摘 要 目的:強調糞便隱血化學法和免疫法各自的特點優勢及互補作用。方法:化學法用匹拉米洞法,免疫法用雙抗體夾心法。結果:化學法對上消化道出血靈敏,但受食物藥物干擾,免疫法對下消化道出血靈敏,不受食物藥物干擾,但上消化道微量出血、后帶現象易產生假陰性。結論:兩種方法結果綜合分析才能報出結果。
關鍵詞 糞便隱血 檢測方法 優勢對比
化學免疫檢測方法原理
化學法:利用血紅蛋白中的含鐵血紅素有類似過氧化物酶的作用,其可催化分解過氧化氫,釋放新生態氧,新生態氧因氧化能力較強,可氧化色原物而使之呈色。例匹拉米洞法,氧化匹拉米洞而產生紫藍→紫紅的顏色。
免疫法:采用雙抗體夾心法,如果標本中含有血紅蛋白,與試紙條測試區的抗血紅蛋白的抗體結合出現紫紅色條帶。
檢測方法
化學法,將顯色劑A(匹拉米洞5%)滴1滴至濾紙中的標本,再滴一滴顯色劑B(雙氧水3%)之后5分鐘內觀察顯色結果。
免疫法用采樣棍取少量的糞便標本涂抹于簡易濾紙片中,留(10~50mg)大約1根火柴頭大小放入0.5ml蒸餾水的試管中混勻。將免疫試紙條箭頭所指的一端浸入標本混合液中,在5分鐘內觀察結果。結果判讀
化學法結果顯示:①滴加顯色劑B之后,隨即出現紫藍色陽性反應,報告為(++++)。②滴加顯示劑B之后,在10秒內出現紫藍色陽性反應,報告為(+++)。③滴加顯色劑B之后,在1分鐘內出現紫紅色陽性反應,報告為(++)。④滴加顯色劑B之后,在1分鐘后5分鐘內出現紫紅色陽性反應,報告為(+)。⑤滴加顯色劑B之后,沒有產生任何顏色反應,報告為陰性(-)。
免疫法結果顯示:在5分鐘內觀察結果,對照線會出現紫紅色,觀看測試線可以得到下列結果:①陽性結果:測試線出現紫紅色。②陰性結果:測試線不出現紫紅色。③如果測試線和對照線均不出現紫紅色,則表示試紙條已失效。④10分鐘之后所判讀的結果,不代表任何意義。
化學免疫綜合結果分析
見表1。
化學、免疫檢測方法各自的優勢對比
化學法優勢:上消化道出血時化學法比免疫法陽性檢出率高。雖然檢測的基本原理相同,但受試劑類型、糞便中血紅蛋白的多少,過氧化氫的濃度,血液在腸道中滯留的時間、標本量的多少以及食物、藥物等眾多因素的影響,而結果差異較大。①動物性食品可使隱血試驗出現假陽性;大量生食蔬菜也可使結果出現假陽性。②大量服用維生素C等還原性藥物可出現假陰性;血液在腸道中停留過久,血紅蛋白被細菌降解也會導致假陰性。
免疫法優勢:下消化道出血時,免疫法比化學法靈敏度高,本方法不受飲食的限制藥物的干擾,能準確檢測無癥狀,少量、持續的消化道出血,特異性強。但上消化道少量出血時,血中的紅細胞往往會被胃酸或胃液中的酵素分解成血基質,而以血基質狀態存在于糞便中,免疫法對血紅蛋白(Hb)具有特異性,對血基質則沒有,可能因此產生假陰性;另當患者糞便中隱血量很大時,免疫法亦可能出現后帶現象假陰性。
參考文獻
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