精子頂體酶活性定量檢測(cè)與男性不育病例分析

董樹林 曲文玉 王立名 王蔓 何家梅

20世紀(jì)90年代初開始了對(duì)精子頂體酶與男性不育關(guān)系的研究，認(rèn)為頂體酶與精子能否穿越卵細(xì)胞透明帶有關(guān)，頂體酶含量低則精子穿過卵細(xì)胞透明帶的能力下降，因而影響受孕、IUI和IVF的成功率。但是一直以來，精液常規(guī)分析(CASA)都是被用來作為男性生育能力的主要指標(biāo)。雖然過去有許多研究表明，精液中精子數(shù)量及活動(dòng)精子的百分率與自然妊娠率在統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著的相關(guān)性，但臨床上大約有三分之一男性不育患者的精液常規(guī)分析結(jié)果正常或接近正常。因此僅僅依靠精液常規(guī)分析(CASA)的結(jié)果來預(yù)測(cè)男性生育狀況是比較片面的。正常受孕過程是精子在女性生殖道運(yùn)動(dòng)到輸卵管的壺腹部與卵子相遇，識(shí)別并誘發(fā)頂體反應(yīng)，精子與卵子融合形成早期胚胎，最后是受精卵的種植，在受精過程中每個(gè)環(huán)節(jié)出現(xiàn)異常都會(huì)導(dǎo)致不育。而精液常規(guī)檢查(CASA)最主要指標(biāo)為精子濃度和精子運(yùn)動(dòng)能力。所以，對(duì)男性不育患者檢查要慎重，特別是不育時(shí)間超過1年的男性人群，除了檢查精液常規(guī)(CASA)外，還應(yīng)做精子功能檢測(cè)試驗(yàn)。如:精子頂體酶活性定量，鈣離子誘發(fā)頂體反應(yīng)，精子-透明質(zhì)結(jié)合實(shí)驗(yàn)，精子DNA碎片，精子核蛋白染色等。本文通過對(duì)精子頂體酶活性定量實(shí)驗(yàn)與臨床男性不育病例分析，就精子頂體酶活性定量異常與男性不育的關(guān)系進(jìn)行探討。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本來源統(tǒng)計(jì)我院男科門診2011年7月至9月間395例男性不育患者(不育時(shí)間均1年以上)進(jìn)行精子頂體酶活性定量檢測(cè)。

1.2 實(shí)驗(yàn)原理與結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)精子頂體內(nèi)存在精氨酸酰胺酶，其活性可反應(yīng)頂體酶全部活性，精氨酸酰胺酶以N-9-苯甲酸-DL-精氨酸-P-硝酰基苯胺為底物，分解產(chǎn)生有色產(chǎn)物-硝酰基苯胺，通過測(cè)定該產(chǎn)物量可推算出精氨酸酰胺酶的活性，試劑盒為深圳華康生物醫(yī)學(xué)工程有限公司生產(chǎn)的精子頂體酶活性定量檢測(cè)試劑盒。按照WHO推薦的改良Kennedy法，準(zhǔn)確檢測(cè)人精子中精子頂體酶活性，更真實(shí)的應(yīng)用于精子頂體酶活性的評(píng)價(jià)。精子頂體酶活性定量標(biāo)準(zhǔn):參考值48.2uIU-218.7uIU/106精子。

頂體酶存在于精子頂體內(nèi)膜及赤道膜上，它是受精過程中的蛋白水解酶，通常以活性形式存在，當(dāng)精子頭部進(jìn)入卵透明帶時(shí)，頂體酶原被活化為頂體酶，水解卵透明帶使精子穿過卵透明帶最終與卵子融合。

2 結(jié)果

所選395例病例均為夫婦不孕不育1年以上的男性，且無精液液化異常，精子濃度大于10×106/ml以上。精子濃度、活動(dòng)率及精子頂體酶活性定量檢測(cè)統(tǒng)計(jì)列表1如下:

表1 部分精液常規(guī)與頂體酶活性相關(guān)性統(tǒng)計(jì)

3 討論

通過病例統(tǒng)計(jì)不難發(fā)現(xiàn)常規(guī)精液檢查(CASA)的精子濃度、活動(dòng)率及活力正常，精子頂體酶活性定量異常比率3.8%[1]，也就是說只通過精液常規(guī)檢查(CASA)，頂體酶活性定量檢測(cè)一項(xiàng)漏診比率3.8%。精子濃度大于10×106/ml，活動(dòng)率及活力正常頂體酶活性定量異常為4.8%;值得注意的是精子濃度大于10×106/ml，精子活動(dòng)率或活力異常，即少弱精子癥患者頂體酶活性定量異常率占21.0%[2]。因此，提示男科醫(yī)生除精液常規(guī)檢查(CASA)外，不可忽視精子頂體酶活性定量檢測(cè)等其他精子功能檢查。

頂體酶活性可反應(yīng)精子質(zhì)量的一個(gè)方面，頂體酶活性的不足可導(dǎo)致不育，臨床精子存活率低，死精子癥以及嚴(yán)重生殖系統(tǒng)感染。特別是解脲支原體嚴(yán)重感染可造成精子頂體酶活性降低。此外，更具有意義的是通過常規(guī)精液檢查(CASA)正常，難以鑒別不孕不育原因者，存在頂體酶活性低的情況。頂體酶活性定量是判斷男性精子功能和生育力強(qiáng)弱的重要評(píng)價(jià)指標(biāo)之一，通過檢測(cè)也為輔助生殖(IUI、IVF和ICSI)治療方案的實(shí)施提供更可靠的依據(jù)。

[1]黃宇烽，許瑞吉.男科診斷學(xué).第二軍醫(yī)大學(xué)出版社，1999:158-163.

[2]熊承良，吳明章，周繼紅，等.主編.人類精子學(xué).湖北科學(xué)技術(shù)出版社，2002:427-428.