血清CD27和CD27L的檢測在胃癌中的臨床意義

上海交通大學醫學院附屬瑞金醫院盧灣分院（200020） 劉濤 袁建明 沈建康 郁驍珩 王天翔

CD27屬I型跨膜糖蛋白，表達于75%的T細胞（CD4+和CD8+均有）、15%～45%的胸腺細胞、部分B細胞以及NK細胞等，活化的T細胞CD27表達增加[1]。CD27配體（CD27L，CD70）是II型跨膜糖蛋白，屬TNF配體超家族。CD27L的表達具有局限性，只見于活化的T細胞和B細胞。CD27-CD27L可以作為第二信號促進T細胞增殖及分化過程[2]，在T-B細胞相互作用中起著非常關鍵的作用[3]，對NK細胞的功能也有調節作用。已經證明，在IL-2或IL-12存在的條件下，CD27-CD27L結合可以增強NK細胞與靶細胞的粘附，促進NK細胞對靶細胞的殺傷。

本研究擬采用ELISA方法對42例胃癌患者血清中CD27和CD27L的表達進行檢測，探討CD27和CD27L的表達與胃癌臨床及病理指標的相關性，并對其臨床意義做一研究。

附表 血清CD27和CD27L的表達

1 對象與方法

1.1 研究對象 血清標本取自2008年7月～2008年12月在上海交通大學醫學院附屬瑞金醫院盧灣分院手術的胃癌患者。所有患者術前均未進行過放化療及抗腫瘤藥物等治療，均有完整的臨床及病理資料。納入的胃癌患者共42例，其中女性16人，男性26人，平均年齡60.02±12.77歲。病理組織學類型：低分化腺癌24例，中分化腺癌10例，高分化腺癌8例。病理分期：Ⅰ期5例，Ⅱ期12例，Ⅲ期20例，Ⅳ期5例。浸潤深度（T）：T12例，T24例，T329例，T47例。淋巴結轉移者26例：其中N116例，N27例，N33例。無淋巴結轉移者（N0）16例。遠處轉移者（M1）1例。另外納入同期正常對照者血清標本40例。病例組和對照組間年齡和性別構成沒有顯著性差異，具有可比性。

1.2 研究方法 鼠抗人CD27和CD27L單克隆抗體為CST公司產品，ELISA試劑盒為ADL公司產品。采用ELISA方法，具體步驟嚴格按照試劑盒說明執行。

1.3 統計學方法 使用SPSS 16.0進行統計學處理。P＜0.05表示有統計學差異。一般計量資料數據描述采用x±s表示，滿足正態和方差齊性的計量資料兩組間比較采用t檢驗（tTest），多組間比較采用單因素方差分析（One-way ANOVA），否則采用非參數統計中的秩和檢驗；相關性分析采用Spearman相關分析方法；缺失值不納入統計。

2 結果

2.1 血清CD27和CD27L的表達 胃癌患者組血清CD27的平均表達濃度為5.12±1.23pg，CD27L的平均表達濃度為0.92±0.13ng。正常對照組血清CD27的平均表達濃度為8.66±6.67pg，CD27L的平均表達濃度為4.93±3.88ng。見附表。t檢驗結果表明，胃癌患者組血清CD27和CD27L的表達顯著低于正常對照者（P=0.000）。在胃癌患者中，對不同病理和臨床指標間采用單因素方差分析，結果表明，在不同病理組織學類型中血清CD27和CD27L的表達無顯著性差異；在不同病理分期中血清CD27的表達無顯著性差異，血清CD27L的表達除Ⅲ期顯著高于Ⅱ期外（P=0.017），其余無顯著差異；在不同浸潤深度中血清CD27和CD27L的表達無顯著差異；在不同淋巴結轉移中血清CD27的表達除N1顯著高于N2（P=0.022）外，其余無顯著差異，血清CD27L的表達無顯著差異；考慮到遠處轉移患者只有1例，本研究中未進行CD27和CD27L與遠處轉移之間的統計分析。

2.2 相關分析 Spearman相關分析表明，血清CD27和CD27L分別與病理類型、病理分期及TNM分期無顯著相關性。血清CD27和CD27L之間也無顯著相關性。見附圖。

3 討論

目前對CD27-CD27L的研究大多集中在免疫學方面，研究過程中發現此共刺激受體-配體分子對自身免疫性疾病、炎癥及腫瘤的發生、發展起著促進作用，選擇性干預這條共刺激通路能夠減緩這些疾病的發展，因此其可能成為特異性的治療靶標[4]。目前國內外對于CD27-CD27L和胃癌之間關系的研究還較少。本研究結果表明，胃癌患者的血清CD27和CD27L的表達顯著低于正常對照者。Lorenz MG等[5]的研究首次發現，一個表達CD27L的重組病毒疫苗模型具有顯著的抗腫瘤免疫特性，可能與其提高T細胞效應、介導抗腫瘤免疫有關。Couderc B等[6]的研究也表明了腫瘤細胞上表達CD27L共刺激分子能夠提高抗腫瘤免疫，減緩腫瘤的生長。這或許可以解釋本研究中胃癌患者血清CD27和CD27L的表達顯著低于正常對照者。Carpenter EL等[7]研究表明，患者體內B細胞穩態遭到破壞與外周血CD27+B細胞減少有顯著的相關性，而B細胞穩態發生紊亂導致的免疫系統功能受損在包括黑色素瘤在內的腫瘤發生過程中起了潛在的重要作用。近來的一項研究[8]也顯示，CD27-CD27L共刺激途徑在白血病的免疫治療中維持了效應細胞的細胞毒性，在有效的免疫治療中起到十分關鍵的作用。

本研究結果顯示，血清CD27和CD27L在不同的病理類型中并無顯著性差異，提示血清CD27和CD27L的表達同病理類型無關。在不同病理分期中，血清CD27L的表達Ⅲ期顯著高于Ⅱ期，但Ⅳ期并無繼續升高的趨勢，結合Spearman相關分析，無法得出CD27L同病理分期之間有顯著相關性的結論。在TNM分期中，血清CD27的表達N1顯著高于N2，提示血清CD27的表達和不同淋巴結轉移程度之間可能存在一定的關聯，但Spearman相關分析并未得出顯著性結論，仍需更大樣本的試驗來進一步明確目前的結果。本研究中的相關分析尚未得出CD27和CD27L與病理類型、病理分期及TNM分期之間的顯著相關性。

本研究采用ELISA方法檢測血清中CD27和CD27L的表達，若進一步結合免疫組化技術檢測胃癌組織中的CD27和CD27L，則可得出更加可信的結論。