侯東軍,楊紅菊,于 雷,李 穎,王 海,姜艷彬
(中國動物疫病預(yù)防控制中心,北京 100125)
環(huán)介導(dǎo)恒溫擴增法鑒定牛羊肉中的攙雜肉
侯東軍,楊紅菊,于 雷,李 穎,王 海,姜艷彬*
(中國動物疫病預(yù)防控制中心,北京 100125)
建立了一個鑒定牛羊肉中攙雜雜動物肉的環(huán)介導(dǎo)恒溫擴增檢測方法。確定了一套可在牛羊肉中特異并靈敏地檢測出攙雜肉成分的引物對,以動物細(xì)胞色素b基因組為模板可在恒溫63℃恒溫特異性擴增出豬等基因片段而無其他擴增片段影響。可檢測牛肉中0.01%~2%的豬肉成分。經(jīng)與PCR方法比對,結(jié)果表明,該方法可有效用于實際生鮮肉或加工肉制品樣本的鑒定。
環(huán)介導(dǎo)恒溫擴增,真實性,鑒定
在國內(nèi)及國際貿(mào)易中牛、羊肉中攙雜價格便宜的豬肉,以次充好的欺騙行為屢見不鮮,在清真肉品種摻豬肉以代替牛羊肉更是嚴(yán)重冒犯了廣大具有伊斯蘭教信仰的消費者,影響民族團結(jié),這些摻假行為極大損害了消費者的利益。20世紀(jì)80年代,國外開始對肉的種屬鑒定進行研究,采用的方法主要有DNA雜交、免疫擴散和等電點聚焦等。這些方法大都存在著成本高,工作量大,檢測對象要求高等缺點[1-2]。目前,針對摻假行為的檢測研究主要基于核酸擴增的PCR方法,檢測速度快,靈敏和特異性強,但需要PCR儀才能擴增,這就限制了該技術(shù)在條件有限的實驗室的應(yīng)用和推廣[3-4]。環(huán)介導(dǎo)恒溫擴增技術(shù)是一種相對于PCR技術(shù)較新的核酸擴增技術(shù),特異性、靈敏度都較高,同時可進行恒溫擴增反應(yīng),對設(shè)備要求低,有時僅用恒溫水浴鍋就可以完成檢測。……