榆黃蘑飲料對小鼠實驗性高脂血癥的降脂作用

鄭超楠，金在久，施溯筠

（延邊大學(xué)，長白山生物資源與功能分子教育部重點實驗室，吉林延吉133000）

榆黃蘑飲料對小鼠實驗性高脂血癥的降脂作用

鄭超楠，金在久，施溯筠*

（延邊大學(xué)，長白山生物資源與功能分子教育部重點實驗室，吉林延吉133000）

探討不同濃度的榆黃蘑飲料的降脂作用（165、330、660g·L-1，0.1mL·10g-1BW-1）。結(jié)果顯示榆黃蘑飲料能夠降低蛋黃乳液所致小鼠單純性高膽固醇癥中血清中TC含量（P＜0.01），榆黃蘑飲料能夠下調(diào)高脂飼料所致小鼠血清TC、TG和LDL-C的含量的升高（P＜0.05或0.01），并增加其血清中HDL-C的含量（P＜0.05或0.01），增加小鼠食糜性高脂血癥中血清 SOD的活性（P＜0.05），并降低MDA的含量（P＜0.05或0.01）。結(jié)果表明榆黃蘑飲料對小鼠實驗性高脂血癥有較好的防治作用，推測榆黃蘑飲料的降脂作用是部分地通過抗氧化途徑起作用的。

榆黃蘑飲料，高血脂癥，小鼠，降脂，抗氧化

榆黃蘑（Pleurotus citrinopileatus）又稱榆黃菇、玉皇蘑、金頂側(cè)耳等，屬于擔(dān)子菌亞門，層菌綱，傘菌目，側(cè)耳科，側(cè)耳屬[1]。榆黃蘑為一種美味食用菌和藥用菌，并含有豐富的蛋白質(zhì)（42%）、氨基酸和維生素等多種營養(yǎng)成分，具有滋補健身、化痰定喘、平肝健胃和抗氧化、抗疲勞、抗腫瘤作用[2-3]。高脂血癥是導(dǎo)致動脈粥樣硬化的重要因素，血脂異常所引起的動脈粥樣硬化是造成冠心病、高血壓和腦血管疾病的主要原因，其中膽固醇（TC）增加1%，可使冠心病危險增加約3%，全球每年約有1200萬人死于心血管病和腦中風(fēng)[4]，從中藥中尋找高效、安全的降脂新藥和保健食品成為研究的新熱點。本實驗用榆黃蘑的新鮮子實體制成不同濃度榆黃蘑飲料，研究其對蛋黃乳液腹腔注射所致小鼠單純性高膽固醇癥和高脂飼料所致小鼠食糜性高脂血癥的影響，探討其防治脂質(zhì)代謝紊亂的作用及機制。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

昆明種小鼠 體重18～22g，延邊大學(xué)實驗動物科提供，生產(chǎn)許可證號：SCXK（吉）2007-0003，榆黃蘑購自延吉農(nóng)貿(mào)市場。

HH-501超級恒溫水浴鍋 江蘇金壇市恒豐儀器廠；U-1900型紫外分光光度計 上海精密科學(xué)儀器有限公司K；A-1000低速臺式離心機 上海安亭科學(xué)儀器廠；DY-Ⅱ型電動玻璃勻漿機 寧波新芝生物科技股份有限公司；膽固醇（TC）檢測試劑盒、甘油三酯（TG）檢測試劑盒（批號：20091010）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）檢測試劑盒（批號：20090311） 中生北控生物科技股份有限公司；普通飼料和高脂飼料（1%膽固醇、0.2%膽鹽、5%豬油和93.8%基礎(chǔ)飼料配制而成） 均由延邊大學(xué)實驗動物中心提供；75%蛋黃乳液 由新鮮雞蛋去蛋清，用消毒生理鹽水配制而成。

1.2 實驗方法

1.2.1 榆黃蘑飲料的制備 榆黃蘑新鮮子實體于室溫在蒸餾水中浸提30min后，脫脂棉過濾，加調(diào)味劑和穩(wěn)定劑（pH3.6～3.8），均質(zhì)，采用巴氏分段滅菌后制得660g·L-1榆黃蘑飲料，使用時用蒸餾水稀釋成330、165g·L-1濃度的榆黃蘑飲料[5]。

1.2.2 對蛋黃乳液致小鼠單純性高膽固醇癥模型的影響 選用18～20g昆明種小鼠60只，雌雄各半，每組10只。小鼠隨機分為正常對照組（灌胃蒸餾水）；模型組（灌胃蒸餾水）；非諾貝特組（灌胃非諾貝特0.15g/kg，第23d開始給藥，給藥7d）和榆黃蘑飲料低、中、高劑量組（1.65、3.3、6.6g·L-1，0.1mL·10g-1BW-1）[6]，連續(xù)給藥30d。第30d給藥后2h，除正常對照組外，其余組腹腔注射75%的蛋黃乳液0.5mL[5]，禁食過夜，自由飲水，10h后，各組再給相應(yīng)藥物1次，于末次給藥2h后，眼眶取血，分離血清，采用試劑盒檢測TC、TG含量。

1.2.3 對高脂飲食致小鼠高脂血模型的影響 選用18～20g昆明種小鼠60只，雌雄各半，分組和給藥劑量同1.2.2，連續(xù)給藥30d。分組后除正常對照組喂普通飼料外，其余各組均喂高脂飼料。第30d，于末次給藥2h后，眼眶取血，分離血清，采用試劑盒檢測血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C的含量，SOD活性采用羥胺法檢測[7]，MDA的含量采用硫代巴比妥酸法測定[8]。LDLC含量由Friedwald WT公式計算[9]，LDL-C=TC-（1/5TG+ HDL-C）。

1.2.4 統(tǒng)計學(xué)方法 數(shù)據(jù)采用SPSS10.0軟件處理，結(jié)果以（±s）表示，各實驗組分別與模型組和陽性對照組進行比較，采用t檢驗。

2 結(jié)果與分析

2.1 榆黃蘑飲料對蛋黃乳致小鼠單純性高膽固醇癥模型血脂含量的影響

由表1可見，模型組小鼠血清TC比空白組顯著升高（P＜0.01），表明蛋黃乳所致小鼠高脂血癥實驗?zāi)Ｐ统晒Α７侵Z貝特組小鼠血清TC的含量比模型組的均有顯著下降（P＜0.01）。榆黃蘑飲料各給藥組與高脂模型組相比，血清中TC含量明顯降低（P＜0.01），特別是榆黃蘑飲料高劑量組小鼠血清TC含量的下降同非諾貝特組比無顯著差異，說明榆黃蘑飲料對蛋黃乳所致小鼠單純性高膽固醇癥有較好的預(yù)防作用。

表1 榆黃蘑飲料對蛋黃乳致小鼠高血脂模型中TC含量的影響（±s，n=10）Table 1 Effect of Pleurotus citrinopileatus beverage on TC contents in serum of hyperlipidemia mice which induced by 75% egg yolk solution（±s，n=10）

表1 榆黃蘑飲料對蛋黃乳致小鼠高血脂模型中TC含量的影響（±s，n=10）Table 1 Effect of Pleurotus citrinopileatus beverage on TC contents in serum of hyperlipidemia mice which induced by 75% egg yolk solution（±s，n=10）

注：與模型組比較：**P＜0.01；與非諾貝特組比較：△P＜0.05；△△P＜0.01；表2、表3同。

組別 TC（mmol·L-1）空白對照組 2.31±0.27**△△高血脂模型組 6.01±0.38非諾貝特組 4.35±0.44**榆黃蘑低劑量組 5.05±0.49**△榆黃蘑中劑量組 4.88±0.14**△榆黃蘑高劑量組 4.54±0.31**

2.2 榆黃蘑飲料對高脂飲食致小鼠高血脂模型的影響

由表2可見，模型組小鼠血清TC、TG和LDL-C的含量同空白組相比均有顯著升高（P＜0.01），而HDLC含量則顯著下降（P＜0.01），表明高脂飼料所致小鼠高脂血癥實驗?zāi)Ｐ统晒Α７侵Z貝特組小鼠血清TC、TG和LDL-C的含量與模型組相比均顯著下降（P＜0.01），而HDL-C含量則顯著上升（P＜0.01）。榆黃蘑飲料各給藥組與高脂模型組相比，血清中TC、TG和LDL-C含量明顯降低（P＜0.05或0.01），而HDL-C含量則顯著升高（P＜0.05或0.01），特別是榆黃蘑飲料高劑量組小鼠血清TC和LDL-C的含量的下降及HDL-C含量的上升同非諾貝特組比無顯著差異，說明榆黃蘑飲料對高脂飲食致小鼠高脂血癥有較好的防治作用。

表2 榆黃蘑飲料對高脂飲食致小鼠高血脂模型中TC、TG、HDL-C和LDL-C含量的影響（±s，n=10）Table 2 Effect of Pleurotus citrinopileatus beverage on TC，TG，HDL-C and LDL-C contents in serum of hyperlipidemia mice which induced by high-fat diet（±s，n=10）

表2 榆黃蘑飲料對高脂飲食致小鼠高血脂模型中TC、TG、HDL-C和LDL-C含量的影響（±s，n=10）Table 2 Effect of Pleurotus citrinopileatus beverage on TC，TG，HDL-C and LDL-C contents in serum of hyperlipidemia mice which induced by high-fat diet（±s，n=10）

組別 TC（mmol·L-1） TG（mmol·L-1） HDL-C（mmol·L-1） LDL-C（mmol·L-1）空白對照組 2.35±0.24**△ 0.80±0.19** 1.70±0.36** 0.49±0.26**△高血脂模型組 4.93±0.39 1.72±0.17 0.84±0.25 3.75±0.27非諾貝特組 2.81±0.23** 0.93±0.27** 1.58±0.30** 1.04±0.47**榆黃蘑低劑量組 3.49±0.36**△ 1.48±0.29*△△ 1.14±0.11*△ 2.05±0.62**△榆黃蘑中劑量組 3.19±0.26**△ 1.26±0.21**△ 1.22±0.14**△ 1.72±0.38**△榆黃蘑高劑量組 3.05±0.13** 1.21±0.25**△ 1.54±0.17** 1.27±0.29**

表3 榆黃蘑飲料對高脂飲食致小鼠高血脂模型中SOD活性和MDA含量的影響（±s，n=10）Table 3 Effect of Pleurotus citrinopileatus beverage on SOD activity and MDA content in serum of hyperlipidemia mice which induced by high-fat diet（±s，n=10）

表3 榆黃蘑飲料對高脂飲食致小鼠高血脂模型中SOD活性和MDA含量的影響（±s，n=10）Table 3 Effect of Pleurotus citrinopileatus beverage on SOD activity and MDA content in serum of hyperlipidemia mice which induced by high-fat diet（±s，n=10）

組別 SOD（UI·mg prot-1）MDA（nmol·mg prot-1）空白對照組 30.96±5.29*△△ 5.11±0.92**高血脂模型組 34.89±6.65 8.27±2.42非諾貝特組 42.39±6.26* 5.09±2.07**榆黃蘑低劑量組 37.06±5.39△ 6.21±2.31*△榆黃蘑中劑量組 40.33±5.36* 5.95±1.75*榆黃蘑高劑量組 46.33±3.43* 5.05±1.98**

由表3可知，榆黃蘑中、高劑量組可以升高高脂血癥小鼠的血清中SOD含量（P＜0.05），榆黃蘑低、中劑量組可以降低高脂血癥小鼠的血清中MDA含量（P＜0.05），其高劑量組則顯著降低MDA含量（P＜0.01）。而榆黃蘑飲料的中、高劑量組升高高脂血癥小鼠的血清中SOD含量和降低MDA的含量同非諾貝特組比無顯著差異。

3 討論

高脂血癥是臨床上常見的脂質(zhì)代謝紊亂疾病，隨著人民生活水平的提高，高脂血癥發(fā)病率逐年上升，且有低齡化傾向。其主要表現(xiàn)為血清中TC、TG升高，或LDL-C的升高，HDL-C的降低。本實驗中，榆黃蘑飲料能夠降低蛋黃乳所致小鼠單純性高膽固醇癥中血清中TC含量（P＜0.01），說明榆黃蘑飲料對脂質(zhì)代謝紊亂有較好的預(yù)防作用。腹腔注射蛋黃乳形成的急性模型是動物攝入過多外源性TC而形成的血脂升高，但由于腹腔注射蛋黃乳的快速造型方式與人類因飲食造成的高脂血癥發(fā)病機制存在一定的差異，要闡明其作用機制還需要建立慢性高脂血癥模型來加以研究[10]。我們進一步研究了榆黃蘑飲料對高脂飼料所致小鼠食糜性高脂血癥的研究，實驗結(jié)果表明榆黃蘑飲料能夠下調(diào)高脂飼料所致小鼠血清TC、TG和LDL-C的含量的升高（P＜0.05或0.01），并增加其血清中HDL-C的含量（P＜0.05或0.01），說明榆黃蘑飲料對高脂飼料所致小鼠食糜性高脂血癥有較好的治療作用。

高脂血癥常伴有氧自由基活性增加，它增加血管內(nèi)皮細(xì)胞自由基的釋放，導(dǎo)致大量HDL-C等成分被氧化；另一方面，高脂血癥又直接損傷動脈壁的抗氧化機能，隨著體內(nèi)血脂升高和粥樣硬化斑塊的形成，使體內(nèi)自由基產(chǎn)生與清除失去平衡，生物膜發(fā)生脂質(zhì)過氧化，嚴(yán)重破壞內(nèi)皮細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能。因而抗氧化亦是輔助治療高脂血癥的一個重要途徑，經(jīng)典的調(diào)血脂藥物普羅布考即是一個抗氧化劑[10]，中藥中綠茶、女貞子、大黃的降脂作用都和其抗氧化性相關(guān)[11-13]。實驗中進一步檢測了小鼠血清中SOD的活性和MDA的含量，發(fā)現(xiàn)榆黃蘑飲料增加小鼠食糜性高脂血癥中血清SOD的活性（P＜0.05），并降低MDA的含量（P＜0.05或0.01）。MDA為自由基氧化細(xì)胞膜上不飽和脂肪酸形成的脂質(zhì)過氧化物的穩(wěn)定存在形式，可反映機體內(nèi)脂質(zhì)過氧化的程度。SOD是體內(nèi)清除氧自由基的主要酶，是體內(nèi)抗氧化酶體系的重要組成部分。因此，MDA與SOD可反映機體的氧化與抗氧化功能狀態(tài)。在前期的研究中發(fā)現(xiàn)，榆黃蘑及其飲料都具有較好的抗氧化性[5-6]，推測榆黃蘑飲料的降脂作用是部分地通過抗氧化途徑來減少機體組織遭受脂質(zhì)過氧化的損傷。

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Lowing-lipid effect of Pleurotus citrinopileatus beverage on hyperlipoidemia in mice

ZHENG Chao-nan，JIN Zai-jiu，SHI Su-yun*
（Key Laboratory for Natural Resource of Changbai Mountainamp;Functional Molecules，Ministry of Education，Yanbian University，Yanji 133000，China）

To investigate the lowing-lipid of Pleurotus citrinopileatus beverage on hyperlipoidemia mice.The result showed that Pleurotus citrinopileatus beverage could reduce the content of TC in serum of acute hyperlipidemia mice which induced by 75%egg yolk solution（P＜0.01）.Pleurotus citrinopileatus could decrease the content of TC，TG and LDL-C in the serum that increased by fed with high fat diet（P＜0.05 or 0.01），and increase the content of HDL-C（P＜0.05 or 0.01）.It also increased the SOD activity and decreased the MDA content in the serum on hyperlipidemia mice by high fat diet（P＜0.05 or 0.01）.Results suggested that Pleurotus citrinopileatus beverages had preventive and therapeutic effects on hyperlipidemia mice that was partly through antioxidant pathway.

Pleurotus citrinopileatus beverage；hyperlipidemia；mice；lowing-lipid；antioxidant

TS201.4

A

1002-0306（2012）05-0369-03

2011－04－22 *通訊聯(lián)系人

鄭超楠（1987-），女，碩士，研究方向：藥物新劑型與新技術(shù)。

延邊大學(xué)“211”工程三期建設(shè)項目（YB211-0302）。