Survivin在多發(fā)性骨髓瘤中的表達及其與VEGF的相關性研究

張仙土　付承林　鄭煒智

[摘要] 目的 觀察Survivin在多發(fā)性骨髓瘤中的表達及其與VEGF的相關性。 方法 選擇2011年1月～2012年6月在我院就診的MM患者40例，所有患者均符合張之南主編的《血液病診斷和療效標準》（1998年）中提出的MM診斷標準及療效標準，采用免疫組化S-P法檢測多發(fā)性骨髓瘤患者Survivin、VEGF的表達以及二者間的相關性。 結(jié)果 Survivin在MM患者骨髓組織中的陽性率達72.5%（29/40），VEGF在MM患者骨髓組織中的陽性率達65.0%（26/40）。Survivin、VEGF在MM患者骨髓組織中的表達與治療情況及腫瘤分期關系密切，差異存在顯著性（P < 0.05）。Survivin與VEGF在MM患者骨髓組織中共同陽性表達例數(shù)為23例，共同陰性例數(shù)8例，MM患者骨髓組織中Survivin和VEGF表達呈正相關（r = 0.562，P < 0.05）。 結(jié)論 Survivin和VEGF均參與了MM的發(fā)生、發(fā)展過程，且與疾病的進展關系密切，Survivin和VEGF存在協(xié)同關系，值得臨床予以關注。

[關鍵詞] 多發(fā)性骨髓瘤；Survivin；VEGF；相關性

[中圖分類號] R733.3 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2013）09-0095-02

凋亡蛋白抑制因子（IAPs）具有抑制細胞凋亡的作用，研究證實，其表達與腫瘤發(fā)生關系密切[1]。生存素（Survivin）屬于IAPs家族中的一員，具有控制細胞分化及抑制凋亡的功能，是一種具有潛在價值的腫瘤標志物，也參與腫瘤的發(fā)生發(fā)展[2]。研究證實，在腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中，Survivin的表達與凋亡呈負相關，而與細胞增殖和血管發(fā)生呈正相關。多發(fā)性骨髓瘤（MM）是常見的血液腫瘤，其發(fā)生、發(fā)展和預后與骨髓新生血管形成密切相關。已經(jīng)證實血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）在此過程中扮演了關鍵角色[3]。目前關于Survivin在MM中的表達及與VEGF的關系的研究報道并不多，本研究應用免疫組織化學技術檢測30例MM患者的Survivin與VEGF的表達，并探討二者間的相關性，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2011年1月～2012年6月在我院就診的MM患者40例，符合張之南主編的《血液病診斷和療效標準》（1998年）中提出的診斷標準[4]，40例MM中男21例，女19例；年齡35～79歲，平均（56.2±1.4）歲； 病程1～8年，平均（3.1±0.5）年。其中初治 22例，復發(fā)/難治患者18例；其中Ⅱ期11例，Ⅲ期29例。IgG型19例，IgA 型12例，其他類型9例。所有患者初治時均給予長春地辛、表柔比星、地塞米松方案治療。

1.2 方法

鼠抗人Survivin單克隆抗體、鼠抗人VEGF單克隆抗體、S-P試劑盒購自北京中山生物公司。采用免疫組化S-P法。應用PBS替代一抗作陰性對照，已知陽性片作陽性對照。

1.3 結(jié)果判斷[4]

Survivin、VEGF位于細胞質(zhì)，陽性細胞出現(xiàn)明顯的棕黃色顆粒，每張骨髓片在高倍視野（×400）下觀察計數(shù)200個瘤細胞，以腫瘤陽性細胞>10%為陽性表達，≤10%為陰性表達。

1.4 統(tǒng)計學方法

3 討論

多發(fā)性骨髓瘤（MM）是惡性漿細胞病中最常見的一種類型，起病徐緩，臨床表現(xiàn)多樣， 嚴重危害成年人健康和生活質(zhì)量。研究證實，MM的發(fā)生發(fā)展與骨髓瘤細胞的異常增殖和微環(huán)境血管生成密切相關[5]。

VEGF在血管形成及腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮重要作用。它不僅促進血管新生，使骨髓瘤細胞增殖，骨髓內(nèi)新生血管增多又可增加VEGF的分泌，VEGF在MM中起自分泌和旁分泌作用，可直接刺激MM細胞的體外增殖和遷移。 骨髓瘤細胞可能通過分泌VEGF，與微血管內(nèi)皮細胞表面的VEGFR相作用，導致內(nèi)皮細胞增殖和趨化，刺激血管發(fā)生。MM的骨髓內(nèi)皮細胞（MMEC）可以通過自分泌方式促進增殖，誘導血管新生。VEGF能刺激骨髓瘤細胞株和患者的瘤細胞增殖，且呈劑量依賴性。VEGF不僅通過自分泌途徑誘導骨髓瘤細胞增殖，還可以通過旁分泌途徑誘導骨髓瘤細胞增殖，其中骨髓基質(zhì)細胞起關鍵作用[6-10]。

Survivin是凋亡抑制蛋白家族的一個成員，具有控制細胞分化及抑制凋亡的功能。 研究表明，Survivin的表達與多種腫瘤的預后相關。國內(nèi)的李娟等[11]比較了初治和難治/復發(fā)MM患者Survivin的陽性率表達差異無統(tǒng)計學意義，但難治/復發(fā)組Survivin的陽性率表達水平明顯高于初治組，說明Survivin在骨髓瘤患者中的高表達可能是部分患者對化療不敏感的原因之一。王曉毅等[12]采用實時熒光定量RT-PCR技術檢測MM 患者Survivin mRNA的表達，結(jié)果顯示初治組中Survivin mRNA的表達水平明顯高于正常對照組，復發(fā)組Survivin mRNA的表達水平明顯高于正常對照組，且較初治組亦高，因此，他們認為，Survivin可能通過某種途徑抑制多發(fā)性骨髓瘤細胞的凋亡，從而影響MM的治療效果。本研究中，結(jié)果顯示Survivin在MM患者骨髓組織中陽性率達72.5%（29/40），VEGF在MM患者骨髓組織中的陽性率達65.0%（26/40）。Survivin、VEGF在MM患者骨髓組織中的表達與治療情況及腫瘤分期關系密切，差異存在顯著性（P < 0.05）。與上述觀點基本一致。

近年來研究同時發(fā)現(xiàn)，Survivin與血管生成亦密切相關。VEGF的大部分抗凋亡特性是通過誘導內(nèi)皮上Survivin表達實現(xiàn)，反義抑制Survivin可消除VEGF的抗凋亡功能。VEGF在腫瘤血管生成過程中發(fā)揮的內(nèi)皮細胞抗凋亡作用依賴于Survivin的表達上調(diào)，在VEGF誘導的基因中，Survivin是重要的和關鍵的調(diào)節(jié)因子， VEGF誘導Survivin表達可能是內(nèi)皮細胞耐藥的先決條件[13-16]。 本組資料也證實，MM患者骨髓組織中Survivin和VEGF表達呈正相關（r = 0.562，P < 0.05），進一步證實Survivin和VEGF均參與了MM的發(fā)生、發(fā)展過程，且與疾病的進展關系密切。Survivin和VEGF存在協(xié)同關系，值得臨床予以關注。

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（收稿日期：2013-01-08）