重金屬鉛酶聯(lián)免疫檢測(cè)方法的研究

楊依錦 王俊平 王 津 方淑兵 王 碩

（1.食品營(yíng)養(yǎng)與安全教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津 300457；2.天津科技大學(xué)，天津 300457）

重金屬鉛酶聯(lián)免疫檢測(cè)方法的研究

楊依錦1，2王俊平1，2王 津1，2方淑兵1，2王 碩1，2

（1.食品營(yíng)養(yǎng)與安全教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津 300457；2.天津科技大學(xué)，天津 300457）

制備鉛離子多克隆抗體，并建立間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA檢測(cè)方法。利用雙功能螯合劑ITCBE將Pb2＋與載體蛋白KLH和BSA偶聯(lián)在一起，制備免疫抗原與檢測(cè)抗原；通過免疫新西蘭大耳白免成功制備鉛多克隆抗體，建立間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA檢測(cè)方法，并與ICP－MS檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比較。標(biāo)準(zhǔn)曲線IC50為3.48ng／mL，IC15為0.32ng／mL，與ICP－MS法檢測(cè)結(jié)果的總符合率超過97%。

鉛；多克隆抗體；間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA

重金屬是一種常見的污染源，其中鉛的污染又尤為嚴(yán)重，對(duì)環(huán)境與人類造成了嚴(yán)重的危害。鉛的毒性很強(qiáng)，是重金屬污染中的“五毒”之一。它對(duì)人體的毒性作用包括神經(jīng)毒性、腎臟毒性、造血系統(tǒng)毒性、心血管系統(tǒng)毒性、生殖系統(tǒng)毒性、關(guān)節(jié)毒性、內(nèi)分泌系統(tǒng)毒性以及胃腸道和肝臟的毒性等，還會(huì)對(duì)兒童的生長(zhǎng)發(fā)育產(chǎn)生影響［1－3］。

目前檢測(cè)鉛離子的主要方法有原子熒光光度法（AFS）、電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP－MS）分析技術(shù)、電感耦合等離子原子發(fā)射光譜（ICP－AES）、高效液相色譜法（HPLC）等［4－8］，這些檢測(cè)方法所需的儀器較昂貴，操作復(fù)雜，需要專業(yè)的工作人員。重金屬免疫學(xué)檢測(cè)方法是通過制備重金屬的特異性抗體，利用抗原－抗體反應(yīng)進(jìn)行的快速、準(zhǔn)確的檢測(cè)方法，與傳統(tǒng)檢測(cè)技術(shù)相比有著快速，簡(jiǎn)單，價(jià)格低廉，適合現(xiàn)場(chǎng)監(jiān)測(cè)等優(yōu)點(diǎn)。本試驗(yàn)擬建立重金屬鉛間接競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫檢測(cè)方法，同時(shí)將其用于實(shí)際樣品添加回收的試驗(yàn)。……