整合素αv、MMP-2、VEGF表達與卵巢上皮性癌侵襲轉移的關系

湯艷

[摘要] 目的 檢測整合素αv及基質金屬蛋白酶（MMP-2）和血管內皮生長因子（VEGF）在人卵巢上皮性癌的表達，探討整合素與卵巢上皮性癌血管生成及浸潤轉移的關系。方法 采用免疫組織化學SABC法檢測60例卵巢上皮性癌組織及30例卵巢良性腫瘤中整合素αv、VEGF、MMP-2的表達。 結果 60例卵巢上皮性癌中整合素αv、VEGF、MMP-2的陽性表達率分別為68.33%、73.33%和65.00%，30例卵巢良性腫瘤中三者的陽性表達率分別為13.33%、50.00%、43.33%，卵巢上皮性癌與卵巢良性腫瘤組織間3種蛋白陽性表達率差異均有統計學意義（P < 0.05，P < 0.01，P < 0.01）；整合素αv、VEGF、MMP-2與卵巢上皮性癌的分期、分級相關；整合素αv與VEGF及MMP-2的陽性表達均成正相關。 結論 整合素αv在卵巢上皮性癌中高表達，與臨床分期及分級相關；與MMP-2及VEGF的表達呈正相關，表明整合素αv促進卵巢上皮性癌的侵襲轉移。

[關鍵詞] 卵巢上皮性癌；整合素αv；基質金屬蛋白酶-2；血管內皮生長因子

[中圖分類號] R737.31[文獻標識碼] B[文章編號] 1673-9701（2012）29-0049-03

卵巢癌是婦科惡性腫瘤中死亡率最高的一類腫瘤，而卵巢上皮性癌約占卵巢惡性腫瘤的90%，其發展快，預后差，容易發生腹腔內轉移。腫瘤細胞的侵襲和轉移是惡性腫瘤的主要生物學特征，也是腫瘤患者致死的主要原因。整合素是一大類跨膜蛋白細胞粘附分子家族，整合素表達變化與卵巢癌的發生和發展有關，與多種腫瘤的新生血管形成以及瘤細胞侵襲轉移有關。本研究通過檢測整合素αv、血管內皮生長因子（VEGF）和基質金屬蛋白酶（MMP-2）在卵巢上皮性癌組織中的表達情況，探討整合素αv與卵巢癌血管生成及浸潤轉移的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機選擇2001～2011年我院收治的60例卵巢上皮性癌病例，其中漿液性腺癌39例，黏液性腺癌21例。按FIGO（1988）標準進行手術分期，Ⅰ期和Ⅱ期32例、Ⅲ期和Ⅳ期28例。高分化（G1）30例，中分化（G2）17例，低分化（G3）13例。卵巢良性上皮性卵巢腫瘤30例。

1.2 檢測方法

采用免疫組化SABC法，實驗步驟按試劑盒說明書進行。標本經甲醛固定，石蠟包埋，切片厚度5 μm。一抗（整合素αv、VEGF及MMP-2）所用濃度均為1：100稀釋液。采用已知陽性切片做陽性對照，PBS代替一抗作陰性對照。

1.3 實驗結果的判定

染色結果判定方法參考潘穎等[1]研究：顯微鏡下觀察細胞染色情況，細胞漿或細胞膜中出現黃色或棕黃色顆粒為其陽性判定標準，有著色細胞為陽性，無著色細胞為陰性。光鏡下隨機觀察10×40視野，每個視野記錄100個目標細胞，計算陽性細胞的百分比和染色強度評分。根據陽性細胞的比例分為，0分：陽性細胞率<25%；1分：陽性細胞率25%～50%；2分：陽性細胞率50%～75%；3分：陽性細胞率≥75%。依據細胞著色強度計分，0分：無著色；1分為淺黃色；2分為黃色；3分為棕黃色。細胞染色數和細胞染色強度評分乘積即為該例標本整合素αv、VEGF及MMP-2的免疫組化染色結果判定分值，以≥1分視為陽性，<1分視為陰性。

1.4 統計學方法

2 結果

2.1 卵巢良性腫瘤組織及卵巢上皮性癌中整合素αv、MMP-2及VEGF的表達結果

3 討論

惡性腫瘤以侵襲轉移和誘導新血管生成為其重要的生物學特性。目前普遍認為腫瘤的浸潤轉移首先是由腫瘤細胞與基底膜粘附，進而降解基底膜及細胞外基質，使腫瘤突破自身基底膜，在局部增殖形成轉移灶，腫瘤自身基底膜的完整性和腫瘤間質血管的形成在腫瘤浸潤轉移中起關鍵作用[2]。腫瘤血管生長及基質破壞已成為近年來腫瘤學科研究的熱點。

整合素是一種膜鑲嵌糖蛋白，是粘附分子中的一個重要組成部分。介導細胞與細胞外基質（ECM）、細胞與細胞之間及細胞與內皮細胞之間的粘附反應。腫瘤細胞與ECM發生粘附和附著是腫瘤侵襲轉移的第一步，粘附作用涉及到細胞之間的粘附，細胞和基底膜的粘附等。整合素表達變化與卵巢癌的發生和發展有關。與正常卵巢細胞和良性卵巢腫瘤細胞相比，卵巢癌細胞系中整合素α3、α6、αv和β1的表達顯著增高[3]。整合素αvβ6在正常卵巢組織和良性卵巢腫瘤中不表達，在交界性、低度和高度惡性的卵巢腫瘤中的表達逐步增加[4，5]。本實驗研究結果表明，整合素αv在卵巢上皮性癌組織的表達與卵巢良性腫瘤組織相比，呈顯著高表達，差異有統計學意義（P < 0.01）。且整合素αv的表達在卵巢上皮性癌晚期（Ⅲ～Ⅳ期）組與卵巢上皮性癌早期（Ⅰ～Ⅱ期）組間差異有統計學意義（P < 0.05）。其在卵巢上皮性癌組織中低分化組與高分化組間差異有統計學意義（P < 0.05）。

本實驗對整合素αv與VEGF在卵巢上皮性癌組織中的表達進行相關分析，結果發現整合素αv與VEGF的表達在卵巢上皮性癌組織中呈正相關。對整合素αv與MMP-2的表達進行相關分析后發現，整合素αv與MMP-2的表達在卵巢上皮性癌組織中亦呈正相關。提示整合素αv在卵巢上皮性癌浸潤轉移過程中起到一定的作用。

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（收稿日期：2012-07-16）