糖痛方對糖尿病大鼠肢體缺血再灌注后肝腎ICAM-1 和MPO 表達的影響

黃 達 李鳴鏑 鄭亞琳 王秋虹 林 蘭

肢體缺血再灌注損傷(ischemic reperfusion injury of limb，IRIL)是臨床上常見的病理生理過程，斷肢再植、肢體主要供血動脈修補術、下肢血栓再通術以及骨外科長時間使用止血帶等均可以引起IRIL。研究表明，IRIL 不僅可以引起肢體遠端組織嚴重損傷，而且可以導致遠隔臟器功能障礙，甚至出現多臟器衰竭，其中肝、腎是最常見的兩個受損器官［1，2］。由于糖尿病患者體內存在明顯的氧化應激狀態并且常合并周圍血管病變等并發癥，因此與非糖尿病患者相比，臨床上糖尿病患者更容易發生IRIL 并且損傷程度也更為嚴重［3］。目前IRIL 的實驗研究主要針對正常大鼠，對糖尿病大鼠的研究很少，本實驗在糖尿病大鼠肢體缺血再灌注模型的基礎上采用糖痛方治療，并設立模型組和正常對照組，通過檢測各組大鼠血漿、肝、腎ICAM-1 和MPO 的表達水平，探討肢體缺血再灌注后糖尿病大鼠肝腎損傷的作用機制以及糖痛方的保護機制。

材料與方法

1.實驗材料:(1)實驗動物:健康雄性SD 大鼠70 只，體重180 ±20g，購自北京華阜康生物科技股份有限公司，飼養于中國中醫科學院廣安門醫院動物房。(2)實驗藥物:糖痛方:由黃芪、桂枝、白芍、川芎、細辛、姜黃、土鱉蟲組成。每30 付中藥熬成1000ml 液體(A 液)，A 液使用純凈水稀釋1 倍為B液，B 液稀釋1 倍為C 液。(3)主要試劑和設備:鏈脲佐菌素(Sigma 公司)，精蛋白鋅胰島素注射液(江蘇萬邦生化醫藥股份有限公司)，Rat sICAM -1/CD54 ELISA 試劑盒(R＆D Systems 公司)，MPO 試劑盒(南京建成生物工程研究所)，ICAM-1(G-5)(Santa 公司)，MPO(M-17)(Santa 公司)，7160 全自動生化儀(日本日立公司)，STAT FAX 2100 全自動酶標儀(Awareness Technology 公司)，小鼠/山羊超敏二步法免疫組化檢測試劑(北京中杉金橋生物技術有限公司)?！?br>