響應面優化蝦頭殼酶促水解清除DPPH自由基活性的研究

趙 靜，黃光榮，蔣家新

（中國計量學院生命科學學院，浙江杭州310018）

響應面優化蝦頭殼酶促水解清除DPPH自由基活性的研究

趙 靜，黃光榮*，蔣家新

（中國計量學院生命科學學院，浙江杭州310018）

以堿性蛋白酶水解蝦頭殼蛋白質，在影響水解條件單因素研究基礎上，采用響應面方法中心組合設計，建立以DPPH自由基清除率為指標的水解模型，優化得出最佳酶解條件，并測定水解液中多肽的相對分子質量分布。結果表明，最佳酶解條件為pH7.2、溫度50.5℃、加酶量415U/g、時間120min。在此條件下水解，水解度達21.8%，DPPH自由基清除率為66.9%，平均肽段長度為4.6，酶解液中大部分肽的相對分子量低于6500u。

蝦頭，堿性蛋白酶，響應面分析，DPPH自由基清除率，水解度

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

蝦頭殼 購于浙江溫州水產品市場，樣品經曬干后100℃烘干再機械粉碎后過100目篩，4℃密閉下保存備用；堿性蛋白酶（2×105U/g） 上海楷洋生物技術有限公司；DPPH（二苯代苦味肼基自由基） 上海百靈威化學技術有限公司；分子量標準品維生素B12（Mr1335） 上海伯奧生物科技有限公司；抑肽酶（Mr6500）、細胞色素C（Mr14400，純度97%） 美國Sigma公司；牛血清白蛋白（Mr66700） 華美生物工程公司；其余化學試劑 均為分析純。

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