宮國君,朱蓓薇,楊靜峰,米云龍
(大連工業大學食品學院,遼寧大連116034)
皺紋盤鮑內臟β-1,3-葡聚糖酶的提取及其酶學性質研究
宮國君,朱蓓薇,楊靜峰*,米云龍
(大連工業大學食品學院,遼寧大連116034)
從鮑魚內臟提取β-1,3-葡聚糖酶粗酶并研究其酶學性質。以昆布多糖為底物監控酶的活性。鮑魚內臟經勻漿后,采用3倍體積0.1mol/L的磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液(pH6.0)浸提12h。浸提液經離心后收集上清液,并采用60%飽和度的硫酸銨對上清液中的蛋白進行鹽析沉淀得β-1,3-葡聚糖酶粗酶。研究表明,粗酶中β-1,3-葡聚糖酶的最適反應溫度為40℃,酶活力在40℃以下穩定;酶的最適pH為6.0,酶活力在pH4.0~7.0范圍內穩定。Mn2+能明顯激活酶活力,而Cu2+、Fe3+、Hg+對酶活力有抑制作用,其中Fe3+的抑制作用最強;亮肽酶素和1,10-菲啰啉對酶活力有明顯的抑制作用,而E-64對酶活力有一定的激活作用;此酶對海藻酸鈉也有一定水解能力。
鮑魚,β-1,3-葡聚糖酶,酶學性質
β-1,3-葡聚糖酶(EC3.2.1.39)是一類能夠特異性水解β-1,3糖苷鍵的水解酶。可用于飼料及啤酒工業[1-2]、增加多糖溶解性[3]、制備酵母原生質體[4]、植物病害防治等方面[5]。該酶廣泛存在于微生物,如真菌[6]、細菌[7]、放線菌[8]等,植物如小麥[9]、青稞[10]、天麻[11]等和動物中。海洋中β-1,3-葡聚糖酶主要分布于海洋無脊椎動物。趙軍崗等已從海參腸道中提取分離出此酶[12],BACHMAN E S等對海參(Strongylocentrotus purpuratus)卵中的β-1,3-葡聚糖酶分子量等性質進行了研究[13]。另外Svetlana N等從扇貝(Mizuhopecten yessoensi)分離純化出β-1,3-葡聚糖酶并研究了該酶基因的克隆與表達[14]。同樣是海洋動物的鮑魚是一種海洋單殼軟體貝類,具有很高的經濟價值和營養藥用價值[15]。……