高產木聚糖酶嗜熱子囊菌固體發酵條件與酶學性質

龐宗文，郭法謀，徐 勇，梁靜娟，彭 幸，陸 薇

（廣西大學生命科學與技術學院，廣西南寧 530005）

高產木聚糖酶嗜熱子囊菌固體發酵條件與酶學性質

龐宗文，郭法謀，徐 勇，梁靜娟，彭 幸，陸 薇

（廣西大學生命科學與技術學院，廣西南寧 530005）

以本實驗室從土壤中分離篩選到的一株高產木聚糖酶的嗜熱子囊菌QS7-2-4為生產菌種，進行固體發酵產木聚糖酶的發酵條件研究，結果表明最佳產酶條件為：玉米芯∶麩皮為7∶3（w/w）；最佳氮源為酵母膏和胰蛋白胨的混合氮源，添加量為1.5%；吐溫-80添加量為0.5%，初始pH為7.2，培養基含水量為80%，250mL三角瓶裝料量為8g，發酵溫度50℃，發酵時間72h，該條件下木聚糖酶產量達27952U/g干基。該酶最適反應溫度為75℃，最適反應pH為4.5，在70℃以下具有良好的穩定性，在室溫下儲藏150d仍然保留87%的活性。

木聚糖酶，固體發酵，嗜熱子囊菌

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

嗜熱子囊菌（Thermoascus aurantiacus）QS7-2-4從廣西各地采集的土樣中分離篩選并鑒定，保藏在本實驗室；玉米芯、甘蔗渣、玉米秸稈、稻草 取自農田，經干燥粉碎后過40目篩備用；麩皮 購自農貿市場；樺木木聚糖和木糖 Sigma公司，純度大于99%；其他試劑 均為國產分析純；PDA平板培養基 去皮馬鈴薯200g，葡萄糖20g，水1000mL，pH自然；固體發酵培養基 稱取8g碳源于250mL三角瓶中，加入32mL營養鹽溶液，pH自然，121℃滅菌30min；營養鹽溶液（g/L） K2HPO42.4，（NH4）2SO41.5，KH2PO41.0，CaCl20.3，MgSO40.3，尿素0.7，酵母浸膏4.8，吐溫-80 1.7，微量元素液1.0mL，蒸餾水充分溶解，現配現用；微量元素液（g/L） ZnSO41.4，MnSO41.6，CoCl22.0，FeSO42.5，用蒸餾水充分溶解。

1.2 實驗方法

1.2.1 固體發酵和粗酶液的制備 將保藏的菌種接種到PDA平板上，50℃培養96h進行活化。挑取3環菌絲接種到固體發酵培養基中，混勻后置50℃培養96h。……