新生兒高膽紅素血癥血清神經元特異性烯醇化酶檢測臨床意義分析

金曉秋，曲書強

（1.齊齊哈爾醫學院第二附屬醫院 兒科，黑龍江 齊齊哈爾 161006；2.哈爾濱醫科大學第二附屬醫院 兒科）

高膽紅素血癥是新生兒時期最常見疾病之一，其發病率占住院新生兒首位，達30%－50%［1］。膽紅素腦病是其嚴重的并發癥，病死率很高，幸存者約75%－90%患有嚴重神經系統后遺癥［2］。積極防治膽紅素腦病是非常重要的，因此早期診斷尤為重要。本研究對36名健康新生兒和96名本院新生兒室收治的高膽紅素血癥患兒進行血清NSE、γ－GGT檢測及BAEP檢測，現將結果報告如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選取2010年10月至12月本院新生兒室收治的新生兒高膽紅素血癥患兒作為觀察組，男44例，女52例。選取2008年3月至2009年12月在我院產科出生的健康足月新生兒36例，男20例，女16例。兩組間性別、體重及胎齡均無統計學差異。觀察組入選標準：（1）足月適于胎齡兒，日齡為生后3－7天；（2）以未結合膽紅素升高為主（3）存在肉眼可見的皮膚粘膜黃染；（4）出生否認窒息及新生兒缺氧缺血性腦病、顱內出血或神經系統感染癥狀；（5）否認家族聽力障礙史及圍生期耳毒性藥物使用史；（6）無嚴重全身性感染；（7）無宮內STORCH（梅毒螺旋體、弓形蟲、風疹病毒、巨細胞病毒、皰疹病毒及其他）感染史；（8）無嚴重心、肺疾病，先天畸形及遺傳代謝性疾病。按血清膽紅素水平依據 Maisels所提出的診斷標準［3］分三組，即輕度升高組血清膽紅素（TB）＞205.2μmol／L，≤256.5μmol／L；中度升高組TB＞256.5μmol／L，≤342μmol／L；重度升高組TB＞342μmol／L。

1.2 方法 高膽紅素血癥患兒生后3－7天期間靜脈采血檢測血清NSE和TB、γ－GGT。NSE檢測應用化學發光法，采用鄭州安圖lucy2型化學發光儀檢測，試劑盒由北京福瑞生物工程公司提供；TB檢測應用釩酸氧化法，采用日立7060全自動生化分析儀檢測，試劑盒由北京九強生物技術有限公司提供。于采血檢測血清NSE和TB、γ－GGT的8小時內檢測腦干聽覺誘發電位，采用日本光電5504型肌電誘發電位儀在環境安靜的屏蔽室進行。患兒用10%水合氯醛0.3－0.5 ml／kg口服，待熟睡后檢測。記錄電極置國際10－20系統的A1A2，參考電極置Cz。電極阻抗＜5 kΩ，接地電極置于前臂，帶通濾波100 Hz－3 k Hz，靈敏度50μV／Div。雙耳通過耳罩給予極性疏波刺激，刺激頻率為10 Hz，刺激強度75 d B（n HL），疊加400次，分析時間為10 ms。測試中首先進行BAEP聽閾檢測，刺激強度由低到高，將剛好使Ⅴ波出現的最低強度定為聽閾閾值。聽反應閾正常者繼續完成各項BAEP檢查。每耳測試兩輪，以求較好的重復性，對無反應者可加大刺激強度，最高100 dB，以記錄最佳BAEP波形。BAEP異常的診斷標準［4］為符合以下任一項者為異常：（1）Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ潛伏期與波間期大于對照組X＋2.5 s；（2）Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ波一波缺失；（3）Ⅲ－Ⅴ／Ⅰ－Ⅴ＞1；（4）兩耳間潛伏期或（和）峰間期之差＞0.4 ms。

1.3 統計學分析 應用SPSS11.5軟件包，對結果進行正態性檢驗，正態性數據用均數±標準差表示。呈正態分布方差不齊的兩組數據采用t’檢驗，方差齊的采用t檢驗。多組間比較采用方差分析和q檢驗。計數資料的比較，采用χ2檢驗。兩因素間的相關性采用直線相關與回歸分析。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 不同血清膽紅素水平下的血清NSE、γ－GGT的比較 血清NSE水平在膽紅素重度升高、中度升高、輕度升高組均增高，與對照組之間差異有顯著性；血清γ－GGT升高在輕度升高組與對照組、重度升高組與中度升高組之間差異有顯著性，但在輕度升高組與中度升高組之間差異無顯著性，見表1。

2.2 觀察組血清NSE水平與血清γ－GGT、BAEP異常率相關性分析 觀察組中血清NSE與γ－GGT呈正相關（r＝0.734，P＜0.01）；γ－GGT與BAEP異常率呈正相關（r＝0.812，P＜0.01）；NSE與BAEP異常率呈較弱正相關（r＝0.287，P＜0.05）。

2.3 BAEP異常情況 重度升高組BAEP異常者均為各波潛伏期和波間隙延長且閾值增高超過100 dB，異常19例；中度升高組與輕度升高組BAEP異常者均表現為各波潛伏期或波間隙延長以及閾值輕度增高，中度升高組20例，輕度升高組25例；對照組BAEP異常者多表現為各波潛伏期或波間隙輕度延長，異常13例。經統計分析，重度升高組與中度升高組間、輕度升高組與對照組間的BAEP異常率、異常程度差異均有統計學意義（P＜0.05），而中度升高組與輕度升高組間的BAEP異常率、異常程度差異無統計學意義（P＜0.05）。

表1 不同血清膽紅素水平下的血清NSE、γ－GGT的比較

3 討論

當前人們對膽紅素的研究認識到，輕度升高的未結合膽紅素就具有神經毒性作用；血腦屏障、細胞膜可能以轉運蛋白主動攝取和外泵膽紅素的方式影響及對抗其神經毒性；膽紅素不僅能促進神經系統細胞凋亡壞死，還能在較低濃度影響神經系統細胞的興奮性以及干擾神經元突觸間的信息的傳遞［5］。最近體外研究顯示，未結合膽紅素會一直抑制海馬的突觸傳遞的長時程增強還減少海馬切片突觸場電位的振幅，損壞幼鼠的學習記憶能力［6］。另不同種族和地域、不同胎齡和出生體重的新生兒發生急性膽紅素腦病的血清膽紅素水平不同，國內外學者均提出根據不同胎齡、體重、日齡和高危因素應有不同的干預指征［7，8］。目前關于新生兒急性膽紅素腦病早期診斷的研究已經積累了很多經驗，但研究的指標很多，均缺乏敏感性和特異性，仍很難早期臨床診斷和評估預后。

NSE理化性質穩定，外界環境對其影響不大，在中樞神經系統中，只特異地存在于神經元細胞胞漿中［9］。當腦損傷等因素影響了神經元細胞的代謝變化，神經元細胞膜功能和結構受損時，NSE從胞質釋放至細胞間隙和腦脊液中，穿過破損的血腦屏障進入血液循環，使血清中NSE含量升高。國內多項研究均表明NSE可以作為新生兒腦損傷早期生化標記物，早期診斷腦損傷敏感度和特異度高。對于檢測正常的患兒，免于行顱腦影像學檢查，減少不必要的放射性損傷和經濟消耗［10］。而BAEP是一種簡單易行、無創、敏感的腦功能檢測方法，已成為早期發現和客觀評價腦干病變和聽力異常的可靠工具，特別是對亞臨床型神經系統疾病和聽力損害的早期診斷有重要臨床應用價值。γ－GGT分布在人體多種組織，包括腎、胰、肝、脾、心、腦及生精管等多種組織細胞膜上［11］。血清γ－GGT在人體主要功能是參與γ－谷氨酸循環，與氨基酸通過細胞膜轉運及調節谷胱甘肽水平有關。還原型谷胱甘肽能穩定細胞膜免受有毒物質損害，而當包括血腦屏障及神經細胞的細胞膜穩定性受破壞時，未結合膽紅素更易透過血腦屏障對神經細胞造成損害，血清γ－GGT水平升高提示機體可能正在發生上述變化。

本研究對不同膽紅素水平的患兒行血清NSE、γ－GGT及BAEP檢測，結果顯示血清NSE在輕度升高組、中度升高組及重度升高組均升高，明顯高于對照組，與對照組間差異有顯著性，證實不同程度升高的未結合膽紅素均具有神經毒性作用。而BAEP與血清γ－GGT檢測結果均顯示在輕度升高組與對照組、重度升高組與中度升高組之間差異有顯著性，但在輕度升高組與中度升高組之間差異無顯著性。與血清NSE檢測比較，后者敏感性及特異性高，從而血清NSE作為早期診斷新生兒膽紅素腦病是更合理的。而且發現血清NSE與γ－GGT水平呈正相關，可提示一些未開展血清NSE檢測的基層醫院，可以把血清γ－GGT作為新生兒膽紅素腦病早期診斷和干預的一個參考指標。

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