黃疸因素對免疫透射比濁法檢測血清白蛋白的影響

[摘要] 目的 探討免疫透射比濁法中黃疸對檢測血清白蛋白結果的影響。 方法 將雙份已知白蛋白濃度（低、高值）的血清中分別加入膽紅素純品，制成含不同膽紅素濃度梯度的黃疸血清，再用免疫透射比濁法測定其白蛋白含量，比較分析黃疸因素對血清白蛋白檢測的影響。 結果 普通黃疸（膽紅素濃度低于400 umol/L）對白蛋白檢測結果無顯著性差異（P>0.05）。 結論 選用免疫透射比濁法檢測血清白蛋白對黃疸的抗干擾能力較強。

[關鍵詞]黃疸；免疫透射比濁法；白蛋白；抗干擾

[中圖分類號] R446.11 [文獻標識碼] B [文章編號] 2095-0616（2013）12-122-02

在臨床工作中，人血清中很多因素對生化檢測結果存在干擾， 其中標本黃疸是臨床生化檢驗中最常見的一種干擾和影響因素[1]。隨著現代醫學的快速發展，檢驗結果的準確性在診療中起著重要的作用，多數診療的決定是根據實驗室檢驗結果做出的。近來有公司推出血清白蛋白免疫透射比濁法的商品化試劑，該試劑基于抗原抗體結合反應開發出來的，具有特異性強，穩定性好的優點，但其抗干擾能力目前尚無權威性的報告，國內臨床普遍擔心由于標本因素會給檢測結果帶來影響，以致現在這種新型免疫透射比濁法的商品化試劑還沒有在臨床上大規模使用。因此，本實驗單就黃疸因素對免疫透射比濁法檢測血清白蛋白的影響進行探討。現報道如下。

1 儀器與方法

1.1 儀器與試劑

1.1.1 儀器 日立7180（日本）生化分析儀。

1.1.2 試劑及校準品 采用芬蘭Orion Diagnostica公司產品，批號為67748。

1.1.3 質控品 低值、高值采用北京利德曼公司生產的質控液（低值208091G、高值205311E），中值采用北京豪邁公司生產的質控液（6872F）。

1.2 黃疸的血清標本的制備

取含低、高濃度白蛋白雙份新鮮血清，白蛋白含量分別為35.50 g/L（低值白蛋白組）及51.08 g/L（高值白蛋白組），將膽紅素純品與上述雙份新鮮血清制成含不同膽紅素濃度梯度的黃疸血清，黃疸濃度依次為34.5 μmol/L，99.0 μmol/L，189.0 μmol/L，378 μmol/L，756 μmol/L。原低、高值白蛋白血清作為對照組標本。

1.3 原理

免疫透射比濁法是基于液相免疫沉淀反應原理的檢測。將抗人白蛋白抗體加入到一定比例的樣本和緩沖液中，抗體和樣本中的白蛋白產生凝集反應，導致混合物濁度的增加，產生的濁度在340 nm波長處的吸光度與白蛋白濃度成正比，與同樣處理的白蛋白標準品比較，可計算血清白蛋白的濃度。

1.4 測定與分析

將儀器進行日常維護并調試到最佳狀態。免疫透射比濁法用SPLINE方法檢測，多點定標通過；再用質控品進行白蛋白檢測質控，檢測均理想在控。分別對兩液不同膽紅素濃度的血清進行雙份白蛋白測定。

1.5 統計學處理

采用SPSS12統計軟件進行統計分析，計量資料以（）表示，測定結果進行配對t檢驗。

2 結果

低值白蛋白組隨膽紅素濃度升高而所測白蛋白結果卻無顯著性差異（P1>0.05），同樣高值白蛋白組白蛋白結果也不隨膽紅素濃度變化而呈顯著性變化（P2>0.05）。如表1。

3 討論

ALB由肝實質細胞合成，是血漿中含量最多的蛋白質，占總蛋白的40%～60%。對維持人體生理功能十分重要，不僅作為內源性氨基酸營養源；還具有相當強的酸堿緩沖能力；同時它也是血漿中很重要的載體，許多水溶性差的物質如膽紅素、膽汁酸鹽、前列腺素、類固醇激素、金屬離子、多種藥物等等，都是通過與白蛋白的結合被運輸；幫助維持血液膠體滲透壓；由于白蛋白分子量較小，它在血管外體液中的濃度經常被臨床作為各種膜屏障完整性良好的指標。白蛋白也是群體調查時常用的指標，人群調查發現平均血清白蛋白水平低，往往與膳食蛋白攝入量不足有關，是孕婦孕期營養膳食指導提供借鑒的良好指標之一。對妊娠晚期的孕婦進行血清蛋白的監測，防止妊娠中毒癥的發生，保證孕婦母子的健康，有一定的臨床價值[2]。

因此，準確測定血清中白蛋白含量將給疾病的診斷、療效觀察及預后判斷提供重要的參考依據[3]。目前溴甲酚綠（紫）染料結合法測定血清白蛋白仍是臨床最廣泛使用的方法，但該方法一直存在一定缺陷，根本原因是溴甲酚綠（紫）易與非白蛋白物質結合而影響檢測結果[4-5]。免疫透射比濁法測白蛋白是最近外國公司推出的白蛋白檢測新方法，國外正在推廣使用，目前國內白蛋白這種檢測方法的臨床應用還并不普及，主要是擔心該方法的可靠性。免疫透射比濁法是基于抗原抗體結合反應的原理開發出來的，因此具有較的強特異性[6]，另據芬蘭Orion Diagnostica公司提供的資料，該商品試劑的穩定性很好，抗溶血及脂血的干擾能力也較為理想，同時本試驗也顯示黃疸因素對其影響也十分有限，756 μmol/L以下的膽紅素基本對白蛋白的測定無影響，而且不同濃度的膽紅素無論對低值白蛋白還是高值白蛋白的測定均無顯著性干擾（P1>0.05；P2>0.05）。因此，選用免疫透射比濁法檢測白蛋白時，普通黃疸（膽紅素值<400 μmol/L）對其結果測定應該是沒有影響的。

免疫透射比濁法血清白蛋白檢測比較傳統的溴甲酚綠（紫）染料結合法的特異性更好，抗干擾能力更強，尤其在抗黃疸因素干擾方面更出色，同時免疫透射比濁法對設備要求不高，操作簡便，試劑穩定且成本適中，適合在各級醫療機構實驗室開展。

[參考文獻]

[1] 叢玉隆，張海鵬.血液學檢驗分析質量控制的重要因素[J].中華醫學檢驗雜志，1998，1（21）：53.

[2] 金偉平.孕婦血清蛋白變化與妊娠水腫的關系[J].齊齊哈爾醫學院學報，2008，4（29）：437.

[3] 馮志偉，馮朔，瞿幸華.忻州地區健康成人血清總蛋白、清蛋白及清蛋白/球蛋白比值的參考范圍調查[J].國際檢驗醫學雜志，2012，16（1）：1958-1959.

[4] 姚少羽，孫艷虹，高玲，等.兩種方法測定血漿白蛋白的方法學比較[J].實用醫學雜志，2004，2（4）：32-33.

[5] 忻鼎廣，石娟娟，等.溴甲酚類試劑在測定腎病綜合征和血液透析患者血清白蛋白時的偏差[J].檢驗醫學，2006：3（21）：231-233.

[6] 彭鳳，應春妹，徐曉萍，等.免疫透射比濁法與免疫散射比濁法檢測特定蛋白的比較研究[J].現代檢驗醫學雜志，2011，26（1）：45-47.

（收稿日期：2013-04-17）