蘆筍提取物的抗氧化作用的研究

馬朝陽(yáng)，馬淑鳳，*，王 芳，代 卉，王周平，黃云祥

（1.江南大學(xué)食品科學(xué)與技術(shù)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江蘇無(wú)錫 214122；

2.江南大學(xué)食品學(xué)院，江蘇無(wú)錫 214122；

3.河北省蘆筍工程技術(shù)研究中心，河北秦皇島 066000）

蘆筍提取物的抗氧化作用的研究

馬朝陽(yáng)1，2，馬淑鳳1，2，*，王 芳2，代 卉2，王周平1，2，黃云祥3

（1.江南大學(xué)食品科學(xué)與技術(shù)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江蘇無(wú)錫 214122；

2.江南大學(xué)食品學(xué)院，江蘇無(wú)錫 214122；

3.河北省蘆筍工程技術(shù)研究中心，河北秦皇島 066000）

目的：研究蘆筍提取物對(duì)氧化應(yīng)激小鼠抗氧化功能的影響。方法：以D-半乳糖衰老模型小鼠為研究對(duì)象，每天經(jīng)口灌胃蘆筍提取物和陽(yáng)性對(duì)照藥（VC），連續(xù)給予受試物30d后，測(cè)定其脂質(zhì)過氧化水平和抗氧化酶活力。結(jié)果：蘆筍提取物可以提高氧化應(yīng)激小鼠血漿和肝臟中GSH、SOD、GSH-PX、T-AOC活性（p＜0.05），顯著降低其血漿和肝臟中MDA的含量（p＜0.05）。結(jié)論：蘆筍提取物有助于增強(qiáng)氧化應(yīng)激小鼠的抗氧化能力。

蘆筍提取物，抗氧化，氧化應(yīng)激模型，小鼠

蘆筍（Asparagus officinalis L.）又名石刁柏、龍須菜，被世界衛(wèi)生組織列為世界十大最具有營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的蔬菜之首，是國(guó)際上公認(rèn)的防癌保健蔬菜[1]。蘆筍具有低糖、低脂肪和高纖維的營(yíng)養(yǎng)特點(diǎn)，是世界流行的大眾蔬菜，其嫩莖食用，種子用作咖啡的替代品[2]?，F(xiàn)代科學(xué)研究證明：蘆筍中含有大量的甾體皂苷、多糖、黃酮和酚類化合物、類胡蘿卜素、膳食纖維、多種維生素和游離氨基酸、葉酸和核酸，具有抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、抗衰老抗疲勞、降血脂、保肝解毒等特殊的功效[3-4]。機(jī)體的抗氧化系統(tǒng)與健康密切相關(guān)，少量的氧自由基不但對(duì)人體構(gòu)不成威脅，而且還可以幫助傳遞維持生命力的能量、增強(qiáng)免疫力、消除炎癥、抑制腫瘤等[5]。但過多的自由基會(huì)對(duì)生物大分子產(chǎn)生超氧化反應(yīng)，從而導(dǎo)致細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的改變，是引起許多疾病發(fā)生的重要原因[6]。氧化應(yīng)激可由多種原因造成，D-半乳糖供給過量，超常產(chǎn)生活性氧，打破了受控于遺傳模式的活性氧產(chǎn)生與消除的平衡狀態(tài)[7]，是引起過氧化效應(yīng)的一種原因。為了提高機(jī)體的抗氧化水平，可以選擇添加抗氧化劑的方法，因此無(wú)毒副作用的天然抗氧化劑引起了生產(chǎn)者的廣泛關(guān)注[8-12]。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 70只健康昆明種小鼠，體重（20±2）g，單一雄性，上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限責(zé)任公司，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)SCXK（滬）2007-0005，動(dòng)物合格證號(hào)為：2007000517939號(hào)，實(shí)驗(yàn)條件保持溫度為20～25℃，相對(duì)濕度為40%～70%，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證普通環(huán)境許可證號(hào)：SYXK（蘇）2012-0001；蘆筍醇提取物 秦皇島長(zhǎng)勝農(nóng)業(yè)科技發(fā)展有限公司；VC、D-半乳糖 國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；MDA試劑盒、SOD試劑盒、T-AOC試劑盒、GSH試劑盒、GSH-PX試劑盒、血紅蛋白試劑盒、考馬斯亮藍(lán)試劑盒 均購(gòu)自南京建成生物工程研究所。

MK 3酶標(biāo)儀 上海雷勃分析儀器廠；超低溫冰箱 SANYO公司；DS-260全自動(dòng)生化分析儀 南京神州應(yīng)諾華有限公司；UV2800紫外可見分光光度計(jì)尤尼柯上海儀器有限公司。

1.2 動(dòng)物分組與處理

實(shí)驗(yàn)小鼠設(shè)7組：一個(gè)空白對(duì)照組、一個(gè)D-半乳糖模型對(duì)照組、四個(gè)蘆筍提取物劑量組、一個(gè)VC陽(yáng)性對(duì)照組（35mg/kg·bw）。蘆筍提取物四個(gè)劑量組分別設(shè)置為：蘆筍提取物處理組Ⅰ：7mg/kg·bw，蘆筍提取物處理組Ⅱ：35mg/kg·bw，蘆筍提取物處理組Ⅲ：105mg/kg·bw，蘆筍提取物處理組Ⅳ：175mg/kg·bw。受試物經(jīng)口給予小鼠，連續(xù)灌胃30d。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

70只18～22g健康成年小鼠，選60只用D-半乳糖250mg/kg·bw腹腔注射造模，注射量為0.1m L/10g·bw，每日1次，連續(xù)造模6周，取血測(cè)MDA，按MDA水平隨機(jī)分為1個(gè)模型對(duì)照組和4個(gè)受試樣品劑量組、一個(gè)VC陽(yáng)性對(duì)照組。4個(gè)劑量組經(jīng)口給予不同濃度受試蘆筍提取物，模型對(duì)照組和空白對(duì)照組給予同體積生理鹽水。在給受試樣品的同時(shí)，除空白對(duì)照組外，各組繼續(xù)給予相同劑量D-半乳糖腹腔注射，空白對(duì)照組腹腔注射生理鹽水，實(shí)驗(yàn)結(jié)束處死動(dòng)物測(cè)其脂質(zhì)過氧化物含量和抗氧化酶活力。

1.4 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析和多重比較，顯著水平為p＜0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 蘆筍提取物對(duì)小鼠全血、血漿、肝臟中MDA的影響

從表1可以看出，造模后的各劑量組、VC陽(yáng)性對(duì)照組及模型對(duì)照組的血液中MDA水平大都顯著高于空白對(duì)照組的MDA水平，表明在實(shí)驗(yàn)期間內(nèi)，連續(xù)注射D-半乳糖，造成小鼠氧化損傷，造模成功。經(jīng)口給予小鼠不同劑量的蘆筍提取物和陽(yáng)性對(duì)照藥物后，各劑量組血漿中MDA水平均低于模型對(duì)照組，35、105mg/kg劑量組與模型對(duì)照組比較差異顯著（p＜0.05）；各劑量組的肝臟組織中MDA水平均顯著低于模型對(duì)照組的MDA水平（p＜0.05）。表明受試物蘆筍醇提取具有降低血漿和肝臟中MDA水平的作用。

2.2 蘆筍提取物對(duì)小鼠血漿、肝臟中GSH的影響

從表2可以看出，給予小鼠不同劑量的蘆筍提取物和陽(yáng)性對(duì)照藥物后，各劑量組血漿中GSH水平均高于模型對(duì)照組，其中7、35mg/kg劑量組與模型對(duì)照組差異顯著（p＜0.05），表明受試物蘆筍醇提取具有升高血漿中GSH水平的作用。各劑量組的肝臟組織中GSH水平均顯著（p＜0.05）高于模型對(duì)照組及空白組的GSH水平，表明蘆筍提取物具有顯著（p＜0.05）升高肝臟中GSH水平的作用。

2.3 蘆筍提取物對(duì)小鼠血漿、肝臟中SOD的影響

從表3可以看出，給予小鼠不同劑量的蘆筍提取物和陽(yáng)性對(duì)照藥物后，7、35、175mg/kg劑量組與模型對(duì)照組比較SOD水平顯著升高（p＜0.05）。同時(shí)，各劑量組的肝臟中SOD水平均高于模型對(duì)照組的SOD水平，其中7、105mg/kg劑量組差異顯著（p＜0.05），表明受試物蘆筍提取物具有提高氧化損傷小鼠血漿和肝臟中SOD水平的作用。

2.4 蘆筍提取物對(duì)小鼠血漿、肝臟中GSH-PX的影響

從表4可以看出，給予小鼠不同劑量的蘆筍醇提取物和陽(yáng)性對(duì)照藥物后，各劑量組的血漿中GSH-PX活力水平均顯著（p＜0.05）高于模型對(duì)照組的GSHPX活力水平（p＜0.05）；各劑量組的肝臟中GSH-PX水平均高于模型對(duì)照組的GSH-PX水平，其中105、175mg/kg劑量組與模型對(duì)照組相比顯著提高（p＜0.05）。表明受試物蘆筍提取物具有提高血漿和肝臟中GSH-PX水平的作用。

表1 蘆筍提取物對(duì)小鼠全血、血漿和肝臟的影響（X±SE，n=10）Table 1 Effectof Asparagus extracts on the MDA contentofwhole blood，plasma and liver（X±SE，n=10）

表2 蘆筍提取物對(duì)小鼠血漿和肝臟GSH的影響（X±SE，n=10）Table 2 Effectof Asparagus extracts on the GSH contentof plasma and liver（X±SE，n=10）

表3 蘆筍提取物對(duì)小鼠血漿和肝臟SOD的影響（X±SE，n=10）Table 3 The effectof Asparagus extracts on the SOD content of plasma and liver（X±SE，n=10）

表4 蘆筍提取物對(duì)小鼠血漿和肝臟GSH-PX的影響（X±SE，n=10）Table 4 The effectof Asparagus extracts on the GSH-PX contentof plasma and liver（X±SE，n=10）

表5 蘆筍提取物對(duì)小鼠血漿和肝臟T-AOC的影響（X±SE，n=10）Table 5 The effectof Asparagus extracts on the T-AOC contentof plasma and liver（X±SE，n=10）

2.5 蘆筍提取物對(duì)小鼠血漿、肝臟中T-AOC的影響

從表5可以看出，給予小鼠不同劑量的蘆筍后，提取物與模型對(duì)照組相比：血漿中，各劑量組的TAOC水平均升高，其中35、105、175mg/kg劑量組差異顯著（p＜0.05）。肝臟中，各劑量組的T-AOC水平均高于模型對(duì)照組的T-AOC水平，其中105、175mg/kg劑量組差異顯著（p＜0.05）。表明受試物蘆筍提取物具有提高血漿和肝臟中T-AOC水平的作用。

3 結(jié)論與討論

MDA是細(xì)胞膜脂質(zhì)過氧化物的終產(chǎn)物，且本身也可交聯(lián)蛋白質(zhì)、磷脂上的氨基，使細(xì)胞脆性增加、變形性降低，從而導(dǎo)致細(xì)胞膜損傷[13]。因此測(cè)定MDA含量能反映出機(jī)體內(nèi)脂質(zhì)過氧化的程度，間接反映出細(xì)胞損傷的程度。GSH-PX、SOD、T-AOC、GSH是體內(nèi)重要的抗氧化酶，體內(nèi)GSH-PX、SOD、T-AOC、GSH活力大小間接反映了機(jī)體清除自由基的能力。MDA的測(cè)定常與SOD、GSH-PX等抗氧化酶活力的測(cè)定相互配合，可以更好的反映機(jī)體抗氧化水平。

在本實(shí)驗(yàn)中，連續(xù)腹腔注射D-半乳糖的小鼠，其血漿和肝臟中MDA含量均顯著升高，造成血漿和肝臟中的脂質(zhì)過氧化。給予蘆筍提取物后，血漿和肝臟中MDA含量不同程度的降低，105mg/kg劑量組肝臟中的MDA水平低于模型對(duì)照組。同時(shí)，各劑量組小鼠血漿和臟臟中GSH-PX、SOD、GSH、T-AOC水平均高于模型對(duì)照組。根據(jù)本實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定蘆筍提取物可以降低模型鼠的氧化損傷程度，起到抗氧化作用。不同的因素和途徑對(duì)機(jī)體氧化損傷的部位和程度不同，機(jī)體抵抗氧化損傷的機(jī)制也不同，因此對(duì)體內(nèi)不同部位、不同抗氧化酶活力大小的影響也不盡相同。本實(shí)驗(yàn)為后續(xù)蘆筍功能食品——速溶蘆筍粉的開發(fā)提供科學(xué)依據(jù)。

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Study on the antioxidation effect of Asparagus extracts

MA Chao-yang1，2，，M A Shu-feng1，2，*，WANG Fang2，DAIHui2，WANG Zhou-ping1，2，HUANG Yun-xiang3
（1.State Key Laboratory of Food Science and Technology，Jiangnan University，Wuxi214122，China；
2.School of Food Science and Technology，Jiangnan University，Wuxi214122，China；
3.Asparagus Engineering Research Centers of Hebei Province，HebeiNormal University，Qinhuangdao 066000，China）

Ob jec tive：To study the antioxidation functional effect of Asparagus extracts on oxidative stress model m ice.Methods：Experimentalaging m ice molded w ith D-gal，then the m ice were gavaged w ith d ifferent dosage of asparagus extracts and VCrespec tively everyday.30d later，the lip id peroxide level and the antioxidant enzymes vitality were conducted.Results：Asparagus extracts significantly increased GSH，SOD，GSH-PX and T-AOC activity levels（p＜0.05）in p lasma and liver，and significantly dec reased MDA content in p lasma and liver（p＜0.05）.Conc lusion：Asparagus extracts could im p rove the antioxidant capacity of oxidative stress modelm ice.

Asparagus extracts；antioxidant；oxidative stress model；m ice

TS255.1

A

1002-0306（2012）22-0365-04

2012－08－21 *通訊聯(lián)系人

馬朝陽(yáng)（1970-），男，博士，講師，主要從事食品功能因子的分離提取及其構(gòu)效關(guān)系研究。

中央高?；究蒲袠I(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)資金資助項(xiàng)目（JUSRP111A35，JUSRP21115）； 科 技 部 農(nóng) 業(yè) 成 果 轉(zhuǎn) 化 資 金 項(xiàng) 目（2010GB2A200024）；秦皇島市科學(xué)技術(shù)與發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目（20121107001）；江蘇高校優(yōu)勢(shì)學(xué)科建設(shè)工程資助項(xiàng)目。