高效液相色譜法測定蔬菜中鄰苯二甲酸二丁酯殘留

王少杰 孟雨吟 李秋順 孫士青 許強 孟令玗

摘要：用高效液相色譜法測定了蔬菜中的鄰苯二甲酸二丁酯殘留含量。實驗色譜條件為色譜柱：ZOR-BAX SB-C18 4.6mm×150mm，5μm；溫度：室溫(25℃)；檢測器：紫外檢測器；檢測波長：224nm；進樣量：10μl；流速：1.0ml/min。檢測方法在2～50μg/ml呈線性，最低檢出限(3/n)0.025μg/ml，相關系數0.9991。蔬菜中鄰苯二甲酸二丁酯含量0.45～7.70mg/kg。實驗表明鄰苯二甲酸二丁酯在所檢測的蔬菜中均有殘留，可能與種植土壤污染有關。

關鍵詞：蔬菜；塑化劑；高效液相色譜；鄰苯二甲酸酯

中圖分類號：0657.7⁺2；X503.231文獻標識號：A文章編號：1001-4942(2012)01-0112-03

鄰苯二甲酸酯(PAEs)又稱酞酸酯、塑化劑，一般為無色透明的油狀黏稠液體，難溶于水，不易揮發，凝固點低，易溶于甲醇、乙醇、乙醚等有機溶劑，是大約30種化合物的總稱。鄰苯二甲酸酯類物質中有6種被美國環境保護署(EPA)列入“優先監測污染物名單”，分別是鄰苯二甲酸二甲酯(DMP)、鄰苯二甲酸二乙酯(DEP)、鄰苯二甲酸二丁酯(DBP)、鄰苯二甲酸二辛酯(DOP)、鄰苯二甲酸丁基芐基酯(BBP)和鄰苯二甲酸(2-乙基己基)酯(DEHP)。我國將鄰苯二甲酸酯類中的DMP、DBP和DOP列入優先控制污染物黑名單。這類物質具有類雌激素作用，影響生物體內激素的正常分泌，可產生致畸、致癌、致突變作用。近來暴發的食品塑化劑事件，使人們對其危害性更加重視。本研究利用高效液相色譜法(HPLC)對幾種蔬菜中DBP含量進行測定，從而了解DBP在蔬菜中的殘留情況。

1.材料與方法

1.1儀器、試劑與材料

Agilent 1100高效液相色譜儀(配備在線真空脫氣機、四元泵、手動進樣器、20μl定量環、紫外檢測器)、研缽、水浴鍋、XW-80A細胞粉碎儀。

甲醇為色譜純，乙醚、鄰苯二甲酸二丁酯(DBP)均為分析純。

結球甘藍、茄子、黃瓜、油麥菜、大蔥、大蒜等蔬菜樣品購于本地超市。

1.2實驗方法

1.2.1前處理稱取剪碎的蔬菜樣品100.0g于研缽碾碎，加入200ml乙醚超聲處理20min，于蒸發皿中40℃蒸氣浴蒸發乙醚，蒸發皿冷卻后加入甲醇5ml提取DBP。將蒸發皿中的甲醇入10ml容量瓶中，再加入3ml甲醇于蒸發皿中，重復以上提取步驟，傾入10ml容量瓶中，并用甲醇定容至刻度，0.45μm有機濾膜過濾后，待測。

1.2.2色譜條件參考陳會明等(2004)的方法加以改良。

色譜柱：ZORBAX SB-C18 4.6mm/×150mm，5μm；溫度：室溫(約25％)；檢測器：紫外檢測器；檢測波長：224nm；進樣量：10μl；流速：1.0ml/min。梯度如表1所示。

2.結果與分析

2.1標準曲線與檢出限

將DBP用甲醇稀釋，分別制成1、5、10、30、50μg/ml系列濃度，按1.2.2色譜條件進行測定，并以濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，制得標準曲線(圖1)。相關系數達到0.99912，按三倍噪聲信號計算，最低檢測限0.025μg/ml。標準色譜圖見圖2。

2.2樣品測定

將前處理好的樣品進行測定，其色譜圖見圖3。所有蔬菜樣品中均有DBP檢出，檢測結果見表2。

2.3回收率及精密度實驗

采用空白標準加入法進行試驗。在200ml乙醚中加入一定濃度的DBP標準溶液，超聲處理20min，并按1.2.2色譜條件進行測定，重復10次，計算回收率及精密度。結果表明(表3)，該濃度下DBP溶液加標回收率相對標準偏差小于2％符合常量和痕量分析要求。

3.討論

鄰苯二甲酸酯類(PAEs)相對于其他塑化劑而言，毒性不是最大的，但卻是存在最為普遍的。目前人們已從成人的尿液、血液、羊水等體液中檢測出了鄰苯二甲酸酯類，甚至新生兒的尿液中也發現了它們的存在。近幾年來，除了對各種鄰苯二甲酸酯類化合物的毒性進行了更深入的研究外，鄰苯二甲酸單酯對動物和人體的短期快速作用和長期累積作用也引起了相當的關注。這些研究為進一步認識鄰苯二甲酸酯類對人類健康的影響，采取預防和保護措施提供了重要參考。

對珠江三角洲地區蔬菜基地毒性有機污染物含量和分布特征的調查結果表明，土壤中有機污染物含量均以PAEs含量最高，美國環保局優控的6種PAEs化合物總含量在3.00～45.67mg/kg，單個化合物以DEHP的含量最高，DBP的含量次之。污灌土壤中PAEs含量相對較高，如北京市工業污灌區土壤中DBP的含量高達59.8mg/kg，DEHP的含量高達16.8mg/kg，是對照土壤的幾倍，甚至幾十倍。濟南郊區塑料大棚菜地也有PAEs檢出。土壤中PAEs不僅影響土壤質量、植物的生長和品質，而且還在作物中具有一定的生物累積效應，其慢性毒性對人類的危害相當大，應高度重視。

參考文獻：

[1]石愛軍，李振聲，莊樹春，等.廢水中有機污染指標監測方法的選擇[J].中國環境監測，2002，18(2)：4-7.

[2]宋明，詹濱秋.海水中溶解有機碳的測定[J].海洋湖沼通報，1992，1：21-28.

[3]陳會明，王超，王星，等.高效液相色譜二極管陣列檢測器測定化妝品中的6種酞酸酯[J].分析測試學報，2004，23(4)：61-64.

[4]蔡全英，莫測輝，李云輝，等.廣州、深圳地區蔬菜生產基地土壤中鄰苯二甲酸酯(PAEs)研究[J].生態學報，2005，25(2)：283-288.

[5]趙振華，許征帆.北京市大氣飄塵和土壤樣品中鄰苯二甲酸酯的分離鑒定[J].環境化學，1982，6：461-466.

[6]孟平蕊，王西奎，徐廣通，等.濟南市土壤中酞酸酯的分布與分析[J].環境化學，1996，15(5)：427-432.

[7]高軍，陳伯清.酞酸酯污染土壤微生物效應與過氧化氫酶活性的變化特征[J].水土保持學報，2008，22(6)：166-169.

[8]蔡玉祺，湯國才，王珊齡，等.植物對酞酸酯的敏感性[J].農村生態環境，1994，10(1)：29-32.

[9]吳志輝，楊宇峰，聶湘平.酞酸酯對龍須菜的生態毒理研究[J].海洋科學，2006，30(6)：46-50.

[10]尹睿，林先貴，王曙光，等.土壤中DBP/DEHP污染對幾種蔬菜品質的影響[J].農業環境科學學報，2004，23(1)：1-5.

[11]曾巧云，莫測輝，蔡全英，等.不同基因型菜心-土壤系統中鄰苯二甲酸二(2-乙基已基)酯的分布特征研究[J].農業環境科學學報，2007，26(6)：56-58.