血漿sCD40L、sICAM-1變化與子癇前期的相關性研究

趙大印 辛虹

子癇前期為產科常見而特有的妊娠并發癥，是導致孕產婦和圍生兒患病率和病死率升高的主要原因之一，其病因及發病機理尚未明確。近年來，越來越多的研究提示炎癥與免疫在子癇前期的發生、發展中起重要作用。炎癥激活的主要過程是血管內皮細胞功能紊亂，而白細胞分化抗原可溶性CD40配體(soluble CD40 ligand，sCD40L)與可溶性細胞間粘附因子-1(soluble intercellular adhesion molecule-1，sICAM-1)是近年來新發現的兩種重要的免疫性炎癥因子，過度表達可以誘發內皮細胞的激活與損傷，參與調節氧化應激、血管炎癥與免疫等生理病理過程［1］?，F有研究表明，sCD40L、sCD40L水平在高血壓患者體內顯著升高，但較少用于子癇前期的相關研究［2］。為探討血漿中二者水平變化在子癇前期發生、發展過程中的作用及其臨床檢測價值，本文對子癇前期患者血漿中sCD40L、sICAM-1的變化進行測定并加以臨床分析，報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 參照全國高等醫學院校教材《婦產科學》［2］妊娠期高血壓疾病的診斷標準，選擇2011年1至12月在河北醫科大學第二醫院收治的的子癇前期患者80例，其中輕度子癇前期(mild preeclampsia，MPE)40例(MPE組)，重度子癇前期(severe preeclampsia，SPE)40例(SPE組)。同時隨機選取40例正常晚期孕婦為對照組，所選孕婦均無其他合并癥，孕前無高血壓、糖尿病、腎臟疾患等內科合并癥，研究對象均為單胎、初產，均以剖宮產方式終止妊娠。

1.2 研究方法 所有孕婦入院后接受治療前空腹12 h于清晨取靜脈血5 ml，置于抗凝試管，3 000 r/min離心15 min分離血漿，－70℃冰箱保存待測。采用ELISA法分別檢測受試者血漿sCD40L、sICAM-1水平，sCD40L試劑盒美購于美國ADL公司，sICAM-1試劑盒(BMS236)購于Bender公司，按照試劑盒說明書嚴格操作。

1.3 統計學分析應用SPSS 13.0統計軟件，計量資料以±s表示，采用t檢驗，指標間相互關系采用直線相關性分析(Pearson檢驗)，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 一般情況 子癇前期患者(MPE組+SPE組)年齡19～35歲，平均年齡(28±4)歲，平均孕周(35±2.5)周;對照組孕婦平均年齡(28±4)歲，平均孕周(37.8±3.3)周。MPE組與SPE組患者的血壓均較對照組明顯增加(P＜0.05)，且SPE組的收縮壓明顯高于MPE組(P＜0.05);3組孕婦的孕周、年齡差異無統計學意義(P＞0.05)。見表1。

表1 3組研究對象一般情況比較n=40，±s

表1 3組研究對象一般情況比較n=40，±s

注:與對照組比較，*P ＜0.01;與 MPE 組比較，#P ＜0.05

組別 年齡(歲) 孕周(周) 收縮壓(mm Hg) 舒張壓(mm Hg)28 ±4 37.8 ±3.3 110 ±14 77 ±8 MPE 組 27±5 37.3±1.4 152±8* 97±8*SPE 組 27±5 36.7±2.2 168±12*# 104±10對照組*

2.2 3組血漿sCD40L、sICAM-1檢測結果 MPE和SPE組的血漿sCD40L、sICAM-1均明顯高于對照組(P ＜0.05)，而且SPE組和MPE組比較兩指標亦明顯升高 (P＜0.05)。見表2。

表2 3組研究對象血漿sCD40L、sICAM-1檢測結果n=40，±s

表2 3組研究對象血漿sCD40L、sICAM-1檢測結果n=40，±s

注:與對照組比較，*P ＜0.05;與 MPE 組比較，#P ＜0.05

組別 sCD40L(ng/ml) sICAM-1(ng/ml)3.12 ±1.65 547 ±272 MPE 組 7.69 ±2.04* 936 ±294*SPE 組 10.83 ±2.69*# 1 445 ±326*#對照組

2.3 相關性分析 將3組孕婦血漿sCD40L、sICAM-1水平分別進行相關性分析，結果表明輕、重度子癇前期組孕婦血漿sCD40L與sICAM-1水平均呈正相關(r=0.625，r=0.714;P＜0.01)，而對照組孕婦血漿sCD40L與sICAM-1無明顯相關性(r=0.189，P ＞0.05)。

3 討論

子癇前期是于妊娠20周后發生的全身多系統、多器官功能紊亂，主要病理變化為全身小動脈痙攣，中心環節是血管內皮細胞功能損傷?，F認為炎癥、氧化應激反應、血小板過度活化所致高凝狀態等可能是造成內皮細胞功能障礙重要因素［3］。CD40L是腫瘤壞死因子超家族成員之一，激活后以sCD40L形式存在于血液中，參與體內的體液免疫、炎癥、血管發生、動脈粥樣硬化等多種病理生理過程。研究發現，子癇前期的發生與sCD40L的激活有關［4］。ICAM-1是細胞粘附因子中免疫球蛋白超家族成員，其生物學作用主要是維持完整的血管內皮細胞單層結構，ICAM-1主要表達在細胞膜表面和基質中，在于血液中以可溶性形式sICAM-1存在。有研究表明，sICAM-1水平在子癇前期患者臨床癥狀出現前3～15周明顯增高。本研究對子癇前期患者血漿中sCD40L、sICAM-1的變化進行測定并加以臨床分析，結果表明，子癇前期孕婦血漿中sCD40L、sICAM-1水平明顯升高，可能參與了子病前期的發病機制，并導致血管內皮功能損傷。血漿sCD40L與sICAM-1水平與子癇前期的嚴重程度密切相關。

3.1 sCD40L與子癇前期的相關性 目前認為子癇前期的發病過程分為兩階段:胎盤血液灌注減少，為病理變化形成過程的第一階段;全身血管內皮損傷，各器官受損，孕婦逐漸出現各種臨床癥狀為第二階段［5］，其中血管內皮細胞功能損傷是病理過程的中心環節。CD40L是腫瘤壞死因子受體超家族Ⅱ型跨膜糖蛋白，是CD40的天然配體，以無活性的形式大量于CD+4 T淋巴細胞、血小板、單核細胞中。當細胞被5＇-二磷酸腺苷(ADP)、凝血酶和膠原等激活后，無活性的CD40L可迅速生成一個具有生物活性、可溶性的三聚體片段，既為sCD40L。有研究證實血循環中95%以上的sCD40L來源于激活的血小板。已有研究顯示，子癇前期與sCD40L的激活有關［4］。sCD40L具有很強的生物活性，sCD40L過度表達導致炎性因子、炎癥趨化因子、基質金屬蛋白酶以及選擇素類的增加［6］。誘發內皮細胞的激活與損傷，參與調節氧化應激、血管炎癥與免疫等生理病理過程，在子癇前期的發生發展中起著非常重要的作用。

子癇前期患者CD+4T淋巴細胞因子占優勢，其促使中性粒細胞黏附在血管內皮上，可引起血管內皮細胞功能紊亂。內皮細胞功能受損是子癇前期、子癇的發病基礎。研究表明，子癇前期是母體對妊娠的一種過度性炎癥反應，血管內皮損傷是由白細胞、血小板、凝血系統等多種因素共同參與的血管內過度性炎性反應的一部分［7］。sCD40L在介導血栓形成、炎性反應、平滑肌細胞增殖及血管重構中起關鍵作用。sCD40L水平升高促進單核細胞活性氧(ROS)的產生，增加血小板的聚集，促進黏附分子如血管間黏附分子、E-選擇素等的產生，參與血管內皮的損傷，同時sCD40L可刺激血管內皮細胞、平滑肌細胞和巨噬細胞釋放細胞因子IL-1、IL-6、IL-8、IL-12及TNF，這是導致局部血栓形成的關鍵因素。微血栓形成是子癇前期發生的早期病變改變，出現微血栓的時間越早，病情變化越快，對母胎健康的危害越大。同時研究發現子癇前期產生過多的TNF-α會導致滋養細胞凋亡增加，滋養細胞侵入螺旋動脈能力受損，胎盤植入不足引起缺血、缺氧，引發子癇前期的發生。本研究顯示子癇前期孕婦血漿中sCD40L水平較對照組明顯增高，與Darmochwal-Kolarz［8］等的研究結果一致。CD40淋巴細胞所表達的sCD40L能與內皮細胞上的CD加結合，觸發體內的炎癥反應，并導致血小板的過度激活和內皮細胞的損傷。

3.2 血漿sICAM-1水平變化參與子癇前期的病理損傷過程細胞間粘附因子-1(ICAM-1，又稱CD54)是細胞粘附因子中免疫球蛋白超家族成員，主要表達在細胞膜表面和基質中，在血液中以可溶性形式sICAM-1存在。受細胞因子IL-1、IL-6、TNF-α、TNF-γ等誘導表達，其生物學作用主要是維持完整的血管內皮細胞單層結構，增強白細胞與內皮細胞的粘附作用，誘導白細胞穿過血管壁，參與血管炎癥的發生、發展，是反映血管損傷、內皮細胞炎癥的重要因子。檢測血清中sICAM-1水平可反映內皮細胞的活性狀態。國外關于子癇前期患者血清中黏附分子的研究越來越多，有研究表明，sICAM-1水平在子癇前期患者臨床癥狀出現前3～15周明顯增高。由于ICAM-1表達增高，造成內皮細胞損傷。子癇前期發生時白細胞表面的淋巴細胞功能相關抗原-1(LFA-1)、極近活化抗原-4(VLA-4)表達增強，并與內皮細胞表面的sICAM-1親和力增強，內皮細胞大量表達粘附因子，促進白細胞活化，白細胞進一步釋放細胞因子介導炎性反應，直接或間接造成內皮細胞功能失調和損傷，使其單層結構被破壞，機體血管通透性增加，體液蛋白外滲，血管舒張因子減少，收縮因子增加，血管收縮，發生妊娠期高血壓疾病的病理生理改變，臨床上便出現高血壓、蛋白尿、水腫。此外，當血管內皮細胞受損時內皮下膠原暴露，還可以激活凝血途徑，引起血小板聚集增強，從而影響微循環的血流灌注，使組織缺氧加重，進而引發或促進子癇前期的發生，發展，使患者病情加重。Portelinha等［9］在研究中發現有子癇前期病史的女性血漿sICAM-1水平較無子癇前期病史女性顯著升高。在本研究中，測量結果發現子癇前期患者sICAM-1水平明顯高于對照組(P＜0.05)，而且隨疾病的加重而逐漸增高。提示子癇前期存在內皮細胞損害及血管壁的炎癥，sICAM-1的水平升高客觀地反映了患者體內內皮細胞的損傷程度，可以認為sICAM-1是監測子癇前期患者內皮細胞損傷和功能障礙的敏感指標

3.3 子癇前期患者血漿sCD40L與sICAM-1水平的相關性本研究中子癇前期患者血漿sCD40L與sICAM-1水平變化呈明顯正相關。提示sCD40L能通過促進TNF-α、IL-6、IL-8、IL12等的分泌和表達間接誘導血管內皮細胞ICAM-1表達增強，血漿sIACM-1含量升高［10，11］。子癇前期時各種原因引起胎盤缺血缺氧以及局部免疫反應增強，釋放大量炎癥趨化因子，損害內皮細胞功能，血管通透性增加，可使血管舒縮因子、促凝抗凝因子失衡，導致患者全身小動脈痙攣，引發子癇前期的一系列臨床癥狀。

綜上所述，sCD40L與sICAM-1不僅參與了子癇前期的發病過程，而且隨疾病的加重而逐漸增高。檢測血漿sCD40L與sICAM-1水平的變化不僅可反映出內皮細胞的活性狀態，而且對預測子癇前期的發生、發展有重要的臨床價值。

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