卵巢腫瘤中survivin和COX-2表達的意義

何若英 李 晶 廣東省廣州市番禺療養院 5490; 廣東省廣州市番禺區中心醫院病理科

卵巢惡性腫瘤的發病率在女性生殖道腫瘤中居第3位,但由于缺乏典型的臨床癥狀,早期診斷較困難,其死亡率在婦科惡性腫瘤中居第1位。sruvivin是凋亡抑制蛋白基因家庭新成員,大量研究表明,survivin在正常組織中不表達,在許多腫瘤組織中高表達,這一特點為腫瘤的早期診斷和基因治療提供了靶點。環氧合酶-2(cyclooxyengase-2,COX-2)具有影響細胞的增殖及分化、抑制細胞凋亡作用,并可促進腫瘤血管形成,與多種腫瘤的發生、發展密切相關。本文探討survivin和COX-2在卵巢上皮性腫瘤中表達情況和其與卵巢癌病理特征之間的關系,以及二者之間的相互關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選用我院與番禺區中心醫院2006年1月-2009年6月病理科存檔的卵巢癌34例、卵巢交界性囊腺瘤27例、卵巢良性囊腺瘤58例、正常卵巢組織46例的手術標本蠟塊。標本均經過10%中性福爾馬林固定,常規石蠟包埋,連續4μm切片。所有病例均經H E切片診斷證實。所有患者術前均未接受化療或者放療。

1.2 方法 免疫組化采用EnV ision法。兔抗人survivin多克隆抗體及鼠抗人COX-2單克隆抗體購自北京中衫金橋生物技術有限公司。用已知survivin陽性表達的胃癌切片及COX-2陽性的結腸癌切片作為陽性對照,用PBS代替一抗作陰性對照。

1.3 免疫組化陽性結果判斷 由兩位病理學專家雙盲予每張切片評分,結合陽性細胞百分比及陽性細胞染色強弱兩個方面進行分析評分。(1)陽性細胞百分比:無陽性細胞為0分,陽性細胞占1%～10%為1分,11%～50%為2分,51%～80%為3分,81%～100%為4分。(2)陽性細胞染色強弱:基本不著色為0分,著色淡者為1分,著色適中者為2分,著色深者為3分。(1)、(2)兩項乘積為其最后得分:0分為陰性(-),1～4分為弱陽性(+),5～8分為中等陽性(++),9～12分為強陽性(+++)。

1.4 統計學方法 應用SPSS11.5統計軟件包,蛋白陽性率用χ2檢驗和Fisher確切概率法,蛋白陽性之間的相關性和等級相關資料用Spearman相關分析處理,P＜0.05為有統計學意義。

2 結果

2.1 sunrivin與COX-2蛋白在卵巢上皮性癌組織和對照組織中的表達 sunrivin蛋白陽性表達的染色部位主要位于腫瘤細胞的細胞漿中,為粗細不一的棕黃色顆粒。在46例正常卵巢組織中均未發現survivin的陽性表達,在良性漿液性腫瘤58例中,sunrivin蛋白陽性表達率為19.0%(11/58),在交界性腫瘤和卵巢癌中sunrivin蛋白的陽性表達率分別為51.9%(14/27)和73.5%(25/34)。COX-2陽性染色為棕黃色顆粒。定位于細胞核周及細胞漿內,呈片狀或顆粒狀分布。46例正常卵巢組織中COX-2蛋白表達為陰性。在58例良性卵巢漿液性腫瘤中,COX-2蛋白表達陽性率為29.3%(17/58)。交界性卵巢上皮腫瘤及卵巢癌組織中COX-2蛋白表達陽性率分別為 74.1%(20/27)和88.2%(30/34)。

2.2 survivin與COX-2在卵巢癌組織中表達的相關性survivin與COX-2之間具有顯著正相關性(r=0.387,P＜0.01)。

3 討論

卵巢癌的發生、發展是多步驟的過程,必然涉及變異的積累和細胞正常周期的紊亂。研究表明細胞異常增殖和凋亡抑制是卵巢癌發生的重要機制[1]。survivin又名生存素或生存蛋白,是1997年由耶魯大學的A ltieri實驗室應用效應細胞蛋白酶受體-1(effec tor cellp roteasa recep tor-1)的cDNA通過雜交方法在人類基因組文庫中篩選并獲得的凋亡抑制蛋白。survivin在正常胚胎發育過程中有所表達。在成人終末分化中很少見到(除了睪丸、胸腺和胎盤),但在大量的腫瘤組織如肺癌、胃癌、結腸癌、胰腺癌、乳腺癌、淋巴瘤、子宮內膜癌、子宮頸癌和卵巢癌等組織中可見其表達[2]。Sui等[3]發現,survivin基因在卵巢良性囊腺瘤中無表達或低表達(0%～12.1%),在惡性卵巢上皮性癌細胞漿或細胞核中表達豐富。認為其表達與卵巢癌手術病理分期、病理類型、預后、生存率等指標顯著相關。本文結果顯示,sunrivin在正常卵巢組織中無表達:在良性卵巢上皮腫瘤、交界性卵巢上皮腫瘤、卵巢癌中的陽性表達率逐漸增強。sunrivin的高表達預示腫瘤有較高的侵襲性和不良預后,是評價卵巢癌預后的潛在指標。因此,檢測sunrivin的表達,對臨床上作出早期診斷、估計預后具有一定的指導意義。survivin在腫瘤組織中高表達而在正常組織中不表達的特性。為卵巢癌的基因治療提供了理論依據。COX-2是參與花生四烯酸的環氧酶代謝途徑中的限速酶。可催化花生四烯酸轉化為前列腺素(p rostaglandins)。多項研究表明COX-2在許多腫瘤中的表達上調。并與增強的抗凋亡能力相關,提示COX-2可能與腫瘤發生、發展密切相關。臨床研究表明,COX-2表達與卵巢上皮性癌患者的治療反應相關。是影響其預后的獨立危險因素。本研究結果顯示,COX-2在正常卵巢組織中無表達,在良性卵巢上皮腫瘤組織、交界性卵巢上皮腫瘤、卵巢癌中的表達呈增強趨勢,差異有高度顯著性,該結果與Matsumoto等研究結果相同。提示COX-2在卵巢癌發生的早期即開始起作用,進展期持續存在,并不是晚期事件[4]。新近研究指出[5],特異性的COX-2抑制劑能明顯減少survivin蛋白在細胞中的表達,同時在動物模型中還發現,survivin蛋白表達水平的高低依賴于細胞中COX-2蛋白是否存在。在本研究中,檢測了卵巢癌中survivin與COX-2的表達情況并且分析兩者的相關性,結果顯示COX-2在卵巢癌組織中的表達與survivin的表達密切相關。該結果初步提示兩者具有協同作用,抑制細胞凋亡,共同參與了卵巢癌的發生、發展。

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