lp-PLA2 水平(±s,μg/L)

組別 例數(n) Lp-PLA 2水平ACI組 168 12.058±7.104對照組 72 7.269±3.112 t 5.136 P 0.000

2.4 血漿Lp-PLA 2水平與腦梗死面積的關系 血漿Lp-PLA 2水平隨腦梗死面積增加而呈遞增趨勢,但不同腦梗死面積血漿Lp-PLA 2水平差異無統計學意義(P＞0.05)(表4)。

表4 血漿 Lp-PLA 2水平與梗死面積的關系(±s,μg/L)

表4 血漿 Lp-PLA 2水平與梗死面積的關系(±s,μg/L)

組別 例數(n) Lp-PLA 2水平(μg/L)大面積腦梗死組 96 13.083±7.981小面積腦梗死組 72 10.151±6.094 t 1.853 P 0.068

2.5 血漿Lp-PLA 2水平與神經功能缺損程度的關系 神經功能缺損程度越重,血漿Lp-PLA 2水平越高,組間差異具有統計學意義(P＜0.05),進一步行SNK-q檢驗,3組間兩兩比較輕型梗死組與中型、重型梗死組比較血漿Lp-PLA 2水平差異有統計學意義(P＜0.05)(表5)。

表5 血漿Lp-PLA 2水平與神經功能缺損程度的關系(±s,μg/L)

表5 血漿Lp-PLA 2水平與神經功能缺損程度的關系(±s,μg/L)

注：單因素方差分析(F檢驗),P＜0.05;SNK-q檢驗,與輕型梗死組比較,△P＜0.05(P=0.022)

組別 例數(n) Lp-PLA 2水平(μg/L)輕型梗死組 32 7.092±1.606中型梗死組 116 12.493±7.406△重型梗死組 20 14.843±9.096△F 3.757 P 0.028*

2.6 血漿Lp-PLA 2水平與ACI患者常見危險因素的相關性分析 血漿Lp-PLA 2水平與性別,CRP呈正相關;與吸煙、飲酒呈負相關;與年齡、高血壓病 、糖尿病 、TC 、TG 、LDLC 、HDLC 、Fib、Lp(a)均無關(表6)。

表6 Lp-PLA2水平與常見危險因素的Spearman相關分析

2.7 男女患者血漿Lp-PLA 2水平比較 男性患者血漿Lp-PLA 2水平明顯高于女性患者(P＜0.05)(表7)。

表7 ACI組不同性別間Lp-PLA 2和其他相關生化指標比較

2.8 Lp-PLA2水平對ACI的診斷效用 Lp-PLA2水平在診斷ACI過程中ROC曲線下面積為0.700(P=0.01);95%CI為(0.599～0.800)(圖1)。

圖1 Lp-PLA 2在診斷ACI過程中ROC曲線

3 討 論

炎癥和氧化應激在動脈粥樣硬化形成過程中起著重要作用[1],脂蛋白相關磷脂酶A 2(Lp-PLA 2)作為一種新型炎癥標志物,與血管壁周圍炎癥發生密切相關,與傳統炎癥標志物如CRP相比,受全身炎癥狀態影響較小,血漿Lp-PLA 2水平的升高可以特異性地反映血管壁周圍炎癥狀態的存在[2]。Lp-PLA 2不僅參與了動脈粥樣硬化斑塊的形成,并且與斑塊穩定性喪失以及最終破裂相關,對缺血性腦卒中的發病風險和預后具有早期預測價值,其特異性抑制劑已被證明具有抗動脈粥樣硬化作用,有望成為缺血性腦卒中的新型治療靶標[2]。

3.1 血漿Lp-PLA 2水平與ACI的關系 鹿特丹前瞻性病例隊列研究表明Lp-PLA 2活性高低與缺血性腦卒中發生風險密切相關[3];Ballantyne等研究表明缺血性腦卒中患者血漿Lp-PLA 2水平明顯高于非腦卒中病例[4];瑞典的一項基于人群的前瞻性隊列研究表明Lp-PLA 2活性與含量與缺血性腦卒中風險獨立相關[5];國內梁江紅[6]、王大力[7]等研究結果亦證實ACI患者血漿Lp-PLA 2水平明顯升高。本研究結果顯示ACI組血漿Lp-PLA 2水平明顯高于對照組,與國內外研究結果相似,而LDLC、TC、TG、Fib水平差異無統計學意義;血漿 Lp-PLA 2水平明顯低于國內報道結果,推測可能與所使用的試劑盒、檢測方法、血漿冷凍保存時間長短有關。本研究結果表明,血漿Lp-PLA 2水平升高可能是缺血性腦卒中發生的危險因素,并且與傳統危險因素 LDLC、TC、TG、Fib相比,Lp-PLA 2可能與缺血性腦卒中具有更好的相關性。

3.2 血漿Lp-PLA2水平與腦梗死面積的關系 本研究結果顯示,大面積腦梗死組血漿Lp-PLA 2水平高于小面積腦梗死組,血漿Lp-PLA 2水平隨梗死面積增加呈遞增趨勢,但差異無統計學意義,這與國內研究結果[6]相似。本研究結果提示,血漿Lp-PLA2水平不能作為預測梗死面積大小指標,其原因可能是病初梗死面積大小與血管阻塞程度、血管支配區域以及是否存在側支循環有關,而ACI患者急性期血漿Lp-PLA2水平升高反映的是腦卒中后機體對血小板功能活躍的對應性變化,故不能反映梗死面積大小。

3.3 血漿Lp-PLA 2水平與神經功能缺損程度的關系 本研究結果顯示,神經功能缺損程度越高,血漿Lp-PLA 2水平越高,血漿 Lp-PLA 2水平與神經功能缺損程度呈正相關,能夠反映病情的嚴重程度,與國內研究結果[7]相似。神經功能缺損程度的高低與梗死部位(功能區不同)、梗死面積大小、側支循環供應等情況有關;不管哪種類型梗死,均首先發生微循環障礙,神經細胞、膠質細胞、內皮細胞等腦細胞變性壞死和巨噬細胞、中性粒細胞等炎性細胞浸潤。國內章興甫研究發現,腦梗死神經功能缺損程度與炎癥細胞因子TNF-α、IL-6、IL-1β含量呈正相關[8];趙常寶等研究發現神經功能缺損程度與炎癥細胞因子TNF-α、IL-1β、s-ICAM-1 含量呈正相關[9]。因此,本研究推測梗死后微循環障礙,Lp-PLA 2反應性產物經代謝產生眾多的炎癥介質如白細胞介素、腫瘤壞死因子等炎癥因子,它們之間相互促進、相互聯系,從而形成一個由Lp-PLA 2介導的炎癥信號傳導通路而加重缺血性腦損傷。

3.4 血漿Lp-PLA 2水平與ACI常見危險因素的相關性分析 已有研究結果表明,Lp-PLA 2活性主要與LDL[10]、性別[11]、種族、鐵蛋白水平以及他汀類藥物使用有關;國內吳延華等研究發現Lp-PLA 2活性僅與性別有關[12];王大力等研究認為血清Lp-PLA 2水平與性別、年齡、TC、LDLC呈正相關,與HDLC呈負相關;梁江紅等研究發現血漿Lp-PLA 2水平與HDLC呈負相關,與TC、LDLC呈正相關,而與性別 、年齡、TG 、吸煙 、高血壓 、CRP 均無關[7];國外Elkind等研究認為hs-CRP與Lp-PLA 2水平呈弱相關性(r=0.09,P=0.045)[13];Brilakis等認為女性Lp-PLA 2與超敏C反應蛋白有關[14]。本研究結果顯示,血漿Lp-PLA 2水平與性別呈正相關,與國內外研究結果基本一致,女性血漿Lp-PLA 2水平低于男性可能與雌激素水平有關;血漿Lp-PLA 2水平與吸煙、飲酒呈負相關,與年齡、高血壓病、糖尿病 、TC 、TG 、LDLC 、HDLC 、Fib 、Lp(a)均無關,與之前研究結果不同,原因可能與樣本含量偏小、人群種族差異、飲食結構不同、可能的藥物使用有關。

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9 趙常寶,張建斌,王素芳.腦梗死患者炎性細胞因子變化與神經功能缺損的關系.細胞與分子免疫學雜志,2009,25(7)：640-641.

10 李 寧,顧水明,魏 盟.脂蛋白相關磷脂酶A 2在動脈粥樣硬化中的作用.國際心血管病雜志,2008,35(4)：212-215.

11 張紹艷,王濱有.老年人血漿脂蛋白相關磷脂酶A 2活性與其基因型、性別和年齡的關系.中國動脈硬化雜志,2007,15(11)：854-856.

12 吳延華,曹勇軍,劉慧慧,等.急性腦梗死患者血清脂蛋白相關磷脂酶A 2活性的變化.中華神經科雜志,2008,41(6)：381-382.

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