男性不育患者抗精子抗體檢測及臨床應用

世界衛生組織（WHO）在不育夫婦標準檢查與診斷手冊中，將免疫學病因列為男性不育診斷分類之一，男性不育患者抗精子抗體（AsAb）臨床檢測陽性率10%～30%。2009年對183例精液分析顯示有精子凝集、精子不活動或精子畸形率高的不育患者，進行抗精子抗體檢測，結果報告如下。

資料與方法

2010年門診收治183例不育患者，精液分析顯示精子凝集、精子不活動或精子畸形率＞30%，年齡23～35歲，病史2～7年。

方法：①手淫法采集被檢者全份精液標本，置37℃水浴箱完全液化，500×g離心10分鐘，備用。②蒸餾水按20:1的比例將濃縮洗滌液稀釋備用，同時配制含5%小牛血清的樣品稀釋液。③按待檢標本取相應的抗原包被微孔板，同時取3個微孔板分別作為空白對照、陰性對照、陽性對照。除陰、陽性對照孔外，每孔加樣品稀釋液50μl，待檢精漿50μl。陰、陽性對照孔分別加陰、陽性對照液100μl混勻。用封膜覆蓋反應板，置37℃溫育40分鐘。④用配好的洗滌液洗板4次，每次300μl/孔，每次3分鐘，拍干。⑤每孔加酶結合物2滴，充分混勻后，用封膜覆蓋，置37℃溫育30分鐘。⑥甩凈孔內液體加洗滌液洗板，洗滌方法同步驟4。⑦每孔加顯色劑A、B各50μl，混勻后室溫下避光反應10分鐘。⑧每孔加終止液50μl，終止反應。⑨結果判定：以空白對照孔調零，測450nm吸光度值。P/N（待測樣本OD值/陰性對照OD值）≥2.1為陽性。

統計學處理：將所得實驗數據采用SPSS11.5統計軟件進行統計分析。組間比較采用t檢驗，方差不齊時采用t檢驗。結果以P＜0.05為差異有統計學意義。

結 果

183例檢測樣本中，AsAb陽性77例，陽性率42.1%。近年報道^［1～3］，不育患者AsAb陽性率10.2%～32.6%，檢測結果高于報道，其差異有統計學意義（P＜0.01）。

討 論

精子作為一種獨特的抗原與機體免疫系統接觸后，可引起自身或同種免疫反應而產生抗精子抗體，人類精子抗原分固有抗原和附著抗原，固有抗原為精子發生過程中產生的，而附著抗原為精子進入附睪或精漿時，一些蛋白質吸附在精子膜上形成的，這兩類抗原都能誘發機體產生抗精子抗體。正常情況下，由于血睪屏障的存在，機體免疫系統并不會對精子產生免疫反應，但如果生殖系統有炎癥、外傷、手術等損傷了這一屏障，可導致精子或其可溶性抗原漏出并被局部吞噬細胞吞噬，進而致敏淋巴細胞發生免疫反應，從而產生抗精子抗體。

對于育齡期婦夫而言，一旦抗精子抗體在體內出現，就可能引起不育。抗精子抗體影響生育的主要途徑有以下幾個方面：①抗精子抗體，尤其是IgM抗體可以與精子結合，導致精子的凝集，凝集的精子活動受到影響，不能與卵子結合；②抗精子抗體可以與精子的尾部發生反應，影響精子的運動；③抗精子抗體的Fc段與宮頸黏液糖蛋白結合，干擾精子穿過排卵期宮頸黏液；④在多核中性粒細胞和巨噬細胞的表面存在抗精子抗體的Fc段受體，它們結合后可以激活補體系統，從而破壞精子的膜結構和導致精子的活動喪失：⑤抗精子抗體與精子頭部結合后可以干擾精卵結合，阻止精子穿透卵細胞。

臨床上如何判斷患者是否需要進行抗精子抗體檢測，戴繼燦對體檢測的指征總結如下^［4］：①精液分析顯示精子出現凝集現象、精子不活動或者精子形態異常增加；②懷疑梗阻引起精子計數下降或無精子時，抗精子抗體檢測有助于診斷；③不明原因的不育；④性交后6～12小時內宮頸黏液中出現不動或搖擺運動的精子；⑤輸精管結扎后復通的患者；⑥配偶因為生育問題打算進行侵入性檢查；⑦準備進行體外授精選擇治療方案前。我中心正是選擇性的進行抗精子抗體檢測，因而陽性率較高。

對于抗精子抗體陽性患者，治療可選擇類固醇激素藥物，如強的松或甲基強的松，其機理為抑制新的抗體產生和促進已經產生的抗體退變，治療的成功率存在個體差異，主要與抗體降解速度和類固醇激素的代謝速度有關。一般而言，類固醇激素使用2周后，抗體可降低到最低水平，但也有研究者認為類固醇激素可以降低頂體酶的活性，影響精卵結合能力，這些潛在的不良反應也為藥物治療帶來隱患。除藥物治療外，還可以選擇輔助生殖技術進行治療：①宮腔內人工授精（IUI）:通過IUI進行治療，可以使更多的精子避開宮頸黏液對運動的干擾到達子宮，治療的成功率與抗精子抗體的滴度有關；②體外授精（IVF）、IVF可以使精子完全避開女性生殖道內免疫因素的干擾，在體外直接與精子結合，IVF治療成功率高于IUI，它適合女方血清或宮頸黏液中存在抗精子抗體，或精子與抗精子抗體結合比例<50%的患者；③卵胞漿內單精子注射（ICSI），ICSI是解決抗精子抗體導致不育問題最有效的方法，ICSI可以解決各種環境中抗精子抗體的不良影響。

盡管抗精子抗體影響生育，但是它并不能完全消除自然生育的可能性，有部分抗精子抗體陽性的患者仍然可以自然受孕。在臨床上，盡可能掌握抗精子抗體的檢測指征，對癥處理，以提高不育癥患者的治愈率。

參考文獻

1 王啟鳳，謝曉東，江平.不孕不育患者抗精子抗體分析.中國優生與遺傳雜志，2006，14（6）:110-118.

2 鄭艷芬，鄧輝.不孕不育患者免疫性抗體檢測結果分析.實用醫技雜志，2006，13（7）:1102.

3 馬為群.910例不孕癥患者抗精子抗體檢測的結果分析.浙江中醫藥大學學報，2006，30（5）:504-505.

4 載繼燦.抗精子抗體檢測指征以及臨床處理.中國男科學雜志，2004，23（3）:62.