外周血CD4+CD25+CD127-調節性T細胞在過敏性紫癜中的表達及意義

[摘要] 目的 探討外周血CD4+CD25+CD127+調節性T細胞在HSP患兒治療前和治療后的表達及其臨床意義。 方法 選取HSP患兒41例作為觀察組，選取健康兒童41例作為對照組，檢測對照組兒童及觀察組患兒治療前后的CD4+CD25+CD127+值。 結果 （1）治療前與對照組比較，CD4+CD25+CD127+明顯降低（P ＜ 0.05）；（2）與治療前比較，觀察組患兒的CD4+CD25+CD127+值在治療后明顯升高（P ＜ 0.05）；（3）與對照組比較，觀察組患兒治療后CD4+CD25+CD127+值差異無顯著性（P ＞0 .05）。 結論 外周血CD4+CD25+CD127+值在HSP患兒治療前顯著降低，給予有效的治療后其值顯著升高，可能在HSP的發生發展過程中調節性T細胞進行了參與。而對于HSP患兒對疾病的有效預測，可以對其CD4+CD25+CD127+值進行測定。

[關鍵詞] 過敏性紫癜；外周血CD4+CD25+CD127-；調節性T細胞

[中圖分類號] R725.5 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2012）03-0092-02

Expression and significance of peripheral blood CD4 + CD25 + CD127-regulatory T cells of children with Henoch-Schonlein purpura

LI Yi HE Chaoqi ZHAO Yuan

Department of Laboratory， Xiaoshan District the First Hospital Affiliated of Hangzhou Normal University Hospital， Hangzhou 311201， China

[Abstract] Objective To explore the level of CD4+CD25+CD127+regulatory T cells in children with Henoch-Schonlein purpura before and after treatment and its clinical significance. Methods Selected 41 cases with Henoch-Schonlein purpura as the observation group and 41 cases of healthy children as control group， test CD4+CD25+CD127+ in two group. Results (1)Before treatment compared with control group， CD4+CD25+CD127+ significantly lower (P ＜ 0.05); (2)Before treatment and observation groups， the observation group of children with CD4+CD25+CD127+ the value was significantly higher after treatment (P ＞ 0.05); (3)Compared with the control group， study group patients after treatment CD4+CD25+CD127+ value of the difference was not statistically significant (P ＞ 0.05). Conclusion Peripheral blood CD4+CD25+CD127+ value in the treatment of children with Henoch-Schonlein purpura were significantly reduced， giving an effective treatment significantly increased its value， may be allergic purpura development of the disease process of regulatory T cells were involved. For children with Henoch-Schonlein purpura predict the disease， can their CD4+CD25+ CD127+ values were determined.

[Key words] Henoch-Schonlein purpura; Peripheral blood CD4+CD25+CD127+; Regulatory T cells

過敏性紫癜（Henoch-Schonlein purpura，HSP）是一種系統性血管炎，其主要的病變為小血管炎，能夠累及全身的多個系統；過敏性紫癜具有廣泛的病變，較難治療并且疾病容易反復發作[1，2]。目前對于過敏性紫癜的病因及具體的發病機制還不清楚。筆者選取過敏性紫癜患兒及同期健康體檢的兒童，檢測治療前后的CD4+CD25+CD127+值，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

收集2010年11月～2011年5月我院收治的41例HSP患兒作為觀察組，疾病的診斷依據參考文獻[1]，均為第一次患病。研究對象中排除使用過糖皮質激素及免疫抑制劑治療的患兒，其中男20例，女21例，最小年齡6歲，最大13歲，平均（8.31±3.5）歲。所有研究對象均給予對癥治療，患兒臨床癥狀消失后，門診均實施時間為1個月的隨訪。選取來我院進行健康體檢的兒童41名作為對照組，其中男19例，女22例，最小年齡5歲，最大15歲，平均（8.96±3.9）歲。兩組的臨床資料經統計學分析差異無統計學意義（P ＞ 0.05）。

1.2 方法

1.2.1 儀器及試劑 檢測儀器為流式細胞儀（FC500型），美國COULTER公司提供。試劑為美國貝克曼庫爾特有限公司的CD4+PC5，CD25+FITC，CD127+PE，ptiLyse Lysing Solution（溶血素）。

1.2.2 方法 兩組研究對象均于清晨空腹狀態下抽取外周靜脈血1 mL，使用的抗凝劑為EDTA。向試管中加入5 μL CD4+PC5、CD25+FITC，CD127+PE單克隆抗體，然后將抗凝靜脈血20 mL加入每支試管中，混和均勻充分后，在室溫條件下避光孵育30 min，然后加入100 μL紅細胞裂解液（溶素），離心，1200 r/min，5 min，取沉淀用生理鹽水洗滌1次，最后懸浮細胞使用0.9%氯化鈉溶液500 μL，使用流式細胞儀對10 000個淋巴細胞進行檢測。

1.3 統計學處理

本研究的數據結果的分析采用SPSS11.5軟件進行，多組間的計量資料的比較采用方差分析，如有統計學意義則不同組別的兩兩比較采用t檢驗，采用χ2檢驗對計數資料的不同組別進行比較，P < 0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

由表1可見，與正常對照組比較，治療前觀察組患兒外周血CD4+CD25+CD127+調節性T細胞水平明顯較低（t=3.82，P ＜ 0.01）。觀察組治療后與治療前進行對比發現其水平顯著升高（t = 2.07，P < 0.01），觀察組治療后CD4+CD25+CD127+調節性T細胞水平與對照組比較相近且差異無統計學意義（t=1.15，P＞0.05）。

3 討論

過敏性紫癜（HSP）近年來在我國的發病率逐年上升，且較難治愈[3-6]。目前對于過敏性紫癜的具體發病原因還不清楚，其發病機制也有待進一步的研究。有報道表明，不僅調節性T細胞的數量與過敏性紫癜的發生關系密切，其功能異常也會對此種疾病的發生產生重要的影響。

Treg細胞是一組T細胞亞群，具有免疫功能。其中T淋巴細胞CD4+CD25+Treg細胞具有較少的數量，但卻具有非常重要的作用，其具有免疫無能性和免疫抑制性，能夠介導非常復雜的抑制作用，其發揮抑制作用的途徑較多。在胸腺發育成熟后CD4+CD25+Treg進入外周淋巴組織，有報道表明，機體的自身免疫性疾病與CD4+CD25+Treg數量或功能異常有密切的關系。在該組Treg細胞中目前發現的最特異的標記為轉錄因子Foxp3，其不僅對Treg細胞在胸腺的發育和成熟起著控制作用，而且還控制著Treg細胞在胸腺發揮功能。CD127（L-7受體α鏈）是在新鮮分離出來的正常人外周血中發現的一種新指標，其較低的表達水平與Foxp3較高表達水平具有較高的相關性，故現在Treg細胞均采用CD4+CD25+CD127+來代表，最大優點是能夠使體內CD4+CD25+調節性T細胞的水平真實準確地反映出來，是通過去除高表達CD25的效應性T細胞來實現的[7，8]。

本研究發現，過敏性紫癜患兒在治療前與正常對照組比較，CD4+CD25+CD127+Treg水平明顯較低，治療后與治療前比較，CD4+CD25+CD127+Treg細胞明顯升高，治療后與正常對照組比較較為接近，差異無統計學意義，此結果提示，可能在過敏性紫癜患兒的發病中CD4+CD25+CD127+Treg細胞進行了參與，對于疾病發展起到一定的影響作用。推測其發病機制可能是過敏性紫癜患兒具有較低的Thl/Th2水平，表明機體不具有平衡的免疫功能。CD4+CD25+CD127+Treg細胞能夠對自身反應性T細胞起到控制作用，而此作用的發揮是通過分泌免疫調節因子而對Thl/Th2 T細胞群的發展起到調節作用的，過敏性紫癜患兒急性期體內具有較少的CD4+CD25+CD127+Treg細胞，這會明顯地減少其所分泌的細胞因子，不能使其對Thl/Th2 T細胞群的發展的調節作用充分的發揮，影響了Thl/Th2 T細胞群比例的平衡，最終出現炎癥反應失控導致自身免疫損傷；②許多抑制性因子IL-10或TGF-β等均可由CD4+CD25+CD127+Treg細胞活化后產生，當IL-10細胞的水平降低或者其功能受到影響出現降低，在以上這種條件下，機體都有可能發生變態反應性疾病；③TCR介導的信號能夠使CD4+CD25+CD127+Treg細胞活化，當其具有較低的表達水平時或功能出現降低時，也會降低其對CD4+和CD8+ T細胞的活化及增殖的抑制作用，這也破壞了機體的免疫耐受平衡[9]。

過敏性紫癜患兒給予有效的治療后，與治療前比較，治療后外周血調節性T細胞數量明顯升高，與正常組比較相近且差異無顯著性，結果提示，在過敏性紫癜患兒急性發作時，外周血CD4+CD25+CD127+ Treg水平明顯減少，這就破壞了機體免疫內環境的總體平衡，給患者采取相應的治療措施以后，如何收到顯著的治療效果，降低的外周血CD4+CD25+CD127+ Treg細胞水平能夠升高接近至正常水平。研究中筆者發現，患兒的疾病嚴重程度與外周血CD4+CD25+CD127+ Treg細胞水平有明顯的相關性，其越具有較高的水平代表患兒所患疾病越嚴重，治療起來越困難，總之，臨床上通過對過敏性紫癜患兒外周血CD4+CD25+CD127+ Treg細胞水平進行檢測來評估疾病的治療效果及預后是可行的。

綜上所述，過敏性紫癜患兒治療前外周血CD4+CD25+CD127+Treg細胞水平明顯降低，提示其可能參與疾病的發生及其發展，進一步研究CD4+CD25+CD127+Treg細胞在過敏性紫癜的發病機制中所起的作用，可為此類疾病的預防及提供治療方案拓展新思路及新方法。

[參考文獻]

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[8] 姚翠嬋，曾華松，于樂，等. 過敏性紫癜患兒外周血CD4＋CD25＋調節性T細胞的表達[J]. 實用醫學雜志，2009，25（4）：555-556.

[9] 童琳琳，常虹，郝國平，等. 過敏性紫癜患兒外周血CD4+CD25+CD127+調節性T細胞表達及意義[J]. 中國現代藥物應用，2011，5（1）：3-5.

（收稿日期：2011-10-10）