雌激素受體與孕激素受體在葡萄胎組織中的表達及臨床意義

吳韓梅，蔣志堅，張 淼，李毅光，李 曉，肖寧新 (.廣東省江門市新會婦幼保健院病理科，廣東 江門 5900;.廣東省江門市新會中醫院病理科，廣東 江門 5900;.廣東省江門市新會人民醫院病理科，廣東 江門 5900;.廣東省江門市人民醫院病理科，廣東 江門 5900)

葡萄胎又稱水泡狀胎塊，是一種妊娠滋養細胞疾病。在世界范圍內的發生率為1∶(500～1000)次妊娠［1］，不同民族、不同地區的發生率各不相同。我院葡萄胎發生率為1:600。葡萄胎可分為完全性葡萄胎(完全性水泡狀胎塊complete hydatidiform，CHM)、部分性葡萄胎(部分性水泡狀胎塊partial hydatidiform，PHM)兩種。文獻報道繼發于兩者的滋養細胞腫瘤的危險度相差懸殊(分別為15%～20%和0.7%～4%)［2］。早期完全性葡萄胎由于缺乏典型病理特征常常漏診或誤診為流產水腫絨毛。因此，葡萄胎診斷和鑒別診斷對臨床治療和疾病預后有重要的意義。國內報道葡萄胎的蛋白表達多見于 P57、P16、Ki67［3－4］。近年來，越來越多的研究表明雌激素受體(estrogen receptor，ER)、孕激素受體(progesterone receptor，PR)的低水平表達與多種人類腫瘤的發生、發展、侵襲轉移密切相關，雌激素受體、孕激素受體在葡萄胎的表達情況報道較少。本研究采用免疫組織化學(SP)法，檢測ER、PR在葡萄胎組織中的表達情況，探討ER、PR在葡萄胎的診斷及鑒別診斷的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料:選擇2005年1月～2012年5月在本院住院診斷為完全性葡萄胎的患者35例，部分性葡萄胎28例，侵襲性葡萄胎9例，術前均未接受放療、化療。術后均有隨訪2年的完整資料，20例流產水腫絨毛。年齡14～39歲，孕周6～14周。同時收集20例人工流產終止妊娠者的絨毛組織(正常組);孕周6～9周，年齡16～42歲。術前無藥物接觸史，所有標本均經病理學檢查確診。

1.2 檢驗方法:取存檔蠟塊，連續切片4 μm，ER、PE的檢測采用免疫組化鏈霉素蛋白過氧化酶法(strepvavifin－peroxidase，sp)。陰性對照:以PBS代替第一抗體;陽性對照:用北京中杉金橋生物技術有限公司的ER、PR。所有試劑購自北京中杉金橋生物技術有限公司，染色步驟按說明書進行。

1.3 結果判斷:ER、PR定位于胞核和(或)胞質和(或)胞膜。隨機選取5個高倍視野，無陽性細胞者為(－)，陽性細胞數＜25%為弱陽性(+)，陽性細胞數25% －50%為陽性(++)，陽性細胞數＞50%為(+++)。

1.4 統計學方法:采用SPSS 13.0統計軟件進行卡方或列聯表分析處理，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 ER在葡萄胎組織中的表達情況:ER陽性表達主要位于細胞質，有少量細胞核、細胞膜著色。在正常絨毛、流產水腫絨毛、葡萄胎及侵襲性葡萄胎組織中，ER主要表達于絨毛、絨毛外滋養葉細胞及蛻膜組織。正常絨毛、流產水腫絨毛中以強陽性表達為主，葡萄胎組織中以弱陽性及中陽性表達為主，侵襲性葡萄胎以弱陽性表達為主。其陽性表達率分別為90.0%、95.0%、67.9%、65.7%、22.2%。其中正常絨毛組與流產水腫絨毛組陽性表達率差異無統計學意義(χ2=0.36，P＞0.05);正常絨毛組與葡萄胎組陽性表達率差異有統計學意義(χ2=4.13，P＜0.05);流產水腫絨毛組與葡萄胎組陽性表達率差異有統計學意義(χ2=6.26，P＜0.05);葡萄胎組與侵襲性葡萄胎組陽性表達率差異有統計學意義(χ2=6.55，P＜0.05)，提示隨著滋養細胞惡性程度的增加，ER染色陽性細胞數及染色強度降低且差異有統計學意義(P＞0.05)。詳見表1、圖 1。

2.2 PR在葡萄胎組織中的表達情況:PR陽性表達主要位于細胞核，呈棕黃色顆粒狀著色，同時有少量細胞質、細胞膜及細胞間質著色。PR在正常絨毛、稽留流產絨毛水腫、葡萄胎中主要表達于絨毛內外的細胞滋養葉細胞，為弱陽性表達;在侵襲性葡萄胎組織中無表達。ER在正常絨毛、流產水腫絨毛、葡萄胎及侵襲性葡萄胎組織中，陽性表達率分別為5.00%、10.00%、3.57%、2.86%、0%。正常絨毛組與稽留流產水腫絨毛組陽性表達率差異無統計學意義(χ2=0.18，P＞0.05);正常絨毛組與葡萄胎組陽性表達率差異無統計學意義(χ2=0.15，P＞0.05);流產水腫絨毛組與葡萄胎組陽性表達率差異無統計學意義(χ2=1.54，P＞0.05);葡萄胎組與侵襲性葡萄胎組陽性表達率差異無統計學意義(χ2=0.29，P＞0.05)，提示PR表達與滋養細胞惡性程度無關。詳見表1、圖1。

表1 ER、PR在葡萄胎組織中的表達情況

圖1 圖A:ER在正常絨毛的表達(HC，×100);圖B:ER在水腫絨毛的表達 (HC，×100);圖C:ER在葡萄胎的表達(HC，×100);圖D:ER在侵襲性葡萄胎的表達 (HC，×100);。圖E:PR在正常絨毛的表達(HC，×100);圖F:PR在水腫絨毛的表達 (HC，×100);圖G:PR在葡萄胎的表達(HC，×100);圖H:PR在侵襲性葡萄胎的表達(HC，×100)

3 討論

葡萄胎是以絨毛水腫、滋養細胞不同程度增生的異常胎盤。根據形態學、細胞遺傳學和臨床病理特征不同，葡萄胎是一種異常的人類妊娠，將其分為完全性葡萄胎及部分性葡萄胎。葡萄胎中合體滋養細胞產生多種激素，如絨毛膜促性腺激素、胎盤泌乳素(hPL)、胎盤生長素、雌激素及孕激素等。水泡狀胎塊含有一定量的雌激素與孕激素，這些激素隨水泡狀胎塊的清除而減少或消失。

雌激素受體(estrogen receptor，ER)、孕激素受體(progesterone receptor，PR)是雌、孕激素與靶器官的結合位點，是一種甾體類激素，是對雌、孕激素有高度親和力的蛋白質。雌、孕激素的作用可以通過ER、PR表達出來。雌激素受體、孕激素受體存在于正常乳腺上皮、子宮內膜、子宮肌層、宮頸組織和卵巢。Gorski等提出雌激素受體的二步作用機制［5］，甾體激素以弱散方式進入靶細胞內與存在于細胞漿內的雌激素受體識別并結合，使雌激素受體被激活;在一定溫度下，激素－受體復合物轉位于細胞核，然后發生一系列反應，和結直腸癌等雌激素非靶器官腫瘤的發生、發展可能存在密切關系。

目前國內外研究女性許多疾病如乳腺癌、子宮內膜異位癥、子宮肌瘤、子宮內膜癌、絕經后骨質疏松、原因不明月經過少、復發性流產等發病風險都與ER的表達有關。研究發現組織中存在的ER、PR隨腫瘤惡性程度的增加其陽性表達減少，且ER、PR的狀態又與這些器官惡性腫瘤的分化程度、病理類型、臨床分期、預后及對內分泌治療的反應有著密切聯系［6］。目前對ER、PR與葡萄胎的相關性研究國內外文獻研究較少，國內張曉華等曾探討雌激素受體(ER)及孕激素受體(PR)在葡萄胎的表達及臨床意義［7］:ER表達與葡萄胎惡變高危因素年齡、葡萄胎惡變度、葡萄胎的惡變傾向負關聯，PR表達與葡萄胎惡變傾向未見相關性，提示ER可能作為提示葡萄胎惡變傾向的重要指標之一。安瑞芳等研究結果表明:ER表達與GTT惡性程度相關，提示對ER的監測有助于判斷療效及預后，且為GTT的激素治療提供了可行性的依據［8］。

本實驗結果表明，ER在正常絨毛、水腫絨毛及葡萄胎中的表達具有顯著差異，進一步研究發現，葡萄胎與侵襲性葡萄胎中ER的表達也存在統計學差異，提示ER的表達與滋養葉細胞的惡性程度有關。因此，對ER的監測有助于葡萄胎的臨床療效及預后判斷，并可為該病提供內分泌治療的思路。本實驗研究成果可以為開發以ER為作用靶點的抗腫瘤藥物提供有效的理論依據。

［1］Sebire NJ.Fisher RA，Rees HC.Histopathological diagnosis of partial and complete Hydatidiform mole in the first trim ester of pregnancy［J］.pediatr DeV pathol，2003，6(1):69.

［2］Moconnell TG，Murphy KM，Hafez M，et al.Diagnosis and Sub－classification of hydatidiform mole using p57 immunohistochem is try and moleculargenoty.Ping Validation and practice setting with development of analgorithmic approach［J］.Am J surg pathol，2009，33(6):805.

［3］楊 倩.P57 KiP2在水泡狀胎塊組織中的表達及意義［J］.吉林醫學，2010，31(6):729.

［4］熱汗古麗.P16、Caspase－3在葡萄胎組織中的表達相關研究［J］.新疆醫科大學學報，2011，34(3):158.

［5］袁 瑞，樂愛文，姚珍薇，等.ER.PR.VEGF及其受體在原因不明月經過少發病機機中的作用［J］.重慶醫學大學學報，2007，32(1):48.

［6］Lee P，Rosen DG，Zhu C，et al.Expression of progesterone receptor is a favorable prognostic marker in ovarian cancer［J］.Gynecol Oncol，2005，96(3):671.

［7］張曉華.雌激素受體和孕激素受體在葡萄胎中的表達和意義［J］.現代腫瘤醫學 2008，16(9):1595.

［8］安瑞芳.雌激素受體與妊娠滋養細胞腫瘤預后的相關性［J］.西安交通大學學報·醫學版，2009，30(2):221.