【摘要】 目的 探討Lillis Mayer氏蘇木素染色使用過程的穩定性、持久性及染色效果。方法 對Lillis Mayer氏與Harris氏蘇木素在配方及使用過程進行比較。結果 Lillis Mayer氏與Harris氏蘇木素染色均胞核著色細致、清晰,顏色鮮艷。但在配方配制上Lillis Mayer氏蘇木素較Harris氏蘇木素安全,且Lillis Mayer氏蘇木素使用時間較Harris氏蘇木素長。結論 Lillis Mayer氏蘇木素是一種配制方便、即配即用、性能穩定、染色效力強、對組織染色適應范圍廣的良好胞核染色劑,與Harris氏蘇木素相比有更多的優點,值得推廣使用。
【關鍵詞】 Lillis Mayer氏蘇木素; Harris氏蘇木素; 玻璃器皿
Lillis Mayer and Harris haematoxylin coloring agent contrast application and discussion WAMG Xiao-hong,ZHANG Li-juan,ZHENG Yan-xuan,et al.Guangdong Province Zhuhai Zhongshan University Attached Fifth Hospital,Zhuhai 519000,China
【Abstract】 Objective To investigate the stability , persistence and dyeing effect of Lillis the Mayer haematoxylin dyeing property.Methods To compare the Lillis Mayer and Harris haematoxylin in formula and use process comparison.Results Lillis Mayer and the Harris haematoxylin dyes the even nucleus coloration to be careful, to be clear, the color was bright. But Lillis the Mayer haematoxylin compares the Harris haematoxylin security in the formula configuration, and Lillis the Mayer haematoxylin period of revolution compared the Harris haematoxylin to be long.Conclusion Lillis the Mayer haematoxylin was one kind of configuration convenient, namely matches strongly namely with the stable property, the dyeing potency, dyes the adaptation scope broad good nucleus coloring agent to the organization, was known as more merits compared to the Harris sappan caesalpinia, was worth promoting the use.
【Key words】 Lillis Mayer haematoxylin; Harris haematoxylin; Glassware
蘇木素是一種純天然染料,其染色性能差,經過多年精心加工配制,現用的蘇木素配方,染色性能好,保持時間長,是世界上唯一的常規細胞核染料[1]。目前,多數醫院病理科及實驗科都是選用Lillis Mayer氏[2]或Harris氏蘇木素作為蘇木素、伊紅染色劑的細胞核染色劑,兩種細胞核染色液各有一定的優點和不足之處。我們科通過十年來八萬多例活檢切片標本和大量細胞學涂片染色,對Lillis Mayer氏和Harris氏蘇木素染液在使用過程的穩定性、持久性及染色效果等方面作對比,現將對比效果報告如下。
1 材料與方法
1.1 Lillis Mayer氏蘇木素染液 材料:蘇木素5 g,蒸餾水700 ml,明礬50 g,碘酸鈉0.5 g,甘油300 ml醋酸20 ml。量取適量的蒸餾水加入研細的明礬,稍加溫,搖動助溶,再加入蘇木素并使之溶解,待溫度升至80 ℃再加入碘酸鈉,繼續煮沸3~5 min,溫度稍下降后加甘油,冷卻后過濾,再加入醋酸,即可使用(染色時間10~15 min)。
1.2 Harris氏蘇木素染液 材料:蘇木素1 g,無水乙醇10 ml,硫酸鋁鉀20 g,蒸餾水200 ml,氧化汞0.5 g。A液:將蘇木素倒入無水乙醇中,完全溶解后待用。B液:將硫酸鋁鉀倒入蒸餾水中,加溫完全溶解后待用。在溶解完畢的B液內加入A液,混勻后加溫煮沸;將燒杯遠離明火,加入氧化汞后用玻璃棒攪勻,此時液體會從玫瑰紅色變為深紫色(加氧化汞時需要少許且慢慢加入)。將燒杯置于流動冷水之中,使染液立即冷卻至常溫后過濾使用。
2 結果
兩種蘇木素染液染色后,細胞核呈藍色[3],Lillis Mayer氏蘇木素較Harris氏蘇木素在著色上更細致、清晰,顏色鮮艷,同時無沉渣及氧化膜的污染。
3 討論
蘇木素作為常規細胞核染料在各醫院病理科及實驗室廣泛應用,由于其配方多樣,配制出的染液在穩定性、持久性及染色效果上也各有不同。Lillis Mayer氏明礬蘇木素染液是一種配制方便、即配即用、性能穩定、染色效果強、對組織染色適應范圍廣的良好胞核染色劑,其染色能力在使用中可以達到持續性增強的效果,既能用于日常工作中的退行性染色,也能適應增進性染色,胞核著色很細致、清晰,顏色鮮艷,與Harris氏蘇木素比較有較大的優越性。(1)無沉淀現象:Lillis Mayer氏蘇木素經較長時間后(約三個月)也不會象Harris氏蘇木素那樣出現黑色顆粒狀的沉淀物,也不必經常過濾,這種染液我們除了用于HE染色外,還用于細胞學巴氏染色。盡管一些組織切片或涂片有較多的粘液物質,也沒有出現蘇木素沉淀污染現象。(2)避免過度氧化:Harris氏蘇木素配制后染液的表面經常出現一層氧化金屬膜,這是黃色氧化汞和蘇木素氧化還原反應不完全,經光線分解氧化后所出現的一種金屬膜,這些氧化物質對組織的著色都會造成一定的影響。所以,染色前都要將金屬氧化膜清除掉,既煩瑣又費時,而采用Lillis Mayer氏蘇木素,完全克服了這種現象。(3)染色能力持久:Harris氏蘇木素還有一大弱點是染液的持久性能較差,染液配制三個月后,著染色速度和選擇性即降低,但Lillis Mayer氏蘇木素持久性較好,配制后可以儲藏一年的時間,就算在工作中連續使用3~6個月后,也不會改變著色速度和對組織的選擇性能。
其次,兩種蘇木素染液在氧化劑上的選擇有所不同,而氧化劑的選擇是蘇木素氧化反應是否完全的先決條件。Lillis Mayer氏蘇木素和Harris氏蘇木素分別先擇碘酸鈉和黃色氧化汞作為各自的氧化劑[4],雖然碘酸鈉和黃色氧化汞都是化學氧化劑,但是,兩種氧化劑的理化性狀有較大的區別,主要表現在三個方面:(1)氧化強度不同:碘酸鈉在氧化還原時,它的電極電位所產生的電對值+1.20伏特,黃色氧化汞的電對值+0.85伏特,兩者對比碘酸鈉的電對值大于黃色氧化汞,根據化學氧化還原電極電位數據規律表明,氧化劑的電對值愈大,其氧化態愈容易獲行電子,也就表明它的氧化能力愈強。由此可見碘酸鈉的氧化能力比黃色氧化汞要強40%以上,從而提高了蘇木素的氧化成熟程度。(2)理化性狀不同:碘酸鈉是溶于水的氧化劑,黃色氧化汞則不溶于水和醇,所以,選用碘酸鈉作為水溶性蘇木素的氧化劑是比較合理的。因為碘酸鈉在蘇木素水溶液中分布是均勻的,分子之間的氧化交換自然也是呈均勻的反應,氧化還原作用也相對得到持續性的增強,染液的染色效果得到明顯的提高。而黃色氧化汞的水溶性差,在蘇木素水溶液中氧化還原反應極不均勻,反應物所產生的有效成分少,蘇木素的形成受到較大的限制,從而影響了蘇木素染液的著染能力和持久性能。(3)軟化劑起穩定助溶作用:甘油是一種軟化劑的溶液,加進蘇木素染液后,使溶液本身的復和物(色淀)的溶解性得到軟化性的加強,對染液的穩定性起了一定的作用,減少了過度氧化和沉淀物的出現,加快了染液中的復和物顆粒與組織之間的交換作用,所以,經Lillis Mayer氏蘇木素染色后的細胞核著色均勻細致,細胞核染色質的結構清晰。(4)碘酸鈉無毒,使用安全;而黃色氧化汞為劇毒試劑。
再次,Lillis Mayer氏蘇木素染色劑與Harris氏蘇木素染色劑在染色過程中,如果染色時間過長,Lillis Mayer氏蘇木素染色劑不會造成細胞核過染,而Harris氏蘇木素染色劑則會形成過染,影響制片質量。
綜上所述,Lillis Mayer氏蘇木素染色劑在配制及使用方面均優于Harris氏蘇木素染色劑,值得推廣使用。
參 考 文 獻
[1] 王伯沄,李玉松,黃高昇,等.病理學技術.北京:人民衛生出版社,2000:132.
[2] C.F.A. Culling.組織病理學與組織化學技術手冊.北京:科學出版社,1982:157.
[3] 王伯沄,李玉松,黃高昇,等.病理學技術.北京:人民衛生出版社,2000:130-131.
[4] 段長強.現代化學試劑手冊.北京:化學工業出版社,1988:278.