高效液相色譜法測定火炭星膠囊中鹽酸小檗堿的含量

　　摘要：目的：建立測定火炭星膠囊中鹽酸小檗堿含量的高效液相色譜方法。方法：采用InertsilODS-3色譜柱（Φ4.6μm×250mm），流動相為乙腈-0.4%磷酸（體積比22∶78），流速為1.0mL/min，檢測波長為349nm。結果：鹽酸小檗堿在0.06~1.2μg范圍內與峰面積積分值呈現良好的線性關系，平均回收率為100.7%，RSD=1.4%（n=9）。結論：所建立的方法簡便、準確度高、重現性好，可作為火炭星膠囊質量控制和評價的依據。
　　關鍵詞：火炭星膠囊；鹽酸小檗堿；高效液相色譜法；含量測定
　　中圖分類號：R284.2文獻標識碼：A
　　文章編號：1007-2349（2011）03-0053-02
　　火炭星膠囊是由火炭星、香菇、黃連、苦參、天花粉等22味中藥組成的純中藥制劑，具清熱解毒、活血化瘀、軟堅散結、消痼排毒、祛疴除邪、扶正培本的功效。黃連，清熱燥濕、瀉火解毒，其有效成分為鹽酸小檗堿，為處方中君藥。筆者參照有關文獻［1~2］，采用高效液相色譜法測定該制劑中鹽酸小檗堿的含量，為控制該制劑質量控制提供實驗依據。
　　1儀器與試藥
　　島津2010A液相色譜儀系統，配島津LCsolution工作站；乙腈（色譜級），水（超純水），其余試劑均為分析純；鹽酸小檗堿對照品（中國藥品生物制品檢定所，含量測定用，編號：0773-9910），火炭星膠囊（云南文山民族民間醫藥研究所）
　　2方法與結果
　　2.1色譜條件與系統實用性試驗色譜柱：InertsilODS-3色譜柱（Φ4.6μm×250mm）；流動相：乙腈-0.4%磷酸體積比（22：78）；檢測波長：349nm；柱溫：25℃；進樣量：10μL；流速1.0mL/min。
　　2.2溶液的制備精密稱取鹽酸小檗堿對照品適量，加流動相制成對照品儲備溶液①（0.01202mg?mL-1）、對照品儲備溶液②（0.1202mg?mL-1）及對照品溶液（0.024mg?mL-1）。取火炭星膠囊10粒，精密稱定，研細，取細粉0.5g，精密稱定，精密加入流動相25mL，稱定重量，超聲處理30min，靜置60min，稱重，用甲醇補足減失重量，搖勻，濾過，棄去初濾液，取續濾液，作為供試品溶液。按火炭星膠囊處方及制備工藝制備缺黃連藥材的陰性樣品，按供試品溶液的制備法制備，作為陰性對照品溶液。
　　2.3方法學考察干擾性試驗：精密吸取2.2項下3種溶液各10μL，注入液相色譜儀。結果供試品色譜中，在與對照品色譜相應位置上有相應的色譜峰，而陰性對照品溶液則無，表明陰性對照品溶液對測定無干擾（見圖1）。
　　2.3.1線性關系考察精密吸取對照品儲備溶液①5μL、對照品儲備溶液②1、2、3、5、7、8、10μL注入液相色譜儀。以鹽酸小檗堿進樣量x對峰面積值Y作線性回歸，回歸方程為Y=3459195x+7058，r=0.99998（n=8），鹽酸小檗堿在0.06~1.2μg范圍內呈現良好的線性關系。
　　2.3.2重復性試驗分別精密稱取同一批樣品6份，按供試品溶液制備法制備溶液，進樣，結果RSD=1.9%（n=6）。
　　2.3.3穩定性試驗取同一供試品溶液，測定6次，每次間隔4h，結果峰面積值的RSD=1.2%（n=6）。表明供試品溶液在室溫保存24h內測定結果穩定。
　　2.3.4加樣回收試驗精密稱取已知鹽酸小檗堿含量的同一批樣品（0.8341mg?g-1）9份，分別精密加入對照品儲備溶液②3、4、6mL，各3份，揮干溶劑，按供試品溶液的制備法制備并測定含量，計算回收率，平均回收率為100.7%，RSD=1.4%（n=9）。
　　2.4樣品含量測定取本品適量，按供試品溶液的制備法制備溶液2份，分別精密吸取10μL，注入液相色譜儀，記錄峰面積，以外標法計算。12批樣品樣品鹽酸小檗堿的含量分別為0.20、0.15、0.15、0.25、0.20、0.22、0.25、0.25、0.26、0.26、[LL]0.27、0.30mg/粒（n=2）。
　　3討論
　　火炭星膠囊成分復雜，測定干擾較多，經反復篩選，選定以乙腈-0.4%磷酸（體積比22：78）為流動相。采用此流動相，基線平穩，樣品中鹽酸小檗堿峰形對稱，與相鄰色譜峰分離度較好，保留時間適宜，系統穩定。通過對不同流動相比例與流速、不同品牌色譜柱及不同液相色譜儀測定結果的考察，認為所采用測定方法具較好的適應性。結果表明所用方法重復性良好，回收率高，操作簡便，可用于該制劑的質量控制。[KH*1D]
　　參考文獻：
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